db33t539-2005飼料中萊克多巴胺的測定-文庫吧資料
2025-05-21 23:02本頁面
【正文】 11O3SNa?H2O），混勻。）：每根柱填料量為500mg，柱體積5mL?！?2％乙酸溶液：取5mL冰醋酸加水至250mL，混勻?！?50％乙腈/乙酸乙酯溶液：取250mL乙腈加乙酸乙酯至500mL，混勻?！?正己烷。 無水硫酸鈉?！?乙酸乙酯?！?甲醇。 10 試劑和溶液 除非另有說明，本法所用試劑均為分析純，水為去離子水，符合GB/T 6682二級水的規(guī)定。相對應(yīng)每一個樣品的濃度(ng/L)可以從校正曲線上讀出。8 結(jié)果計算以空白（濃度為0的標(biāo)準(zhǔn)溶液）吸光度值為100%計算，折算出各標(biāo)準(zhǔn)和樣品的相對吸光度值?！?加入100μL酶底物液到微孔中，充分混合并在室溫孵育510min。 加入150μL稀釋的酶標(biāo)記的第二抗體（）37℃孵育30分鐘后倒出孔中的液體，將微孔架倒置在洗水紙上拍打（每輪拍打3次）以保證完全除去孔中的液體，再加入工作洗液（）250μL，重復(fù)操作兩遍?！?加入100μL第一抗體溶液到每一個微孔中，在37℃孵育30分鐘后倒出孔中的液體，將微孔架倒置在洗水紙上拍打（每輪拍打3次）以保證完全除去孔中的液體，再加入工作洗液（）250μL，重復(fù)操作兩遍?！?測試程序 根據(jù)所測定樣品及標(biāo)準(zhǔn)數(shù)，計算出所需微孔條數(shù)，將微孔條插入微孔架，標(biāo)準(zhǔn)和樣品做兩個孔的平行重復(fù)，記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品的位置。 試樣處理取3g試樣于50mL離心管中，加入6mL提取液（），上下手搖數(shù)次，加入6mL碳酸鹽緩沖液（），再加入8mL乙酸乙酯（），振蕩30min；以4000rpm的轉(zhuǎn)速離心5min，氮吹至干?！?分析天平：?！?生化培養(yǎng)箱。 冰箱。 冷凍離心機(jī)。6 儀器與設(shè)備 微孔板酶標(biāo)儀(帶450nm濾光片)?！?甲醇?！?碳酸鹽緩沖液：（Na2CO3?10H2O），（NaHCO3），加水至1000mL，搖勻。 工作洗液：用水20倍稀釋廠商提供的濃縮洗液。5 試劑和溶液 除非另有說明，本法所用試劑均為分析純，水為去離子水，符合GB/T 6682二級水的規(guī)定。第一法 酶聯(lián)免疫法4 原理與方法 原理本測定方法是酶聯(lián)免疫法中的競爭性測定法，其主要原理是：吸附在孔內(nèi)的萊克多巴胺與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的萊克多巴胺競爭性地與萊克多巴胺抗體相結(jié)合，與標(biāo)準(zhǔn)品或樣品相結(jié)合的萊
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