【正文】 工商聯(lián)第一季度工作已經(jīng)完成，現(xiàn)將工作情況總結(jié)如下：　　一、以促進(jìn)非公經(jīng)濟(jì)人士思想工作為中心　　2016年，全市非公經(jīng)濟(jì)仍然處于產(chǎn)業(yè)投資乏力、房地產(chǎn)降溫的狀態(tài)中，給非公經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來巨大壓力。同時，將政策咨詢、培訓(xùn)信息、職業(yè)介紹、創(chuàng)業(yè)扶持等公共服務(wù)延伸到街道（鎮(zhèn)）、社區(qū)（村），形成城鄉(xiāng)一體、上下貫通、平臺到村、聯(lián)系到戶、服務(wù)到人的工作體系。 四是完善公共就業(yè)服務(wù)體系，推進(jìn)城鄉(xiāng)就業(yè)一體化。此外，我們還將根據(jù)用工企業(yè)需求，深化開展各類就業(yè)服務(wù)活動，著力提高服務(wù)用工企業(yè)的針對性和實(shí)效性，提高服務(wù)質(zhì)量和工作效率，真正做到想企業(yè)所想，急企業(yè)所急，破解企業(yè)“招工難”問題。以保民生、保穩(wěn)定、促就業(yè)為目標(biāo)，充分發(fā)揮基層人力資源和社會保障平臺作用，重點(diǎn)針對我縣失業(yè)人員、新成長勞動力、農(nóng)村轉(zhuǎn)移勞動力、返鄉(xiāng)農(nóng)民工等就業(yè)群體，幫助盡快得到就業(yè)援助。大力支持和鼓勵用工企業(yè)開展崗前培訓(xùn)，提升技能水平；組織由創(chuàng)業(yè)意愿的勞動者參加創(chuàng)業(yè)培訓(xùn)，提高創(chuàng)業(yè)成功率。積極優(yōu)化返鄉(xiāng)創(chuàng)業(yè)的體制機(jī)制環(huán)境，打造良好的創(chuàng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)。 ，擴(kuò)充市場主體和就業(yè)范圍，激發(fā)市場活力健全政府性債務(wù)管控機(jī)制，嚴(yán)格限定債務(wù)資金使用，切實(shí)防范和化解債務(wù)風(fēng)險(xiǎn)。 四是防范和化解債務(wù)風(fēng)險(xiǎn)。依法加強(qiáng)非稅收入征管，進(jìn)一步嚴(yán)格政府非稅收入的征收，規(guī)范行政事業(yè)性收費(fèi)和罰沒收入等非稅收入的征管，提高非稅收入統(tǒng)籌力度，確保財(cái)政收入穩(wěn)步增長。繼續(xù)完善清繳欠稅管理制度，落實(shí)欠稅管理責(zé)任，不斷加大清欠力度。 一是積極組織稅收收入。 四是加快高端制造業(yè)發(fā)展。做好全縣園區(qū)外化工企業(yè)排查，按照工信部要求，統(tǒng)籌部署，加快園區(qū)建設(shè)規(guī)模。 二是對于僵尸企業(yè)進(jìn)行分類處置、因企施策。通過摸底排查，及時將符合要求的企業(yè)納入規(guī)模以上監(jiān)測體系，準(zhǔn)確掌握我縣規(guī)模以上工業(yè)的實(shí)際情況。抓好一批重點(diǎn)骨干企業(yè)，確保工業(yè)穩(wěn)定增長。 ，及時幫助企業(yè)解決各種問題，確保提質(zhì)增效進(jìn)一步拓展民間投資領(lǐng)域和范圍，鼓勵引導(dǎo)民間投資以PPP模式投入基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)。優(yōu)化土地資源配置，科學(xué)有效供地，積極向上爭取土地指標(biāo)，加快完成房屋征收工作，保障項(xiàng)目用地需求，并堅(jiān)決清理閑置土地，盤活存量用地。認(rèn)真分析項(xiàng)目未入庫原因，推進(jìn)入庫要件的辦理。 三是全力做好未批先建項(xiàng)目的入統(tǒng)計(jì)庫工作。研究建立用電量、稅收、中長期貸款、實(shí)際利用外資等關(guān)聯(lián)指標(biāo)體系，科學(xué)分析全縣投資質(zhì)量結(jié)構(gòu)，切實(shí)擴(kuò)大有效投資，增強(qiáng)經(jīng)濟(jì)發(fā)展動力。 二是強(qiáng)化投資預(yù)測預(yù)警及分析。