【正文】 水率W0隨鹽濃度的增大而降低,反膠團直徑減小, 空間排阻作用增大, pro溶解下降. 如，AOT/異辛烷系統(tǒng)的含水率與I0.5成正比。,第五十四頁，共九十二頁。sh249。,2 反膠束的溶解(r243。ngjiě)和分離作用： 反膠團的微水池的水可溶解氨基酸、肽和蛋白質等生物分子, 為生物分子提供易于生存的親水微環(huán)境. 因此,反膠團萃取可用于氨基酸、肽和蛋白質等生物分子的分離純化，特別是蛋白質類生物大分子。,2 反膠束的溶解(r243。,第五十一頁，共九十二頁。)一定濃度S和水，在有機溶劑中所會形成內部含少量水的膠束。,第五十頁，共九十二頁。ngdī)。,基本(jīběn)術語,膠束(micelles): 向水中加入表面活性劑，水溶液的表面張力隨[S]增大而下降。qǔ) （反膠團萃取(cu236。n)雙電層，加入電解質可破壞雙電層，也能使乳狀液聚沉,第四十八頁，共九十二頁。,5.電解質破乳,對于稀的乳狀液，起穩(wěn)定作用的是擴散(ku242。破乳劑也是一種表面活性劑，有很高的表面活性，能將界面上原來存在的乳化劑頂替走；但破乳劑分子一般具有分支結構，不能在界面上緊密排列成牢固的界面膜，從而使乳狀液的穩(wěn)定性大大降低。)破乳,化學破乳的原則是破壞吸附在界面上的乳化劑，使其失去乳化能力。,4.化學(hu224。lǜ)破乳,當乳狀液經(jīng)過一個(yī ɡ232。,第四十六頁，共九十二頁。ngdī)，使聚結速率加快，有利于膜的破裂。,破乳的方法(fāngfǎ)：,1.加熱(jiā r232。n)夾帶。 由蛋白質引起的乳化多為水包油型（O/W）。),在發(fā)酵液中，蛋白質是引起乳化(rǔhu224。,乳化(rǔhu224。ng)程度，HLB數(shù)越大，親水性越強，形成O/W型乳濁液，HLB數(shù)越小，親油性越強，形成W/O型乳濁液。ng)值）,HLB,HLB數(shù)即親水與親油平衡(p237。,（親憎平衡(p237。ix237。,第四十二頁，共九十二頁。),分散(fēns224。鹽分↑分配系數(shù)↑,第四十一頁，共九十二頁。)增加，擴散性能減小。qǔ)操作的因素：,溫度(wēnd249。)（液液萃取）,第四十頁，共九十二頁。,二、溶劑萃取技術(j236。ngzh236。 物質的溶解和相似相溶原理。)的不穩(wěn)定性,③ 相分離性能,第三十九頁，共九十二頁。 z225。)問題,① 生物系統(tǒng)的錯綜復雜(cu242。,萃取需要考慮下列(xi224。)特點,① 萃取過程具有選擇性 ② 能與其他(q237。,第三十七頁，共九十二頁。,物理萃取 溶質根據(jù)相似相溶的原理(yu225。,根據(jù)(gēnj249。)提取上。ng)分離技術相結合，產(chǎn)生 了一系列新型分離技術： 超臨界流體萃?。⊿upercritical fluid extraction） 反膠團萃取（Reversed micelle extraction） 雙水相萃取技術（Partition of two aqueous phase system ）,液液萃取(cu236。,應用,比化學沉淀法分離程度高； 比離子交換法選擇性好、傳質快； 比蒸餾法能耗低； 生產(chǎn)能力大、周期短、便于連續(xù)操作、易實現(xiàn)自動化控制,優(yōu)點,第三十五頁，共九十二頁。qǔ),有機溶劑萃取法廣泛應用于抗生素、有機酸、維生素、激素等發(fā)酵產(chǎn)物工業(yè)規(guī)模(guīm243。)叫液液萃取，也稱溶劑萃取。,用溶劑從溶液中抽提物質(w249。,液固萃取(cu236。d242。)把有用物質從固體原料中提取到溶液中的過程稱為固液萃取，也稱浸取或浸出。,概念：用某種溶劑(r243。xu233。qǔ),液液萃取(cu236。,第三十二頁，共九十二頁。y242。),第四節(jié) 萃取(cu236。,一、概述(ɡ224。,缺點：所有的可溶性雜質都沒有除去，混雜在產(chǎn)物中間，給后續(xù)分離帶來困難。j236。n)3 特點：,基因工程(jīyīn gōngch233。,路線(l249。)破碎 （加變性劑）,離心除細胞(x236。,幾種(jǐ zhǒnɡ)常見的工藝路線（三）,化學(hu224。n)體的純化方法,缺點：細胞碎片和包含體一起被膜擋住，難以分開；而且膜的堵塞和濃差極化常導致可溶性蛋白質的滯留。)，用微孔膜除去可溶性蛋白質，封閉式操作，不污染環(huán)境也不受環(huán)境污染。n)2 的特點,優(yōu)點：應用了膜分離技術(j236。,路線(l249。nb225。,幾種(jǐ zhǒnɡ)常見的工藝路線（二）,機械(jīxi232。,基因工程包含(bāoh225。n)1 的特點,特點:用離心法將包含體與細胞碎片和可溶性蛋白質分開，擺脫了大量的雜蛋白、核酸、熱原、內毒素等雜質，使后面的分離純化簡單(jiǎndān)。,路線(l249。)破碎 (高壓勻漿、高速珠磨）,差速離心提取(t237。,幾種常見的工藝(gōngy236。,細胞破碎后，包含體呈顆粒狀，致密，離心（5000 20000g 15min）就可以沉淀。,包含(bāoh225。j237。,包含(bāoh225。（蛋白質折疊）,包含體主要由蛋白質構成，其中大多是基因表達產(chǎn)物。,分離包含體后，需使目標(m249。n)體的構成,基因表達(biǎod225。,第二十三頁，共九十二頁。ngj249。,重組DNA技術為大規(guī)模生產(chǎn)目標蛋白質提供了嶄新的途徑，開辟了現(xiàn)代生物技術發(fā)展的新紀元。所以，包涵體的出現(xiàn)不僅增加了生化工程師生物分離設計的難度，也為生物化學家的蛋白質折疊（protein folding）機理研究提出了新的課題。為此，欲獲得天然活性態(tài)的目標產(chǎn)物(chǎnw249。這些基因表達產(chǎn)物(chǎnw249。,包涵體主要由蛋白質構成，其中大多是基因表達產(chǎn)物(chǎnw249。因此當除去變性劑時，一部分蛋白質可以自動折疊成具有活性的正確構型，這一折疊過程稱為蛋白質的復性。hu224。hu224。包涵體難溶于水中，在變性劑溶液（如鹽酸胍、脲）中才能溶解。,包涵體（inclusion bodies），或包含體，是無定形的蛋白質的聚集，