【正文】 預(yù)期結(jié)果： 進度安排： 2020 年 7 月： 查閱資料撰寫實驗方案 2020 年 8 月： 做各準(zhǔn)備實驗（試劑配制、材料采取） 2020 年 9— 12 月：寫開題報告，正式進入實驗研究 2020 年 12 月 — 2020 年 3 月：完成試驗，收集畢業(yè)論文資料并開始撰寫論文 2020 年 4 月 — 5 月：論文定稿，準(zhǔn)備論文答辯事宜 2020 年 6 月：畢業(yè)論文答辯 預(yù)期結(jié)果： 關(guān)的生理數(shù)據(jù)和結(jié)論，了解與甘蔗宿根性強弱相關(guān)的生理特性和生理指標(biāo)； 甘蔗宿根性強弱在生理指標(biāo)上所存在的一些差異 及其規(guī)律。由于宿根甘蔗具有很大的生產(chǎn)潛力和應(yīng)用前景，因此從生理角度對強宿根甘蔗進行研究，對今后強宿根甘蔗新品種的選育將具有深遠意義。 可行性分析： ，可以參考前人的研究方法及思路； 9720 ROC25 雜交分離產(chǎn)生的宿根性強、弱差異典型的甘蔗品種創(chuàng)新后代，為具有相同遺傳背景的研究材料提供有利基 礎(chǔ)； 。 Fw磷酸緩沖液混合液 +1ml 30％三氯乙酸溶液（鈍化酶活性）。磷酸緩沖液混合液，空白樣品加入 9ml 重復(fù)樣品各加 9ml 用紫外— 可見光分光度計測定 540nm 處吸光值，計算還原糖含量 (mg/g)。 還原糖含量測定 參照高繼國 [21]的方法，并略作修改。Fw反應(yīng)體系為 1ml酶提取液 +2ml 10%蔗糖溶液 +5ml緩沖液（中性轉(zhuǎn)化酶用 檸檬酸 磷酸緩沖液，酸性轉(zhuǎn)化酶用 磷酸緩沖液），酶液鈍化組為對照，即 1ml酶液經(jīng)過沸水浴 10min 鈍化后使用，體系其他試劑相同，將反應(yīng)混合液置于 37℃水浴中保溫（中性轉(zhuǎn)化酶 ，酸性轉(zhuǎn)化酶 ）后，吸取 1ml+ 3， 5二硝基水楊酸 于 10ml 刻度試管中，沸水浴中加熱 5min 后立即放入冷水中冷卻至室溫，加蒸餾水定容 10ml并顛倒混勻。上清液即酶提取液（用于測定中、酸性轉(zhuǎn)化酶活性和還原糖含量）。用紫外 — 可見分光光度計測吸光值 OD485，計算可溶性糖含量 (mg/g)。反應(yīng)體系： + +1ml 9%苯酚 +5ml濃硫酸，搖勻。 可溶性糖含量測定 參照 孔祥生 [22]的方法，將取樣后處理好的葉片剪成 ～ 方形小塊，混勻，準(zhǔn)確稱取 左右樣品，放入試管中，加入 8ml 蒸餾水。取上清液 +5ml 考馬斯亮蘭 G250(100mg 考馬斯亮蘭 G250 溶于 50ml 95%乙醇攪拌，加入 l20ml 85%磷酸，混合后稀釋至 1000ml，過濾 )混勻， 2～3min 后，用紫外 — 可見光分光度計測定吸光值 OD595，計算可溶性蛋白含量（ μg/g）。 生理測定 還原糖含量 酸性、中性轉(zhuǎn)化酶 活性 可溶性蛋白含量 可溶性糖含量 硝酸還原酶活性 其它 考馬斯亮藍法 磺胺顯色法 二硝基水楊酸法 苯酚法 二硝基水楊酸法 數(shù)據(jù)處理 結(jié)果分析 研磨成漿，離心，收集上清液 葉片剪成 ～ 方形小塊 資料收集 甘蔗實驗品種 實驗方案： . 可溶性蛋白含量測定 參照高繼國 [21]的方法，并略作修改。 2. 完成畢業(yè)論文。因此，從生理角度對強宿根甘蔗進行深入研究，對今后強宿根甘蔗的選育和評價將具有重要意義。發(fā)展宿根甘蔗生產(chǎn)，對降低種植成本，提高甘蔗產(chǎn)量和蔗農(nóng)收益、促進農(nóng)業(yè)和相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，乃至對整個國民經(jīng)濟的發(fā)展都具有重要的地位和 作用。 