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正文內(nèi)容

20xx性別鑒定計(jì)-展示頁

2025-01-17 00:46本頁面
  

【正文】 ,陽性對(duì)照加入男性基因組DNA。即取一個(gè)干凈的PCR管,在冰浴中,依序加入表1中的成分(除了模板以外其他都加好)。
正文
材料和試劑
實(shí)驗(yàn)材料:人口腔黏膜細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)試劑:ddH2O、10Buffer、dNTP( each)、PrimerF(10μM)、PrimerR(10μM)、Taq酶(5U/μL)、TAE、EB、agarose,etc.
實(shí)驗(yàn)儀器:離心機(jī)、水浴鍋、渦旋振蕩器、微量移液器、不同類型的槍頭、 Ep管、金屬浴鍋、制膠槽、制膠板、樣品梳等
(1)取一高壓過的Ep管,做好標(biāo)記; (2)取60μL細(xì)胞裂解液至一個(gè)Ep管中;
(3)先用水漱口,然后用消毒牙簽(鈍頭)刮取口腔上皮,棄去第一次刮取物,保留第二刮取物;
(4)將消毒牙簽(鈍頭)放于Ep管細(xì)胞裂解液中快速轉(zhuǎn)動(dòng),釋放細(xì)胞; (5)50℃水浴鍋保溫20min。因而,凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA片段,是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。含有電解液的凝膠在電場(chǎng)中,其中的電離子會(huì)發(fā)生移動(dòng),移動(dòng)的速度可因帶電離子的大小、形態(tài)及電荷量的不同而有差異。各種生物大分子在一定pH條件下,可以解離成帶電荷的離子,在電場(chǎng)中會(huì)向相反的電極移動(dòng)。但是由于人類的基因組太大,有700多MB,引物要從700多MB的序列中識(shí)別615bp的序列十分困難,因此,本實(shí)驗(yàn)選取的是一種更容易被引物識(shí)別的序列——y染色體上特異性重復(fù)序列(human ychromosome specific repetitive DNA family sequence)來進(jìn)行PCR擴(kuò)增。SRY基因是人類及已知許多哺乳動(dòng)物中一段Y染色體特異的保守序列,人類SRY編碼區(qū)全長615bp。本實(shí)驗(yàn)就是通過PCR技術(shù)擴(kuò)增y染色體上特異性重復(fù)序列來實(shí)現(xiàn)性別鑒定。而PCR的方法操作簡(jiǎn)單,準(zhǔn)確率高。因此,無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸,還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發(fā)、皮膚或血液,只要能分離出一丁點(diǎn)的DNA,就能用PCR加以放大,進(jìn)行比對(duì)。通過此次實(shí)驗(yàn),我們得到了預(yù)期結(jié)果,只有極少數(shù)因?qū)嶒?yàn)操作等人為失誤導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)與預(yù)期不符的情況發(fā)生,總之,用PCR技術(shù)擴(kuò)增y染色體上特異性重復(fù)序列的方法是可靠的。性別鑒定計(jì)篇一:性別鑒定
PCR性別鑒定實(shí)驗(yàn)
摘要:
人類y染色體上特異性重復(fù)序列(humanychromosome specific repetitive DNA family sequence)是一種重復(fù)性很高的特異性序列,引物能在人類廣大的基因組中對(duì)它進(jìn)行特異性識(shí)別,因此,它是良好的PCR材料。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)人黏膜細(xì)胞的DNA提取、基因組DNA制備、PCR擴(kuò)增y染色體上特異性重復(fù)序列、PCR產(chǎn)物的電泳檢測(cè)的方法實(shí)現(xiàn)人的性別鑒定。
關(guān)鍵詞: 基因組DNAPCR y染色體上特異性重復(fù)序列電泳檢測(cè)
引言
PCR(Polymera
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