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a細(xì)胞工程第4節(jié)—植物花粉和花藥培養(yǎng)-文庫吧資料

2025-05-31 22:33本頁面
  

【正文】 長物質(zhì)處理提高 P花粉的數(shù)量 (二)供體植株生長條件和生理狀態(tài) ? 隨著細(xì)胞體積迅速增大,細(xì)胞核由中央位置推向一邊,即單核靠邊期。但物種間存在差異。 (三)花粉發(fā)育時(shí)期 適宜時(shí)期 :單核期 ,尤其是單核中、晚期(單核靠邊期 ) 蕓苔屬植物 Brassica napus不同基因型的小孢子產(chǎn)胚率比較 Topas 10,000200,000 120 Westar 100010,000 Delta 10010,000 Bounty 10100 基因型 胚狀體數(shù)量 /106小孢子 成苗率( %) 植株生長條件 光溫等因素均能影響花藥培養(yǎng)力。 如在水稻中,秈稻花粉培養(yǎng)力遠(yuǎn)低于糯稻。 四、影響雄核發(fā)育和花粉花藥培養(yǎng)的因素 ? (一)基因型 植物基因型是影響雄核發(fā)育的最重要的因素之一。另外地、無性系變異也可能是原因之一。 外因 預(yù)處理、培養(yǎng)基成分、激素水平與種類、培養(yǎng)條件和方法、愈傷組織轉(zhuǎn)分化時(shí)間等?;ㄋ帡l件培養(yǎng)基、子房條件培養(yǎng)等 。 具體方法 2. 看護(hù)培養(yǎng)圖解 ? 微室培養(yǎng) 利用小的蓋玻片和凹穴載玻片形成微室進(jìn)行花粉培養(yǎng)。 3)將分離的 花粉 接種到已經(jīng)充分吸收愈傷組織滲透液的濾紙上。 2)在無菌條件下,將一小塊( 1cm3)活躍生長的愈傷組織接種到培養(yǎng)基上,再在愈傷組織塊上放一片( 1cm178。 用一塊活躍生長的愈傷組織來看護(hù)單個(gè)細(xì)胞,并使 ? 其生長和增殖。 培養(yǎng)基制作方法:先鋪一層瓊脂固體培養(yǎng)基,凝固后,在表面加入少量液體培養(yǎng)基。 ? 液體培養(yǎng) 花粉懸浮在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),需震蕩,以利通氣。 1) 磁攪拌法 用磁力攪拌器攪拌培養(yǎng)液中的花藥,使花粉游離出來; 2) 超速旋切法 通過攪拌器中的高速旋轉(zhuǎn)刀具破碎花蕾、穗子、花藥,使小孢子游離出來(此法應(yīng)用最廣)。 二、花粉培養(yǎng) ?(一 )花粉的分離與純化 ? 自然散落法 (漂浮培養(yǎng)散落小孢子收集法 ) 將花藥接種在預(yù)處理液或液體培養(yǎng)基上,待花粉自動(dòng)散落后,收集培養(yǎng)。 ? 培養(yǎng) 固體或液體培養(yǎng)基均可。 四、花粉植株形態(tài)發(fā)生方式 胚狀體發(fā)育途徑 部分花藥通過胚狀體途徑形成小植株 煙草花藥培養(yǎng) 通過胚狀體途徑再生形成小植株 煙草花藥培養(yǎng) 胚狀體發(fā)育途徑 a) 球形胚 d) 魚雷形胚 蕓苔屬小孢子培養(yǎng) 愈傷組織發(fā)育途徑 部分花藥產(chǎn)生愈傷組織 接種在平板上的水稻花藥 水稻花藥培養(yǎng) 愈傷組織轉(zhuǎn)接種到再生培養(yǎng)基 愈傷組織分化形成再生植株 水稻花藥培養(yǎng) 第三節(jié) 花粉和花藥培養(yǎng)方法 ? 一、花藥培養(yǎng) ? 二、花粉培養(yǎng) ? 三、白化苗現(xiàn)象 ? 四、影響雄核發(fā)育和花粉花藥培養(yǎng)的因素 一、花藥培養(yǎng) ? 取材 鏡檢,根據(jù)花粉的發(fā)育時(shí)期,選取大小適宜的花蕾。 愈傷組織發(fā)育途徑 小孢子分裂數(shù)次形成愈傷 , 再分化形成花粉植株 。也稱小花粉( S花粉)或不染色花粉( NS花粉) 雄核發(fā)育與饑餓處理 饑餓處理改變了小孢子的配子體發(fā)育方向,啟動(dòng)雄核發(fā)育。 二、雄核發(fā)育途徑 A途徑 小孢子第一次有絲分裂為非均等分裂,形成營養(yǎng)細(xì)胞和生殖細(xì)胞 ( 1) AV途徑 由營養(yǎng)細(xì)胞重復(fù)分裂形成單倍體 ( 2) AG途徑 由生殖細(xì)胞重復(fù)分裂形成單倍體 ( 3) AVG途徑( E途徑) 由營養(yǎng)細(xì)胞和生殖細(xì)胞各自獨(dú)立分裂,共同形成單倍體 ( 4) C途徑 營養(yǎng)細(xì)胞和生殖細(xì)胞通過核融合,形成多倍體植株 B途徑 小孢子第一次有絲分裂為均等分裂,形成大小相近的兩個(gè)細(xì)胞。 遺傳分析 構(gòu)建連鎖圖譜
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