04第四章植物組織培養(yǎng)技術(四)-文庫吧資料
2025-01-22 06:27本頁面
【正文】 于胚根生長，因此，以光暗交替培養(yǎng)更佳。情況比較復雜。 CM、各種胚乳汁、酵母提取物，麥芽提取物等天然營養(yǎng)被廣泛使用 ?生長調節(jié)劑。 各種維生素一直被用于胚培養(yǎng)中，對初期幼胚一般是必須的。 ?一般 pH范圍在 （ 2）附加物 ?氨基酸類。 （ 4）產生愈傷組織 在幼胚培養(yǎng)中常常能在追加生長調節(jié)劑時誘發(fā)愈傷組織產生，進而分化形成胚狀體或不定芽。這樣產生的苗往往畸形、細弱、難易成活?？赏ㄟ^提高培養(yǎng)基滲透壓進行調整，也可以用生長素或天然營養(yǎng)物調節(jié)使胚正常生長。 （二）離體胚形態(tài)發(fā)生及影響因素 1. 離體胚形態(tài)發(fā)生 （ 1）正常胚胎發(fā)育： 成熟胚在適宜的培養(yǎng)條件下，維持胚的生長進行正常的胚胎發(fā)育過程，直至形成再生植株。 1. 成熟胚培養(yǎng) 一般指子葉期至發(fā)育成熟胚的培養(yǎng)，其培養(yǎng)較易成功。 4. 子房培養(yǎng) 子房培養(yǎng)是指授粉和未授粉的子房培養(yǎng) 5試管受精 試管受精指在無菌離體條件下培養(yǎng)離體的未受精子房或胚珠和花粉，使花粉萌發(fā)產生的花粉管進入胚珠從而完成受精過程。 幼胚： 原胚－球形胚－心型胚－魚雷胚－子葉胚 球形胚前期 心型胚前期 魚雷胚 球形胚 2. 胚乳培養(yǎng) 胚乳培養(yǎng)指對處于細胞期的胚乳組織進行離體培養(yǎng)的方法。 幼胚培養(yǎng) 則指胚齡處于早期原胚、球形期胚、心形期胚、魚雷期胚的培養(yǎng)。 一、植物胚胎培養(yǎng)的概念和應用 （二）植物胚胎培養(yǎng)分類 1. 胚培養(yǎng)： 指在無菌條件下將胚從胚珠或種子中分離出來，置于培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)的技術。 第五節(jié) 植物胚胎培養(yǎng) （一）胚胎培養(yǎng)的概念 1. 胚胎培養(yǎng)： 指使胚或具胚器官（如子房、胚珠等）在離體無菌條件下發(fā)育成幼苗的技術。 （ 2）分子標記鑒定： 標記檢測的是植物基因組DNA水平的差異 5. 流式細胞儀鑒定法 （三）花藥和花粉單倍體植株的染色體加倍 1. 在常規(guī)條件下處理 用 %? %秋水仙素處理花藥和花粉單倍體植株 2. 在組織培養(yǎng)條件下處理 用秋水仙素加倍也可在組織培養(yǎng)條件下進行。 3. 染色體數(shù)目鑒定 采用涂片法 (或壓片法 )和去壁低滲法，通過檢查根尖或莖尖染色體數(shù)目，排除嵌合體的干擾，可同時對根尖以外的細胞，如嫩葉細胞、花粉母細胞等的染色體進行觀察。一般情況下，倍性越高氣孔越大，單位面積氣孔數(shù)目越小。 ： ①體細胞組織的干擾。生長素和細胞分裂素共同作用調控愈傷組織形態(tài)發(fā)生的模式可以用來指導花藥和花粉培養(yǎng)中愈傷組織分化器官的培養(yǎng)。 6. 其他添加成分 （ 1）活性炭 （ 2）水解酪蛋白 （ 3）維生素 C （ 4）維生素 A （ 5）聚乙烯吡哆酮 （ 6）硝酸銀 （ 7）三十烷醇 （三）再分化培養(yǎng) 1. 胚狀體途徑 （ 1）直接胚狀體發(fā)生：從離體培養(yǎng)的花藥和花粉直接產生胚狀體 （ 2）間接胚狀體發(fā)生：離體培養(yǎng)的花藥和花粉先形成胚性愈傷組織，然后再由胚性愈傷組織分化出胚狀體 2. 器官發(fā)生途徑 1. 胚狀體途徑 （ 1）通過胚狀體途徑再生植株的，都是那些很容易做花藥 (花粉 )培養(yǎng)的基因型或從極佳生理狀態(tài)的母株上取到的處于最適宜發(fā)育時期的花藥 (花粉 ) （ 2）對于直接胚狀體途徑來說再分化培養(yǎng)一般只是將完成了誘導脫分化的花藥和花粉進行轉管培養(yǎng)。 一般來說，單子葉植物比雙子葉植物要求更高濃度的碳源，前者一般 5%以上，高者可達到 15%，后者一般 3%左右。生長調節(jié)物質的選擇，主要根據(jù)植物種類和植株再生方式來進行。C下培養(yǎng) 4. 生長調節(jié)物質的選擇 ? 在花藥和花粉培養(yǎng)的脫分化階段，生長調節(jié)物質的選擇是最重要的壞節(jié)。 ④磁拌法。 ②研磨過濾收集法?；ɡ俳?jīng)表面滅菌后，需在無菌條件下錄取花藥，接種在培養(yǎng)基上。 2. 花粉發(fā)育時期 3. 生理狀態(tài) （二）預處理 1. 低溫處理：將花蕾用濕紗布包裹后再用塑料袋封裝，放在冰箱中冷藏
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