【正文】 。尿透明度還易受某些鹽類結(jié)晶的影響。肝硬化病變累及線粒體時(shí)，多數(shù)AST升高程度超過ALT。②固相酶免疫測(cè)定：如常用的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：肝硬化的臨床意義肝硬化代償期患者血清ALT可輕度增高或正常，失代償期ALT可持續(xù)升高。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試綜合知識(shí)輔導(dǎo)：異相酶免疫測(cè)定異相酶免疫測(cè)定：又分為液相和固相酶免疫測(cè)定。①酶增強(qiáng)免疫測(cè)定技術(shù)（EMIT）：了解其基本原理，反應(yīng)后酶活力大小與標(biāo)本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測(cè)定結(jié)果就可推算出標(biāo)本中半抗原的量。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓象的分析與報(bào)告骨髓象的分析與報(bào)告包括骨髓有核細(xì)胞增生程度、粒細(xì)胞與有核紅細(xì)胞比例、粒系統(tǒng)細(xì)胞改變、紅系統(tǒng)細(xì)胞改變、巨核系統(tǒng)細(xì)胞改變、淋巴系統(tǒng)細(xì)胞改變、單核系統(tǒng)細(xì)胞改變和其他血細(xì)胞改變。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓涂片的檢查骨髓涂片的檢查（1）普通光鏡低倍鏡檢驗(yàn)：判斷骨髓增生程度；估計(jì)巨核細(xì)胞系統(tǒng)增生情況；觀察涂片邊緣、尾部、骨髓小粒周圍，有無體積較大或成堆分布的異常細(xì)胞。臨床上常用的穿刺部位包括胸骨、棘突、髂骨、脛骨等處。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓標(biāo)本的采集選擇骨髓標(biāo)本的采集選擇骨髓標(biāo)本大部分采用穿刺法吸取。方法簡(jiǎn)單迅速，組分影響較小，取樣量小，用一份溶液即可進(jìn)行多種元素分析，每毫升10微克濃度的鈉溶液也可測(cè)定。1935年制成第一臺(tái)火焰光譜光電直讀光度計(jì)，使得火焰光度法應(yīng)用范圍進(jìn)一步擴(kuò)大。并使用了參考元素技術(shù)。這是火焰光度法應(yīng)用中要選擇的關(guān)鍵條件?；鹧婀舛确ǔＳ玫幕鹧媸窃诖髿夂銐合陆?jīng)化學(xué)反應(yīng)而燃燒的?，F(xiàn)代的火焰分光光度計(jì)的基本框圖（見圖）示意出：試樣溶液經(jīng)霧化后噴入火焰，溶劑在火焰中蒸發(fā)，鹽粒熔融，轉(zhuǎn)化為蒸氣，離解成原子（部分電離），再由火焰高溫激發(fā)發(fā)光，發(fā)射的光經(jīng)切光器調(diào)制，并由單色器（通常是光柵）分光，選擇待測(cè)波長(zhǎng)譜線，經(jīng)光電轉(zhuǎn)換和電信號(hào)放大后檢出。酶法是一個(gè)偶聯(lián)反應(yīng)，參與反應(yīng)的酶有糖原磷酸化酶、葡萄糖磷酸變位酶及葡萄糖6磷酸脫氫酶，反應(yīng)中使NADP+還原成NADPH，形成NADPH在340nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度，該方法不受有機(jī)磷酸酯的干擾。染料法如孔雀綠直接顯色測(cè)定法。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血磷測(cè)定的參考值參考值：血清磷：～2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血磷的測(cè)定方法血清無機(jī)磷的測(cè)定方法一般有磷鉬酸法、染料法和酶法。叢玉隆進(jìn)行的另一個(gè)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，給健康人靜脈推注vc2000毫克，然后在不同時(shí)間段取尿，30分鐘后尿含vc600多毫克、1小時(shí)500多毫克、5小時(shí)后含幾十毫克（正常值），說明靜脈使用大劑量vc對(duì)糖尿病人的尿糖檢查干擾更大。一組人一天吃了9片vc，第二天尿含vc是300毫克。vc的影響到底有多大？叢玉隆再次做了試驗(yàn)，一組人一天吃3片vc（每片100毫克），第二天檢測(cè)結(jié)果是每毫升尿含vc30毫克。