通過以上辦法，力爭為我縣儲備一批大項(xiàng)目、好項(xiàng)目、各產(chǎn)業(yè)龍頭項(xiàng)目。繼續(xù)實(shí)行“飛地”經(jīng)濟(jì)，鼓勵各鎮(zhèn)工業(yè)向臨港經(jīng)濟(jì)區(qū)集聚。延續(xù)以往招商一些好的作法，加大以商招商、合作招商和大型活動招商等力度，爭取更有針對性地走出去，更有目的性地請進(jìn)來，保證招商實(shí)效，特別是利用XX產(chǎn)業(yè)疏解的有利時機(jī)，把前期摸排的成果盡快地轉(zhuǎn)化為招商成果，提前做好項(xiàng)目鋪墊，保證招得來、落得下。 一是加大招商引資力度。 三、下步工作安排 三是從我縣當(dāng)前的可用財(cái)力及資金情況看，償還債務(wù)壓力較大。 二是按照省財(cái)政廳進(jìn)一步做實(shí)財(cái)政收入的要求，嚴(yán)格收入管理，依法征收，提高財(cái)政收入質(zhì)量，成為我縣收入總量大幅下滑的重要影響因素。今年以來宏觀經(jīng)濟(jì)增長繼續(xù)放緩，我縣經(jīng)濟(jì)發(fā)展進(jìn)入新常態(tài)，企業(yè)整體經(jīng)濟(jì)效益下滑，特別是房地產(chǎn)和石油、化工行業(yè)生產(chǎn)經(jīng)營效益大幅下降，影響了財(cái)政收入的增長。 全縣四個產(chǎn)業(yè)集群一季度產(chǎn)值同比呈現(xiàn)兩增兩減，裝備制造產(chǎn)業(yè)集群現(xiàn)有規(guī)上企業(yè)xx戶，預(yù)計(jì)一季度實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值xx億元，同比增長x%；輕工建材產(chǎn)業(yè)集群現(xiàn)有規(guī)上企業(yè)xx戶，預(yù)計(jì)一季度實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值xx億元，同比增長x%；石化產(chǎn)業(yè)集群現(xiàn)有規(guī)上企業(yè)xx戶，預(yù)計(jì)一季度實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值xx億元，同比下降x%；農(nóng)副產(chǎn)品加工產(chǎn)業(yè)集群現(xiàn)有規(guī)上企業(yè)xx戶，預(yù)計(jì)一季度實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值xx億元，同比下降x%。另一方面，我縣的新材料、新能源等戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)處于起步階段，產(chǎn)業(yè)規(guī)模小、層次低、發(fā)展不足，短期內(nèi)無法形成增量。 二是工業(yè)經(jīng)濟(jì)增長后勁不足。同時，融資難依然是制約企業(yè)發(fā)展的重要因素。資金緊張xx戶，企業(yè)應(yīng)收賬款額度大，回款慢影響正常生產(chǎn)。因市場需求不足，工業(yè)產(chǎn)品價(jià)格持續(xù)走低，銷售困難，加之原材料、用工、運(yùn)輸?shù)瘸杀境掷m(xù)上升，企業(yè)利潤空間被擠壓，生存困難。 xx個未入庫項(xiàng)目計(jì)劃總投資xx億元，已完成實(shí)際投資x億元。由于施工許可、土地、環(huán)評等相關(guān)手續(xù)辦理滯后，致使項(xiàng)目未能及時入庫，造成統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)與實(shí)際投資額不同步。 四是要素保障制約嚴(yán)重。從三次產(chǎn)業(yè)看，第一產(chǎn)業(yè)未能形成投資；第二產(chǎn)業(yè)投資預(yù)計(jì)實(shí)現(xiàn)x億元，同比增長x %，占投資總額的xx%；第三產(chǎn)業(yè)投資預(yù)計(jì)實(shí)現(xiàn)xx億元，同比增長xx%，占投資總額的xx%。一季度共實(shí)施xx項(xiàng)億元以上重點(diǎn)產(chǎn)業(yè)項(xiàng)目，計(jì)劃總投資xxx億元，實(shí)際完成投資xx億元，同比增長x%，占固定資產(chǎn)投資的xx%。新開工項(xiàng)目全部為5億元以下的項(xiàng)目。 