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第一章結(jié)締組織染色-文庫吧資料

2025-06-22 18:03本頁面
  

【正文】 用鍍銀染色清晰地顯示。的微管集合成的束。電鏡下可見它們是粗約120197。二、神經(jīng)元和神經(jīng)纖維的染色在常規(guī)HE染色中雖然可觀察到神經(jīng)元及神經(jīng)纖維的全貌,但是細(xì)微的結(jié)構(gòu)和某些特殊成分還需用特殊的染色方法來顯示。軸突外周的構(gòu)造,有些較為復(fù)雜,外層被鞘膜包裹,稱為有髓纖維;有些比較簡單,無鞘膜被覆。神經(jīng)纖維由從神經(jīng)元發(fā)出的軸突和較長的樹突以及包裹在外的構(gòu)造一起組成,在腦與脊髓內(nèi)走行于白質(zhì)中,并為外周神經(jīng)系統(tǒng)的一部分。神經(jīng)元的胞突分為樹突與軸突兩種。一般細(xì)胞核位于胞體的中央,為泡狀,核仁極明顯;胞質(zhì)結(jié)構(gòu)較復(fù)雜,含有神經(jīng)原纖維、尼氏小體、高爾基體、線粒體、內(nèi)含物、色素等,其中神經(jīng)原纖維和尼氏小體是神經(jīng)元特有的結(jié)構(gòu)。神經(jīng)元的細(xì)胞體具有和其他細(xì)胞一樣的結(jié)構(gòu),即表面有細(xì)胞膜、中有細(xì)胞質(zhì)、內(nèi)有細(xì)胞核。神經(jīng)元的胞體聚集成核團(tuán),而神經(jīng)元的軸突組成纖維束;在周圍神經(jīng)中,神經(jīng)元的胞體組成神經(jīng)節(jié),軸突組成神經(jīng)束。神經(jīng)細(xì)胞是神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能單位,所以又稱神經(jīng)元。本法屬于退行性染色,關(guān)鍵是在苦味酸丙酮液中分化,復(fù)紅液對缺氧心肌染色力較強(qiáng),而分化時(shí)也相對的抵抗力較大,其脫色慢些;但正常心肌對分化液的抵抗力差,即脫色快些,因此需要將切片浸入分化液中而不停的快速上下移動(dòng)多次后,即用丙酮進(jìn)行脫水,在鏡下觀察脫色情況,如果分化不足可再進(jìn)行分色。(8)純丙酮脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固。(6)純丙酮洗5s。(4)堿性復(fù)紅染色液3min。(2)入明礬蘇木素液1030s。(1)Harris蘇木素液(2)堿性復(fù)紅染色液 ,蒸餾水100ml。以便作為對照的鑒別診斷。 第二節(jié) 早期心肌病變組織染色早期心肌梗死是近年來被稱為早期心肌病變,從60年代開始,有許多作者都對心肌病變進(jìn)行方法學(xué)研究,其共同特點(diǎn)是選用酸(堿)性復(fù)紅對缺氧心肌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果證明了心肌病變的可靠性,這種缺氧心肌對酸性復(fù)紅的親和力稱嗜復(fù)紅性,對堿性復(fù)紅的親和力稱為親復(fù)紅性。(2)如果實(shí)驗(yàn)時(shí)急需用試劑,以加快促使成熟。 胞核、纖維、肌肉、神經(jīng)膠質(zhì)纖維、纖維素、橫紋肌等均呈藍(lán)色;膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、軟骨基質(zhì)及骨呈黃色或玫瑰紅色;粗彈力纖維有時(shí)被染色成微紫色;有缺血缺氧早期病變的心肌呈紫藍(lán)色或棕黃色。(6)直接用95%乙醇分化。(4)自來水洗,蒸餾水洗2次。(2)在高錳酸鉀液中氧化510min。(2)高錳酸鉀氧化液 %高錳酸鉀水溶液50ml,%硫酸水溶液50ml。將蘇木素置20ml蒸餾水中加熱溶解,再將磷鎢酸溶于80ml蒸餾水中。