于是檢驗(yàn)科再次對(duì)病人的血樣化驗(yàn)，結(jié)果還是8毫克，叢玉隆仔細(xì)檢查了檢驗(yàn)程序和檢驗(yàn)設(shè)備，都沒發(fā)現(xiàn)問題，但檢驗(yàn)結(jié)果確實(shí)與病人實(shí)際病情不符。一天晚上急診科一患者化驗(yàn)的結(jié)果是血糖8毫克。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：VC影響血糖尿糖檢測(cè)解放軍總醫(yī)院檢驗(yàn)中心主任叢玉隆指出，維生素c（vc）可以還原尿糖檢測(cè)試劑中的酶，會(huì)導(dǎo)致尿糖檢測(cè)的結(jié)果失真，對(duì)于糖尿病患者來說，服用維生素要謹(jǐn)慎。三、采血后處理采血后針尖或毛細(xì)吸血管兩端立即用橡皮帽或橡皮泥封住，防止空氣氣泡進(jìn)入，并立即充分混勻達(dá)到抗凝目的，并立即送檢，從采血到送檢不宜超過20分鐘，以免血細(xì)胞代謝耗氧，使PO2和PH值下降PCO2升高。動(dòng)脈化毛細(xì)血管采血，用不超過42～45℃的濕巾熱敷采血部位皮膚5～15分鐘，使血液增加，血流加速，達(dá)到動(dòng)脈化，然后穿刺，穿刺要深，使血流快速自動(dòng)流出，棄去第一滴血，不能擠壓，用肝素化的毛細(xì)管吸?。ńㄗh采用廠家配套提供的專用毛細(xì)管），吸滿后一定要密封，混勻后立即送檢。用肝素化的注射器穿刺，采血部位首選小兒橈動(dòng)脈，小嬰兒可用顳淺動(dòng)脈取血，取完血一定要密封?？鼓齽┥倭藭?huì)使血液凝集，堵塞血?dú)夥治鰞x的流路系統(tǒng)，抗凝劑多了會(huì)影響血?dú)夂碗x子的檢測(cè)結(jié)果，大劑量的抗凝劑會(huì)嚴(yán)重使離子鈣偏低，誤導(dǎo)臨床。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：動(dòng)脈血?dú)鈽?biāo)本采集方法一、抗凝劑的配制首先推薦使用市場(chǎng)上有售的專用采血針，愿意自己配制抗凝采血針的用戶，%NS50ml+肝素鈉針劑2支（12500U）配制成肝素稀釋液備用，并做好無菌儲(chǔ)藏。某些密度介質(zhì)經(jīng)過離心后會(huì)自成梯度，例Percoll，可迅速形成梯度，CsCl、Cs2SO4和三碘甲酰葡萄糖胺經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間離心后也可產(chǎn)生穩(wěn)定的梯度。離心后，不同密度的樣品顆粒到達(dá)與自身密度相等的梯度層，即達(dá)到等密度的位置而獲得分離。2）預(yù)制梯度等密度離心法。離心前，離心管內(nèi)先裝入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介質(zhì)，待分離樣品鋪在梯度液的頂部，離心管底部或梯度層中間，同梯度液一起離心，利用各顆粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不同，使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層內(nèi)，達(dá)到彼此分離的目的。根據(jù)離心原理，可設(shè)計(jì)多種離心方法，常見下列三大類型：。離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時(shí)，當(dāng)懸浮顆粒密度大于周圍介質(zhì)密度時(shí)，顆粒離開軸心方向移動(dòng)，發(fā)生沉降；如果顆粒密度低于周圍介質(zhì)的密度時(shí)，則顆粒朝向軸心方向移動(dòng)而發(fā)生漂浮。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：離心技術(shù)的概況離心技術(shù)是利用物體高速旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力，使置于旋轉(zhuǎn)體中的懸浮顆粒發(fā)生沉降或漂浮，從而使某些顆粒達(dá)到濃縮或與其他顆粒分離之目的。某些密度介質(zhì)經(jīng)過離心后會(huì)自成梯度，例Percoll，可迅速形成梯度，CsCl、Cs2SO4和三碘甲酰葡萄糖胺經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間離心后也可產(chǎn)生穩(wěn)定的梯度。離心后，不同密度的樣品顆粒到達(dá)與自身密度相等的梯度層，即達(dá)到等密度的位置而獲得分離。