二是新開工項(xiàng)目體量偏小。具有牽動力強(qiáng)的工業(yè)產(chǎn)業(yè)集群仍沒有形成，工業(yè)經(jīng)濟(jì)整體運(yùn)行質(zhì)量不高，對我縣財(cái)政的支撐作用不強(qiáng)。無論是工業(yè)項(xiàng)目，還是服務(wù)業(yè)項(xiàng)目具有支撐性、稅源性的大項(xiàng)目太少，特別是具有輻射和拉動作用的核心項(xiàng)目仍沒有真正形成。 ——竣工億元以上項(xiàng)目，全年任務(wù)xx個；一季度完成xx個，完成年計(jì)劃的 xx%。 ——新開工億元以上項(xiàng)目，全年任務(wù)xx個；一季度完成 xx 個，完成年計(jì)劃的xx%。其中，工業(yè)x個，服務(wù)業(yè)x個。 項(xiàng)目建設(shè)完成情況： ——融資總量，全年任務(wù)xx億元；一季度預(yù)計(jì)完成x億元，完成年計(jì)劃的xx%； ——實(shí)際利用外資，全年任務(wù)x億美元；一季度預(yù)計(jì)完成xx億美元，完成年計(jì)劃的x%； ——規(guī)模以上工業(yè)增加值，全年任務(wù)xx億元，增長 x%；一季度預(yù)計(jì)完成xx億元，增長x%，完成年計(jì)劃的xx%；其中：財(cái)政口徑稅收收入，全年任務(wù)xx億元，增長xx%；一季度完成x億元，增長xx%，完成年計(jì)劃的xx%； ——固定資產(chǎn)投資，全年任務(wù)xxx億元，增長x%；一季度預(yù)計(jì)完成xx億元，增長xx%，完成年計(jì)劃的xx%； 一、主要經(jīng)濟(jì)指標(biāo)預(yù)計(jì)完成情況 年初以來，全縣上下緊緊圍繞“穩(wěn)中求進(jìn)、提質(zhì)增效”的總基調(diào)，按照中央和省、市的“四個著力”全鏈條部署，以供給側(cè)結(jié)構(gòu)改革為突破口，統(tǒng)籌做好穩(wěn)增長、調(diào)結(jié)構(gòu)、惠民生、防風(fēng)險(xiǎn)各項(xiàng)工作，主要經(jīng)濟(jì)指標(biāo)處于合理區(qū)間，工業(yè)運(yùn)行總體平穩(wěn)，消費(fèi)市場穩(wěn)定增長，產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)持續(xù)優(yōu)化，質(zhì)量效益不斷提升，經(jīng)濟(jì)發(fā)展實(shí)現(xiàn)平穩(wěn)開局。下文為附加公文范文，如不需要，下載后可以編輯刪除，謝謝！ 全縣2016年一季度經(jīng)濟(jì)形勢分析報(bào)告基因槍轉(zhuǎn)化的基本步驟如下：① 受體細(xì)胞或組織的準(zhǔn)備和預(yù)處理；② DNA微彈的制備；③ 受體材料的轟擊；④ 轟擊后外植體的培養(yǎng)和篩選。6. 講述農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因的主要步驟？合適外植體的選擇及再生系統(tǒng)的建立抗生素篩選壓的確定及農(nóng)桿菌菌株的選擇葉盤(或其他外植體)預(yù)培養(yǎng)(1～5天，非必須) 農(nóng)桿菌侵染(數(shù)秒、分鐘) 共培養(yǎng)(2—3 天) 推遲篩選或篩選(培養(yǎng)基中加入抑菌抗生素和選擇抗生素) 抗性芽的獲得選擇抗生素(如Km)中生根轉(zhuǎn)基因植株的獲得分子生物學(xué)檢測？基因槍(particle gun)介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法又稱微彈轟擊法(microprojectile bombardment, particlebombardment, biolistic)，是指利用火藥爆炸、高壓氣體和高壓放電作為驅(qū)動力(這一加速設(shè)備稱為基因槍)，將載有目的基因的金屬顆粒加速，高速射入植物組織和細(xì)胞中，然后通過細(xì)胞和組織培養(yǎng)技術(shù)，再生出新的植株。自1983年首例轉(zhuǎn)基因植株誕生，天然植物基因工程開始在人工控制下定向改良植物的遺傳性狀。只有在稀有的情況下，外源基因的兩個拷貝呈現(xiàn)頭對頭或尾對尾的連結(jié)方式，在這種情況下常發(fā)生末端缺失。5顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因動物的主要過程是什么？答案：顯微注射法建立轉(zhuǎn)基因動物的過程至少涉及以下四個主要步驟：① 構(gòu)建外源基因表達(dá)載體并生產(chǎn)用于注射的DNA 溶液；②準(zhǔn)備供注射用的胚胎并制定顯現(xiàn)原核的技術(shù)方案；③實(shí)施顯微注射并將注射后的胚胎進(jìn)行相應(yīng)的技術(shù)處理，然后移植到受體母畜中；④對出生的幼畜進(jìn)行基因整合和表達(dá)的檢測，把篩選出來的轉(zhuǎn)基因動物繁殖傳代培育，進(jìn)而建立轉(zhuǎn)基因動物的家系和群體。4什么是轉(zhuǎn)基因動物？答案：轉(zhuǎn)基因動物是指由于外源DNA導(dǎo)入（包括同一物種的DNA）動物的基因組而產(chǎn)生了可以遺傳的改變的動物。質(zhì)粒載體又分為整合型和附加體型載體兩類。 第九章 1動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中常用的表達(dá)載體有哪些？答案：根據(jù)載體進(jìn)入宿主細(xì)胞的方式，可將表達(dá)載體分為病毒載體與質(zhì)粒載體。（2）．用于分析蛋白質(zhì)相互作用。四、酵母表達(dá)系統(tǒng)的新的應(yīng)用方向近年來，酵母表達(dá)系統(tǒng)除了用來高效表達(dá)外源基因，獲得基因工程產(chǎn)品外，還開辟了一些新的應(yīng)用方向。釀酒酵母和其他一些酵母有多拷貝的內(nèi)源質(zhì)粒，以這類質(zhì)粒為基礎(chǔ)可以建成高拷貝質(zhì)粒表達(dá)載體。3 提高外源基因在酵母中的表達(dá)水平，考慮從哪些方面入手？答：為提高外源基因在酵母中的表達(dá)水平，可以考慮從以下方面入手：一、轉(zhuǎn)錄水平控制外源基因在酵母中的表達(dá)和基因的轉(zhuǎn)錄水平有密切的關(guān)系，篩選高效的啟動子就顯得十分重要，強(qiáng)啟動子還可以表達(dá)多種基因。酵母部分包括酵母轉(zhuǎn)化子的篩選組分，主要是與宿主互補(bǔ)的營養(yǎng)缺陷型基因序列(如：HIS4基因序列)或特定的抗生素抗性基因序列(如：抗Zeoein的基因序列)，以及編碼特定蛋白的基因啟動子和終止子序列。2 什么叫穿梭載體？指出酵母穿梭表達(dá)載體pYES2每個元件的功能。⑤有較強(qiáng)的蛋白質(zhì)分泌能力。③外源DNA容易導(dǎo)入宿主細(xì)胞，轉(zhuǎn)化效率高。第八章1 對作為表達(dá)目標(biāo)蛋白宿主的酵母細(xì)胞有什么基本要求？答：對作為表達(dá)目標(biāo)蛋白宿主的酵母細(xì)胞的基本要求是①安全無毒，沒有致病性。該電泳純的樣品可用來進(jìn)行氨基酸序列分析、免疫學(xué)分析和醫(yī)學(xué)研究等。⑦ 電泳：蛋白質(zhì)電泳通常采用聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）。⑤ 柱層析：根據(jù)蛋白質(zhì)的不同用途，需要對表達(dá)的特異性蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化。④ 離心分離：高速離心的離心力一般在10000g的范圍以內(nèi)，主要用來去除未破碎的細(xì)胞和細(xì)胞壁碎片等。② 細(xì)胞分離：通過原核細(xì)胞培養(yǎng)獲得的培養(yǎng)液，無論目標(biāo)蛋白位于細(xì)胞內(nèi)還是被分泌到細(xì)胞外的培養(yǎng)基中，首先都應(yīng)該將細(xì)胞與培養(yǎng)液進(jìn)行分離，一般通過離心沉降或者過濾的方式進(jìn)行分離。4. 分離純化基因表達(dá)產(chǎn)物的過程一般包括哪些步驟？各有哪些細(xì)節(jié)需要注意？ 一般都包括對發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)處理、回收菌體、細(xì)胞破碎、離心分離、樣品的濃縮與預(yù)處理、柱層析和電泳等步驟。外源蛋白以融合蛋白的方式表達(dá)時易于分離分離純化，可根據(jù)受體菌蛋白的結(jié)構(gòu)和功能特點(diǎn)，利用受體菌蛋白的特異性抗體、配體或底物親和層析等技術(shù)分離純化融合蛋白，然后通過蛋白酶水解或化學(xué)法特異性裂解受體菌蛋白與外源蛋白之間的肽鍵，獲得純化的外源蛋白產(chǎn)物。