常見腫瘤有橫紋肌瘤、橫紋肌肉瘤和含有成肌細(xì)胞的混合性中胚葉腫瘤等,而共同的病理變化特點(diǎn)是腫瘤細(xì)胞可出現(xiàn)橫紋肌纖維,可用磷鎢酸蘇木素(PTAH)來顯示肌纖維成分。第二章 肌肉組織肌組織主要由肌細(xì)胞構(gòu)成,根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能,又分為骨骼肌、心肌和平滑肌,而骨骼肌和心肌的肌纖維含有橫紋,所以又稱為橫紋肌。(9)二甲苯透明,中性樹膠封固。 (7)直接用無水乙醇沖洗多余染色液2次。 (5)用蒸餾水洗2min。 (3)~2h。 [染色方法] (1)組織切片脫蠟至水。 (2)麗春紅S染色液 %麗春紅(ponceau39。殘?jiān)噬钏{(lán)色細(xì)顆粒狀粉末,再將其溶于400m1的70%乙醇液中。然后用另一容器取30%三氯化鐵水溶液25ml,另行加熱煮沸后慢慢倒入上述混合液中,繼續(xù)煮沸3min,不斷攪拌溶液呈膠體狀。 [試劑配制] (1)維多利亞藍(lán)染色液 維多利亞藍(lán)(Victoria blue)2g,間苯二酚4g,蒸餾水200m1。 [結(jié)果] 彈力纖維呈藍(lán)色,背景黃色。 (7)快速用無水乙醇沖洗2次。 (5)浸入蒸餾水中洗2次。 (3)將切片浸入Victoria blue染色中2h。 [染色方法] (1)組織切片脫蠟至水。 [試劑配制] (l)Martius yellow染色液 ,95%乙醇98m1。 [結(jié)果] 彈力纖維呈藍(lán)色,膠原纖維及背景呈紅色,紅細(xì)胞呈紫紅色。 (10)蒸餾水略洗。 (8)蒸餾水速洗2次。 (6)入50%乙醇內(nèi)1~2min。 (4)用4%鐵明礬溶液處理2~3min。 (2)在70%乙醇中l(wèi)min,入堿性藍(lán)B乙醇液5~10min。 (2)氫氧化鉀乙醇液 ,70%乙醇100ml。 堿性藍(lán)B染色法 [固定] 10%甲醛液、乙醇液或Zenker液均可。 (9)二甲苯透明,中性樹膠封固。 (7)%醋酸中洗。 (5)在80%乙醇中分色。 (3)在1%,鹽酸乙醇中分色。 [染色方法] (1)按常規(guī)切片脫蠟至水。 C溶液,即Orth鋰煙脂紅染色液。向含有3%HCl的70%乙醇加入足量的上述貯存液,使溶液呈棕色。 [固定] 任何固定劑。 [結(jié)果] 彈力纖維呈深紫色或紅紫色,核藍(lán)色。切片要經(jīng)常搖動(dòng),在鏡檢下掌握染色結(jié)果。 (6)蒸餾水洗。(4)蒸餾水中洗2次。(2)在A液中染30min。用時(shí)將此原液l ml加蒸餾水至9 ml即可。 [試劑配制] (1)A液 %濃鹽酸的70%乙醇中。 [結(jié)果] 彈力纖維呈深紫色,背景呈藍(lán)綠色或其他復(fù)染的顏色。 (5)用焰紅B液染色10~l5min。 (3)70%乙醇液漂洗2次,約3~5min。 [染色方法] (1)石蠟切片,脫蠟至水。將復(fù)紅和阿爾辛藍(lán)依次溶于乙醇內(nèi),然后加入鹽酸和三聚乙醛,充分混合搖勻,放置室溫中24h,使其自然成熟后即可使用。 Gomori改良醛復(fù)紅阿爾辛籃染色法 [固定] 各種固定液,但以乙醇或Bouin固定液固定效果最佳。 (6)95%乙醇、無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。 (4)70%乙醇液分化至無多余染液脫下為止。 (2)在70%乙醇中2min。放置冰箱中保存?zhèn)溆谩? [試劑配制] Uana地衣紅染色液:地衣紅lg , 70%乙醇99ml,濃鹽酸1m1。 [結(jié)果) 細(xì)胞核深藍(lán)色,彈力纖維深棕到黑色,膠原纖維粉紅到淺藍(lán)色,黑色素呈綠色到棕色,嗜伊紅顆粒呈紅色至紫色,細(xì)胞核呈深藍(lán)色??稍阽R下控制。 (7)姬姆薩稀釋液浸染2h~過夜。需鏡下控制。 (4)95%乙醇分化,洗去多余染液。 (2)經(jīng)70%乙醇漂洗。溶解后即可使用。 (2)姬姆薩液 取姬姆薩原液5滴,加蒸餾水100ml。 [試劑配制] (1)地衣紅染色液 地衣紅1g,70%乙醇100m1。 [說明]還可用淡綠橘黃G液、Masson三色液、Van Gieson液等復(fù)染,但不宜過深。 (12)95%乙醇無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。 (10) 橘黃G液滴染約1s。 (8)70%乙醇浸洗2次,每次約30s,至切片不再脫色為止。 (6)70%乙醇稍洗。 (4)5%硫代硫酸鈉液處理5min。 (2)用Lugol碘液處理5min。 (2)橘黃G染色液 橘黃G2g,蒸餾水100m1,磷鎢酸5g。將堿性復(fù)紅溶于70%乙醇,然后加入濃鹽酸和三聚乙醛,輕輕搖動(dòng)使混合均勻,于室溫下靜置1~2日,待變?yōu)樽仙礊槌墒?。[固定] 各種固定液,但以甲醛生理鹽水液固定的染色效果最佳。另外,對肥大細(xì)胞顆粒、脂褐素、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、胃主細(xì)胞、胰島的223。乙醛有較高的活性,釋出后與堿性品紅染料外露的氨基起反應(yīng)而產(chǎn)生偶氮甲堿,這時(shí)顏色轉(zhuǎn)變?yōu)樯钭仙?,是謂成熟,稱為醛復(fù)紅染液。 Gomori醛復(fù)紅染色法 醛復(fù)紅染色液是Gomori在Schiff試劑的使用和實(shí)驗(yàn)期間偶然發(fā)現(xiàn)的。 (11)95財(cái)乙醇及無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。 (9)充分水洗5~l0min。 (7)直接用Weigert稀釋液浸染過夜。 (5)充分水洗2min。 (3)自來水洗2~3min。 [染色方法] (1)石蠟切片,脫蠟至水。 (2)Weigert稀釋液 Weigert原液l0ml,1%鹽酸乙醇溶液90ml。 [試劑配制] (1)酸性高錳酸鉀水溶液 %高錳鉀水溶液50m1,3%。特點(diǎn)是將Weigert染液用1%鹽酸乙醇溶液配制成稀釋溶液,進(jìn)行過夜染色,可顯示出較細(xì)的彈力纖維。 [結(jié)果] 彈力纖維深藍(lán)黑色,膠原纖維紅色,背景黃色。(7)95%乙醇急速分化。 (5)自來水沖洗2min。 (4)用95%乙醇液洗去多余染液。 (2)在95%乙醇液中浸2min。最后加濃鹽酸2ml,混合后即可使用。取出后加入95%乙醇100ml,在水鍋內(nèi)加熱,并不斷攪拌至沉淀物完全溶解,取出濾紙,冷卻后過濾。冷卻后過濾,傾去濾液。 取一個(gè)300ml燒杯,放入堿性品紅、間苯二酚和蒸餾水,用玻璃棒攪拌,加熱煮沸。 [固定] 10%甲醛液及其他固定液。間苯二酚復(fù)紅液實(shí)際上是由堿性品紅的鐵間苯二酚色淀(Lake)形成的一種復(fù)合物,這種復(fù)合物與彈力纖維結(jié)合,并使彈力纖維著色。非極性吸著,是染料不具有強(qiáng)電荷時(shí)和組織成分間的結(jié)合。 [結(jié)果]彈力纖維黑色或黑藍(lán)色,胞核黑色,校原纖維呈紅色。 (7)95%乙醇急速分化。 (5)用95%乙醇去碘2~Smin,使黑色纖維更為清晰。如果分化過度,可再返回第2步重染鐵碘蘇木素液。自來水洗。[染色方法] (1)石蠟切片,脫蠟至水。 [固定] 105甲醛溶液或其他固定液。通過“染料的分散度和組織的結(jié)構(gòu)密度”以達(dá)到分辨不同組織的目的。如彈力纖維染色法證明在導(dǎo)管癌上,伴隨出現(xiàn)彈力纖維增生,可證明是早期浸潤癌。在HE染色中容易忽略,但用彈力纖維染色,能清晰見到瘤體內(nèi)豐富的彈力纖維球。散亂、斷裂、破壞和增生,形成碎片或顆粒。(6)顯示老年人動(dòng)脈變性:動(dòng)脈的彈力板變性、增厚、斷裂、崩解等現(xiàn)象。 (4)顯示高血壓時(shí)小動(dòng)脈彈力纖維顯著增生以及形成多層的病變特點(diǎn)。 (2)顯示動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)硬化斑塊底部的內(nèi)彈力板崩解,斷裂乃至消失情況。這兩種病變時(shí)心內(nèi)膜中的彈力纖維和膠原纖維會(huì)出現(xiàn)異常增多,在HE染色中兩者的病理變化甚為相似。(二)顯示與判定心血管疾病 彈力纖維是心臟和血管的主要成公之一。 二、彈力纖維染色的應(yīng)用 (一)顯示皮膚組織中彈刀纖維的變化 在皮膚組織病變中,特別是真皮內(nèi)的彈力纖維, 時(shí)常發(fā)生改變,出現(xiàn)增生、卷曲、變性、崩解等,做彈力纖維形成聚集成堆的束狀、團(tuán)塊狀及不規(guī)則狀。近來學(xué)者研究認(rèn)為,彈力纖維系統(tǒng)是由彈力纖維、前彈力纖維和耐酸纖維等三種纖維構(gòu)成,這三種纖維的分布、走行和組織化學(xué)均不相同。彈力纖維由兩種成分組成,即集合束的彈力微纖維(由糖蛋白形成)和均質(zhì)狀的彈力蛋白。在沒有平滑肌細(xì)胞存在時(shí),可能由纖維母細(xì)胞形成。與膠原纖維不同處為其氨基酸組成中約95%屬于非極性疏水氨基酸,鎖鏈賴氨酸(Desmosine)和異鎖鏈賴氨素(lsodesmosine)是彈性蛋白所特有,它們起著共價(jià)交聯(lián)的作用。彈性蛋白提供彈力纖維的彈性,它是一種不溶性蛋白質(zhì),當(dāng)用弱堿處理纖維結(jié)締組織時(shí),其仍然存在。(4)染色結(jié)果網(wǎng)狀纖維呈黑色、細(xì)胞核呈紅色。15)水稍洗。13)蒸餾水沖洗,2min。11)蒸餾水沖洗,5min。9)蒸餾水沖洗,2min。7)95%酒精速洗,12s。5)蒸餾水沖洗,10s。3)蒸餾水沖洗,5min。(3)染色次序1)組織切片脫蠟至水。(1)凝固性壞死(2)肺結(jié)核干酪樣壞死。一、網(wǎng)狀纖維染色的應(yīng)用(1)顯示和區(qū)分癌和肉瘤(2)顯示和區(qū)分血管內(nèi)皮瘤與血管外皮瘤(3)用以鑒別淋巴細(xì)胞肉瘤與網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤(4)區(qū)分骨尤文氏肉瘤與骨網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤(5)顯示與鑒別骨異質(zhì)增生與骨化性纖維瘤(6)區(qū)分軟骨粘液纖維瘤與粘液肉瘤(7)鑒別腦膜瘤與星形細(xì)胞瘤(1)平滑肌肉瘤(2)纖維肉瘤(3)滑膜肉瘤(4)惡性神經(jīng)鞘瘤、發(fā)展及其惡性程度。若用銀氨溶液浸染能使纖維變成黑色,如又稱為嗜銀纖維。網(wǎng)狀纖維纖細(xì)而有分支,穿行于細(xì)胞體和突之間,共同構(gòu)成網(wǎng)狀支架。它由網(wǎng)狀細(xì)胞所產(chǎn)生。 [結(jié)果]膠原纖維呈鮮紅色,細(xì)胞核和血細(xì)胞呈綠色,肌肉呈黃色。 (6)直接用無水乙醇分化與脫水。 (5)用Ponceau39。 (3)95%乙醇中分化數(shù)秒鐘。 (2)70%乙醇稍洗后,入Victoria blue39。B(維多利亞藍(lán),B,上海試劑三廠) g, 70%乙醇100m1。 (2)Victoria blue39。s染色液 %Pohceau39。 8. 顯示膠原纖維、細(xì)胞和肌肉的新染法 [固定]中性甲醛液,石蠟切片。 (9)二甲苯透明,中性樹膠封固。 (7)蒸餾水中略洗。 (6)在未經(jīng)稀釋的B液中染2~3min。 (4)在5%磷鎢酸液中分色并媒染2~3min。 (2)在A液中染3min。 橘黃G,2g;蒸餾水100ml,冰醋酸8ml,煮沸,冷卻,過濾。加蒸餾水至1000ml)和30ml 。冷卻,過濾,再補(bǔ)足到原來的體積。酸性茜藍(lán)2B,;硫酸鋁5g;蒸餾水50m1。 [固定] Zenker液,Helly液、Bouin液或甲醛液
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