2）預(yù)制梯度等密度離心法。離心前，離心管內(nèi)先裝入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介質(zhì)，待分離樣品鋪在梯度液的頂部，離心管底部或梯度層中間，同梯度液一起離心，利用各顆粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不同，使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層內(nèi)，達(dá)到彼此分離的目的。根據(jù)離心原理，可設(shè)計(jì)多種離心方法，常見下列三大類型：。離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時(shí)，當(dāng)懸浮顆粒密度大于周圍介質(zhì)密度時(shí)，顆粒離開軸心方向移動(dòng)，發(fā)生沉降；如果顆粒密度低于周圍介質(zhì)的密度時(shí)，則顆粒朝向軸心方向移動(dòng)而發(fā)生漂浮。通常所使用的離心機(jī)根據(jù)轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速大小的不同可分為普通離心機(jī)、高速離心機(jī)和超速離心機(jī)三類2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：離心技術(shù)的概況離心技術(shù)是利用物體高速旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力，使置于旋轉(zhuǎn)體中的懸浮顆粒發(fā)生沉降或漂浮，從而使某些顆粒達(dá)到濃縮或與其他顆粒分離之目的。前者主要用于分離生物材料，每次分離樣品的容量比較大，后者則主要用于研究純品大分子物質(zhì)，包括某些顆粒體如核蛋白體等物質(zhì)的性質(zhì)，每次分析的樣品容量很小，根據(jù)待測(cè)物質(zhì)在離心場(chǎng)中的行為（可用離心機(jī)中的光學(xué)系統(tǒng)連續(xù)地監(jiān)測(cè)），能推斷其純度、形狀和相對(duì)分子質(zhì)量等性質(zhì)。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：離心技術(shù)的工具離心機(jī)（centrifuge）是實(shí)施離心技術(shù)的裝置。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí)，粘度起到重要作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的，現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。提供激素和各種生長(zhǎng)因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（氫化可的松、地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。血漿與血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子。血漿的主要功能是運(yùn)載血細(xì)胞，同時(shí)也是運(yùn)輸分泌產(chǎn)物的主要媒介。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試免疫檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血漿的鑒別方法血漿是血液的液體成分，血細(xì)胞懸濁于其中。找不到精子必須離心后檢驗(yàn)，仍然找不到精子；方可報(bào)告無精。精液常規(guī)觀察：精液總?cè)萘浚ê辽?，精子活?dòng)情況，精子密度（個(gè)/毫升），精液液化時(shí)間（標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間），不動(dòng)精子（個(gè)/高倍視野）等。復(fù)檢內(nèi)涵應(yīng)包據(jù)：對(duì)血細(xì)胞分析儀測(cè)定的全部結(jié)果進(jìn)行評(píng)估，必要時(shí)包括原標(biāo)本重查，或重新用人工復(fù)查等。由于沒有復(fù)檢而產(chǎn)生的漏檢白血病、異常淋巴細(xì)胞、瘧原蟲，還有EDTA依賴性血小板假性降低等己引起的醫(yī)療糾紛，應(yīng)該引起我們深思。