② 分泌型表達(dá)： 優(yōu)點(diǎn)：簡化了發(fā)酵后處理的純化工藝；減少了外源蛋白在細(xì)胞內(nèi)被蛋白酶降解的幾率；通過對分泌表達(dá)的設(shè)計(jì)有利于形成正確的空間構(gòu)象，獲得有較好生物學(xué)活性或免疫原性的蛋白質(zhì)。2. 外源基因在原核生物中表達(dá)時，蛋白質(zhì)的存在形式有哪些？各有什么優(yōu)缺點(diǎn)？① 包涵體表達(dá)：優(yōu)點(diǎn)：包涵體的形成有利于防止宿主蛋白酶對表達(dá)蛋白的降解。第二類是不依賴于PCR的定點(diǎn)誘變方法，包括盒式誘變、寡核苷酸介導(dǎo)的誘變和Kunkel法第七章1. 什么是RBS？RBS在基因表達(dá)中有何作用？ RBS，即核糖體結(jié)合位點(diǎn)，是指緊靠啟動子下游的，從轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)開始延伸幾十個堿基長度的一段序列，翻譯起始密碼子AUG通常位于它的中心位置，是核糖體RNA識別與結(jié)合的位點(diǎn)。二、菌落原位雜交法1對DNA進(jìn)行定點(diǎn)突變的方法有哪些？DNA定點(diǎn)突變的方法分為兩大類。1轉(zhuǎn)化后對重組子進(jìn)行篩選的方法有哪些？重組子的篩選方法多種多樣，是由載體的類型、插入DNA片段大小和性質(zhì)，以及受體細(xì)胞的遺傳特性等的不同決定的。人工合成長片段基因的方法有哪些？長片段基因的合成，通常的策略是將需要合成的基因分成若干個相互重疊的片段，先利用化學(xué)合成法分別合成這些小片段，然后讓這些片段退火配對，最后利用連接酶和聚合酶將這些片段連接成完整的基因序列。什么是cDNA文庫？它的基本構(gòu)建流程是怎樣的？以mRNA為模板，在體外經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當(dāng)載體連接后轉(zhuǎn)化受體菌并繁殖擴(kuò)增，這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫。 （5）盒式PCR，盒式PCR可特異性地?cái)U(kuò)增cDNA或基因組DNA上的未知區(qū)域。（3）錨定PCR，是一種根據(jù)已知目的基因的一小段序列信息來快速擴(kuò)增已知序列上游或下游片段的技術(shù)。（8）連接的溫度用于擴(kuò)增基因的PCR方法有哪些？各有什么特點(diǎn)？（1）RTPCR法，是一種從細(xì)胞mRNA中高效擴(kuò)增cDNA序列的方法，它將反轉(zhuǎn)錄與PCR擴(kuò)增技術(shù)相結(jié)合。（6）插入DNA片段與載體的比例。（4）選用的限制性核酸內(nèi)切酶對基因組DNA的切割頻率及酶切反應(yīng)條件。（2）高分子量的染色體DNA的獲得 。構(gòu)建流程一般來說，構(gòu)建基因組文庫的基本步驟有五步：①高分子量DNA的制備；②外源DNA片段與載體分子的重組；③重組載體轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞；④陽性克隆的挑選；⑤基因組文庫的評價(jià)和鑒定。目前幾種常見的基因克隆手段，如基因組DNA文庫、cDNA 文庫、PCR擴(kuò)增法、人工化學(xué)合成法、差異克隆技術(shù)等。雙元載體不僅構(gòu)建方便，而且其TDNA整合進(jìn)入植物細(xì)胞不需要帶進(jìn)許多冗余DNA序列，轉(zhuǎn)化效率高于一元載體。雙元表達(dá)載體由2個分別含有TDNA和Vir區(qū)的相容性突變Ti質(zhì)粒構(gòu)成，即微型Ti質(zhì)粒（minTi plasmid）和輔助Ti質(zhì)粒（helper Ti plasmid）。（3）核糖體結(jié)合位點(diǎn)：核糖體（rRNA）是蛋白質(zhì)合成的場所，mRNA有效地翻譯依賴于mRNA的穩(wěn)定性及其與核糖體結(jié)合的能力。（2）終止子：在一個基因的3′端或是一個操縱子的3′端往往還有一特定的核苷酸序列，它有終止轉(zhuǎn)錄的功能，這一DNA序列稱為轉(zhuǎn)錄終止子（terminator）。（1）啟動