細(xì)菌內(nèi)毒素檢查ppt課件-文庫吧資料
2025-05-09 03:44本頁面
【正文】 為現(xiàn)今我國市售鱟試劑的最高靈敏度）。 ?當(dāng)鱟試劑、供試品的配方、生產(chǎn)工藝改變或試驗(yàn)環(huán)境中發(fā)生了任何有可能影響試驗(yàn)結(jié)果的變化時(shí)，須進(jìn)行干擾試驗(yàn)。 干擾實(shí)驗(yàn) ?目的 確定供試品在多大的稀釋倍數(shù)或濃度下對內(nèi)毒素和鱟試劑的反應(yīng)不存在干擾作用，為能否使用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法提供依據(jù)。 反應(yīng)終點(diǎn)濃度是指系列遞減的內(nèi)毒素濃度中最后一個(gè)呈陽性結(jié)果的濃度。 陽性 陰性 鱟試劑靈敏度復(fù)核 ?計(jì)算 當(dāng)最大濃度 2λ管均為陽性，最低濃度 ，陰性對照為陰性時(shí)實(shí)驗(yàn)為有效，按下式計(jì)算反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值即為鱟試劑靈敏度的復(fù)核結(jié)果。 ?結(jié)果觀察 將試管輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn) 180176。 1℃ 恒溫器中，保溫 60177。其中4支 4列分別加入 2λ、 λ、 ；另 2支（管）加入 作為陰性對照。 鱟試劑靈敏度復(fù)核 ?細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備圖示： 鱟試劑靈敏度復(fù)核 ?待復(fù)核鱟試劑的準(zhǔn)備 取規(guī)格為 ，每支加入 使溶解備用（規(guī)格大于 ／支的鱟試劑，按其標(biāo)示量加入細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水復(fù)溶后按 中，至少準(zhǔn)備 18管）。然后進(jìn)行稀釋，制備成 4個(gè)濃度的細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，即 2λ、 λ、 （ λ為所復(fù)核的鱟試劑的標(biāo)示靈敏度）四個(gè)濃度的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混勻30 秒鐘 。 ?細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的準(zhǔn)備 取細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（或國家標(biāo)準(zhǔn)品）一支，輕彈瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂輪在瓶頸上部輕輕劃痕， 75%酒精棉球擦拭后啟開，啟開過程中應(yīng)防止玻璃屑落入瓶內(nèi)。 鱟試劑靈敏度復(fù)核 ?目的 考察鱟試劑的靈敏度是否準(zhǔn)確、考察檢驗(yàn)人員操作方法是否正確及實(shí)驗(yàn)條件是否符合規(guī)定。 ?MVD=cL/λ 式中 L 為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值； c 為供試品溶液的濃度，當(dāng) L 以 EU/ml 表示時(shí)，則 c 等于 ，當(dāng) L以EU/mg 或 EU/U 表示時(shí)， c 的單位需為 mg/ml 或 U/ml。 M 為人用每公斤體重每小時(shí)的最大供試品劑量，依據(jù)藥品使用說明書， 《 臨床用藥須知 》 確定。h），鞘內(nèi)用注射劑 K=（ kg注射劑 K=5EU/（ kg 內(nèi)毒素限值的確定 ?一般按公式： L=K/M 式中 L 為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值，以 EU/ml、 EU/mg 或 EU/U（活性單位）表示。 ?一般要求供試品溶液的 pH 值在 ～ 的范圍內(nèi)。 檢查方法概述 ?凝膠法 限量試驗(yàn) 半定量試驗(yàn) ?光度測定法 濁度法（終點(diǎn)濁度法和動態(tài)濁度法）
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