研究目標(biāo)： 糖是人類必需的食用品之一，甘蔗既是一種重要的糖料作物和理想的能源作物，也是糖果、飲料等食品工業(yè)的重要原料。 ：甘蔗宿根性強弱在生理指標(biāo)上的差異性及其規(guī)律。 可溶性蛋白、可溶性糖、還原糖、轉(zhuǎn)化酶（中性、酸性）、硝酸還原酶等物質(zhì)的含量的測定。 論文 (設(shè)計 )主要內(nèi)容（提綱）： 試驗材料 供試材料 選用云蔗 06407（強宿根）、云蔗 06408（弱宿根）、云蔗 06415（強宿根）和云蔗 06416（弱宿根）等 4 個宿根性強弱不同的甘蔗品種作為研究材料，對照種 ROC22 為生產(chǎn)上大面積推廣應(yīng)用的強宿根性甘蔗品種。方位寬（ 2020） [20]指出宿根性強的甘蔗品種在前期生長過程中，蔗株葉片中表現(xiàn)出較高的酸性轉(zhuǎn)化酶和過氧化物酶活性，并具有較高的淀粉、蔗糖和 N、 P、 K 含量。鄧祖湖等（ 2020） [17]錯誤 !未找到引用源。 Kark等 (1985)在田間試驗研究中發(fā)現(xiàn)赤霉素和乙烯利能顯著提高 eo6 eoj7s 和 eojs3 的蔗莖產(chǎn)量，一定濃度的生長素和赤霉素等生長調(diào)節(jié)劑均可減輕脫水，增加可溶性蛋白質(zhì)含量，從而達到提高宿根蔗產(chǎn)量的目的。 Madan等 [14,15]也證明在大生長期葉片轉(zhuǎn)化酶活性最高，成熟期下降。同年他們在溫室條件下，證明生長速度與酸性轉(zhuǎn)化酶活性與總糖和還原糖含量成正比。明確了老根系具有吸收作用，認為破畦松兜的增產(chǎn)效果最為明顯。我國栽培宿根蔗已有一千四百年以上的歷史 [9]，且發(fā)現(xiàn)有宿根比世界其他各國年數(shù)更長的甘蔗 [10]。 選題的研究現(xiàn)狀（理論淵源及演化、國外相關(guān)研究綜述、國內(nèi)相關(guān)研究綜述）： 宿根甘蔗在生產(chǎn)上具有很大的潛力，其研究為世界各甘蔗生產(chǎn)國所重視。選育過程中往往受到如親本配合力和選育年限長等許多因素的影響，所以選育出一個宿根性好的品種，往往需要很長的時間才能實現(xiàn)。提高甘蔗宿根性育種研究已越來越受到人們的重視 [47]。 栽培宿根蔗具有早生快發(fā)、提早成熟、省工省種、成本低、早分蘗、早拔節(jié)、生長期長、植株高大、有效莖多、高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)、早熟高糖、增產(chǎn)潛力大、錯開農(nóng)時和耐旱耐澇等許多優(yōu)點，在 甘蔗生產(chǎn)中占有極其重要的地位，為世界產(chǎn)蔗糖國家所重視。美國夏威夷宿根蔗的面積占總植蔗面積的80%～ 85%，菲律賓宿根蔗的面積占總植蔗面積的 60%～ 70%，巴西宿根蔗的面積占總植蔗面積的 80%～90%，我國的蔗區(qū)常年 50%～ 70%以上 [3]。宿根性是穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的重要基礎(chǔ)。 