1989年Coulter公司制定了復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，調(diào)查了11個(gè)床位及性質(zhì)不同的醫(yī)療單位，它們均使用該公司的三分群血細(xì)胞分析儀，根據(jù)該公司的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，其復(fù)檢率為15%～60%，平均為40%，使手工分類減少40～85%，平均減少了60%，也就是說用節(jié)省下來的時(shí)間好好為40%需要分類的病人服務(wù)?？傊?xì)胞分析儀的結(jié)果僅僅是屬于過篩而己，不能完全代替人工鏡檢。一、為什么要復(fù)檢？考試用書 血細(xì)胞分析儀測(cè)定原理雖有不同，但它的各種項(xiàng)目的閾值是人設(shè)定的，而且是固定的，可是病人血細(xì)胞變化是千姿百態(tài)，有部分細(xì)胞難以識(shí)別或認(rèn)錯(cuò)干擾其它細(xì)胞計(jì)數(shù)，如有核紅細(xì)胞可影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)；細(xì)胞碎片、血小板聚集可影響血小板計(jì)數(shù)等。有的單位即使復(fù)檢，也沒有復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，隨心所欲，其復(fù)檢率只有百分之幾，這顯然是不負(fù)責(zé)任的。但是我們應(yīng)該認(rèn)識(shí)到血細(xì)胞分析儀還是一個(gè)過篩工具，至今最先進(jìn)的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀還不能完全取代人工檢查，仍然有部分標(biāo)本需要復(fù)檢。但需要昂貴的熒光顯微鏡，需要受過良好訓(xùn)練的技術(shù)人員、觀察和解釋結(jié)果易受主觀因素的影響，結(jié)果不宜長(zhǎng)期保存，IFA不宜在一般的實(shí)驗(yàn)室開展和應(yīng)用。從WB確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果看出，初篩試驗(yàn)盡管選擇質(zhì)量較好的試劑，如第三代ELISA，仍會(huì)有假陽性出現(xiàn)，必須通過確認(rèn)試驗(yàn)才能得出準(zhǔn)確結(jié)果。先用HIV1/2混合型試劑進(jìn)行檢測(cè)，如果呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告HIV抗體陰性；如果呈陽性反應(yīng)，則報(bào)告HIV1抗體陽性；如果不滿足陽性標(biāo)準(zhǔn)，則判為HIV抗體檢測(cè)結(jié)果不確定。國內(nèi)常用的確認(rèn)試驗(yàn)方法是WB.（一）免疫印跡實(shí)驗(yàn)（WB）免疫印跡實(shí)驗(yàn)是廣泛用于許多傳染病診斷的實(shí)驗(yàn)方法，就HIV的病原學(xué)診斷而言，它是首選的用以確認(rèn)HIV抗體的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方法，WB的檢測(cè)結(jié)果常常被作為鑒別其他檢驗(yàn)方法優(yōu)劣的“金標(biāo)準(zhǔn)”。在一些特殊情況下，當(dāng)抗體檢測(cè)無法滿足HIV感染診斷的需要時(shí)，病毒分離及測(cè)定、核酸檢測(cè)、抗原檢測(cè)可作為輔助手段使用，這包括對(duì)非典型血清學(xué)反應(yīng)樣品的診斷、HIV感染的窗口期診斷、新生兒早期診斷和對(duì)特殊樣品的診斷。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：HIV抗體常見檢測(cè)方法目前作為診斷手段使用的檢測(cè)主要包括抗HIV病毒抗體檢測(cè)、病毒培養(yǎng)、核酸檢測(cè)和抗原檢測(cè)。【正常參考值】正常人生育力指數(shù)》1.【臨床意義】，表明完全無生育能力。這時(shí)有嚴(yán)重ABO同種免疫史的孕婦非分泌型的胎兒血型鑒定提供了可能，也為在位于ABO基因部位的遺傳性疾病的產(chǎn)前診斷提供了可能，而可不必考慮胎兒是否為分泌型。已知由A基因產(chǎn)生的N乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶能將N乙酰氨基半乳聯(lián)接在H物質(zhì)末端的半乳糖上，形成A血型物質(zhì)，B基因產(chǎn)生的D半乳糖轉(zhuǎn)移酶將D半乳糖聯(lián)接在H物質(zhì)末端的半乳糖上，形成B血型物質(zhì)。