【正文】 4 總結(jié) 全文綜述本研究中首先利用層層自組裝技術(shù)在鈦材表面構(gòu)建含鋅離子涂層，使鋅離子作為無(wú)機(jī)抗菌劑均勻分布在鈦材料的表面。通過對(duì)比圖3中(c)和(d)可以看出當(dāng)鋅離子濃度達(dá)到40 mg/mL時(shí)，抗菌能力接近飽和，此時(shí)再想通過增加鋅離子濃度增加材料的抗菌性已經(jīng)不可能了。抑菌圈實(shí)驗(yàn)中可以看到明顯的抑菌圈出現(xiàn)，而在抑菌率實(shí)驗(yàn)中通過數(shù)據(jù)分析，%，對(duì)比未經(jīng)處理鈦材的對(duì)照組，抑菌效果相當(dāng)明顯。圖3 耐受性實(shí)驗(yàn)（CCK8實(shí)驗(yàn)）(a)是未處理的鈦材；(b)、(c)和(d)分別是以20和40 mg/mL的醋酸鋅溶液進(jìn)行層層組裝處理后鈦材。對(duì)比(c)和(d)可以看出當(dāng)鋅離子濃度達(dá)到40 mg/mL時(shí)，抗菌能力接近飽和，此時(shí)再想通過增加鋅離子濃度增加材料的抗菌性已經(jīng)不可能了?？梢缘弥?jīng)過改性的鈦材表面金黃色葡萄球菌的耐受性是降低了的。本次實(shí)驗(yàn)中我們將利用CCK8法對(duì)改性的鈦材進(jìn)行耐受性測(cè)試，進(jìn)而對(duì)改性后的鈦材的表征得到更全面的了解。WST8在電子載體的作用下能被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色的甲臜物，生成的甲臘物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比，通過酶標(biāo)儀測(cè)量細(xì)胞液的吸光度值，便可檢測(cè)出待測(cè)細(xì)胞樣品的活性。表1 為40 mg/mL的醋酸鋅溶液進(jìn)行層層組裝處理后鈦材的抑菌率樣品Ti （菌落數(shù)）TiZn2＋（菌落數(shù)）抑菌率 （%）145125012387944233912378CCK8（全稱為Cell Counting Kit 8）是一種綜合能力很好的細(xì)胞活性檢測(cè)試劑，而利用CCK8試劑檢測(cè)的方法就是CCK8實(shí)驗(yàn)了。也說明了鋅離子作為滅菌劑，其對(duì)細(xì)菌有很強(qiáng)的滅殺抑制效果。通過對(duì)平板上菌落的計(jì)數(shù)，我們得到了表1的數(shù)據(jù)，通過表格中數(shù)據(jù)可以得知，未處理的鈦材（對(duì)照組）的平均菌落數(shù)為4101，而我們經(jīng)過層層組裝處理的鈦材（實(shí)驗(yàn)組）的平均菌落數(shù)為440，%。通過上面抑菌圈的實(shí)驗(yàn)，我們可以得知經(jīng)過層層組裝處理后鈦材的抗菌能力大大的提高了。 抑菌圈實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示，圖2中（a）為未處理的鈦材，（b）為以40 mg/mL的醋酸鋅溶液進(jìn)行層層組裝處理后鈦材，從圖中可以明顯看出，經(jīng)過改性的鈦材出現(xiàn)了明顯的抑菌圈，證實(shí)了以40 mg/mL的醋酸鋅溶液進(jìn)行層層組裝處理后鈦材在抗菌能力上得到了顯著的增強(qiáng)。 結(jié)果與討論圖1 掃描電鏡圖 (a)是未處理的鈦材；(b)是以40 mg/mL的醋酸鋅溶液進(jìn)行層層組裝處理后鈦材。12小時(shí)后，每孔再加入200ul的無(wú)菌培養(yǎng)基和10ul的cck8溶液，并在37℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1小時(shí)。抑菌率的公式如下：C：代表抑菌率A：為對(duì)照組的菌落數(shù)B：為實(shí)驗(yàn)組的菌落數(shù)將經(jīng)過不同修飾的鈦片放入24孔板中，每孔加入1ml的含有培養(yǎng)液的細(xì)菌密度為1106cells/ml的菌液。經(jīng)過過夜培養(yǎng)后，因?yàn)榧?xì)菌會(huì)在樣品上粘附貼壁，所以在這里我們利用了超聲震蕩儀對(duì)孔板進(jìn)行了震蕩，這樣可以讓細(xì)菌從鈦片上脫落下來，而且能過是菌液混合均勻,超聲時(shí)間為20s，否則細(xì)菌容易被破壞。首先，我們同樣要對(duì)樣品進(jìn)行紫外滅菌處理，正反兩面滅菌120分鐘。