論文（設(shè)計）題目： 甘蔗宿根性與宿根發(fā)株期生 理的關(guān)系 院 － 系： 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 專 業(yè)： 生物科學(xué) 年 級： 2020 學(xué)生姓名： 劉金堂 學(xué) 號： 202020050175 導(dǎo)師及職稱： 覃偉（實習(xí)研究員） 王棟（講師） 日 期： 2020 年 11 月 目 錄 一、開題報告 二、開題記錄表 三、任務(wù)書 四、指導(dǎo)記錄 五、指導(dǎo)教師評定表 六、專家評定表 七、答辯委員會評定表 八、答辯記錄表 九、誠信承諾書 紅河學(xué)院本科生畢業(yè)論文（設(shè)計）開題報告 姓名 劉金堂 性別 男 學(xué)號 202020050175 院－系 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 專業(yè) 生物科學(xué) 年級 2020 論文題目 甘蔗宿根性與宿根發(fā)株期生理的關(guān)系 □√ 教師推薦題目 □自擬題目 題目來源 教師科研 題目類別 應(yīng)用研究 指導(dǎo)教師 覃偉 /王棟 選題的目的、意義 (理論意義、現(xiàn)實意義 ): 宿根蔗是指上一造甘蔗收獲后，留在土中的蔗蔸上的側(cè)芽在適宜的環(huán)境條件下，萌發(fā)出土長成為新的植株，經(jīng)過人工栽培而成為新的一造甘蔗 [1]。宿根性是指新植或上代甘蔗收斬后，宿根發(fā)株的快慢強弱和數(shù)量，最終成莖率，有效莖數(shù)和產(chǎn)蔗量高低的統(tǒng)稱 [2]。宿根蔗栽培是世界各蔗 糖生產(chǎn)國家和地區(qū)甘蔗生產(chǎn)的主要種植制度。因此，開展強宿根甘蔗宿根發(fā)株期生理特性研究，對了解強宿根甘蔗宿根發(fā)株期的生理特性和強宿根甘蔗新品種的篩選評價具有重要意義。但近年來，宿根蔗的產(chǎn)量偏低不穩(wěn)，宿根年限也縮短，宿根面積有減少趨勢，究其原因主要是受品種退化、管理措施不當(dāng)?shù)仍虻木C合影響。當(dāng)前 , 因地制宜地選育宿根性強的品種是宿根蔗豐產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)。因此，從宿根甘蔗發(fā)株期的生理特性進行研究，找出與甘蔗強宿根性相關(guān)的生理特性，用于甘蔗宿根性強弱的評價 ，便于強宿根甘蔗新品種的早期篩選。吳坤宗等（ 1956） [8]在發(fā)表的《珠江三角洲宿根甘蔗減產(chǎn)原因與增產(chǎn)途徑》提到宿根甘蔗生產(chǎn)問題。周可湧（ 1963） [11]指出宿根蔗的基礎(chǔ)是芽和根，且與外界條件有密切關(guān)系。 Hatch等 [12]證明甘蔗未成熟莖組織中酸性轉(zhuǎn)化酶活性與節(jié)間伸長速率成正比，活性最高時期與快速生長期相吻合，天氣變涼或千早使生長下降時，此酶幾乎消失，這個時期成熟莖中蔗糖含量快速增加。陳偉棟、陳西凱[13]有關(guān)甘蔗葉片轉(zhuǎn)化酶與甘蔗進化生長和糖分積累關(guān)系的研究表明，酸性轉(zhuǎn)化酶活性越高，新植蔗種苗萌發(fā)越快。因而，葉片中的轉(zhuǎn)化酶活性及還原酶和蔗糖的含量在一定程度上反映植株 生長和蔗糖積累的情況。張勇和陳西凱等[16]認為還原糖含量是影響甘蔗萌發(fā)的主要原因之一。 研究表明宿根性狀配合力是甘蔗宿根性育種的關(guān)鍵；葉燕萍等（ 2020） [18]研究表明新植蔗前期施用低濃度乙烯利可促進宿根蔗出苗整齊，早生快發(fā)，增加了甘蔗產(chǎn)量；張勇和陳西凱 [19]的研究表明， K促進了轉(zhuǎn)化酶的活力，且與甘蔗的生長正相關(guān)。如果這是普遍存在的，它們可望作為評價宿根性的生理生化輔助指標(biāo)，對于提高甘蔗宿根性選擇的準(zhǔn)確率，將具有重要意義。 實驗儀器及試劑 主要儀器：可見分光光度計、試管、水浴鍋、離心管 主要試劑：考馬斯亮藍 G250、 3， 5二硝基水楊酸、 1%對氨基苯磺酸、 %α 萘胺、苯酚、濃硫酸 試驗方法 采樣 于 2020年 3月 20日、 2020年 4月 20日、 2020年 5