實(shí)驗(yàn)中要注意控制溫度，以免由于抗血清中冷凝集素未被完全吸收而造成結(jié)果判斷錯(cuò)誤。即選擇抗血清與2%標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液恰能產(chǎn)生4+凝集的最高稀釋度，這樣才能在加入羊水后將相應(yīng)抗體中和掉不再出現(xiàn)4+凝集。置室溫30min，低速離心1分鐘觀察有無凝集。一、ABH分泌型血型的預(yù)測(cè)本試驗(yàn)是根據(jù)羊中分泌的血型物質(zhì)可將相應(yīng)抗血清中抗體中和原理設(shè)計(jì)的?？捎猩贁?shù)空泡。核形狀及結(jié)構(gòu)與1型相同或更不殊途同歸，染色質(zhì)較粗糙致密。染色質(zhì)細(xì)致呈網(wǎng)狀排列，可見1～2個(gè)至發(fā)生母細(xì)胞化的結(jié)果。胞質(zhì)豐富，染深藍(lán)色，含空泡或呈泡沫狀。核圓形、腎形或分葉狀、常偏位。Downey將其按形態(tài)特征分為三型：1型（空泡型）：最多見。許多蛋白質(zhì)變性時(shí)被破壞嚴(yán)重，不能恢復(fù)，稱為不可逆性變性。例如，前述的核糖核酸酶中四對(duì)二硫鍵及其氫鍵。反之，注意防止蛋白質(zhì)變性就能有效地保存蛋白質(zhì)制劑。物理因素可以是加熱、加壓、脫水、攪拌、振蕩、紫外線照射、超聲波的作用等；化學(xué)因素有強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、尿素、重金屬鹽、十二烷基磺酸鈉（SDS）等。變性蛋白質(zhì)和天然蛋白質(zhì)最明顯的區(qū)別是溶解度降低，同時(shí)蛋白質(zhì)的粘度增加，結(jié)晶性破壞，生物學(xué)活性喪失，易被蛋白酶分解。例如：無酶催化的反應(yīng) RX+H2O→ROH+Hx 慢 有酶存在時(shí) RX+E桹H→ROH+EX快 EX+H2O→E桹H+HX快2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨床檢驗(yàn)技師綜合輔導(dǎo)：蛋白質(zhì)的變性天然蛋白質(zhì)的嚴(yán)密結(jié)構(gòu)在某些物理或化學(xué)因素作用下，其特定的空間結(jié)構(gòu)被破壞，從而導(dǎo)致理化性質(zhì)改變和生物學(xué)活性的喪失，如酶失去催化活力，激素喪失活性稱之為蛋白質(zhì)的變性作用。酶的活性中心具有某些氨基酸殘基的R基團(tuán)，這些基團(tuán)往往是良好的質(zhì)子供體或受體，在水溶液中這些廣義的酸性基團(tuán)或廣義的堿性基團(tuán)對(duì)許多化學(xué)反應(yīng)是有力的催化劑。三、酶作用高效率的機(jī)理詳細(xì)機(jī)制仍不太清楚，主要有下列四種因素： 酶可以將它的底物結(jié)合在它的活性部位由于化學(xué)反應(yīng)速度與反應(yīng)物濃度成正比，若在反應(yīng)系統(tǒng)的某一局部區(qū)域，底物濃度增高，則反應(yīng)速度也隨之提高，此外，酶與底物間的靠近具有一定的取向，這樣反應(yīng)物分子才被作用，大大增加了ES復(fù)合物進(jìn)入活化狀態(tài)的機(jī)率。例如前述的H2O2酶的例子，可以顯著地看出，酶能降低反應(yīng)活化能，使反應(yīng)速度增高千百萬倍以上。催化劑的作用，主要是降低反應(yīng)所需的活化能，以致相同的能量能使更多的分子活化，從而加速反應(yīng)的進(jìn)行。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨床檢驗(yàn)技師綜合輔導(dǎo)：酶的作用機(jī)理一、酶作用在于降低反應(yīng)活化能在任何化學(xué)反應(yīng)中，反應(yīng)物分子必須超過一定的能閾，成為活化的狀態(tài)，才能發(fā)生變化，形成產(chǎn)物。所選用的檢測(cè)方法的總誤差必須在臨床可接受的水平范圍內(nèi)（也就是允許總誤差，TEa）。體內(nèi)和個(gè)體間變異分量表達(dá)為變異系數(shù)（分別為CVI和CVG）2012醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試質(zhì)量管理與控制輔導(dǎo)：準(zhǔn)確度的總誤差概念測(cè)定結(jié)果與真值的差異是隨機(jī)誤差（BE）