【正文】
ng assay for NF—kappaB activationdependent gene expression. J Biomol Screen,2003,8(5):511 一521.26 Necela BM,Cidlowski JA.Development of a flow cytometric assay to study glucocorticoid receptor—mediated gene activation in 1iving cells.Steroids,2003,68(4):341—350.11 / 11。參考文獻(xiàn)1.Baldw in ASJ.The NFkappa B and I kappa B proteins:new discoveries and insights.Annu Rev Immunol,1996,14:649.2 Sen R,Baltimore D.Inducibility of the immunoglobulin enhancerbinding protein NFκB by a posttranslational mechanism.Cell,1986,47:921283 Thanos D ,Maniatis T. NF kappa B : a lesson in family values. Cell ,1995 ,80 (4) :529~5324汪福州 景亮對核因子NFκB 在免疫反應(yīng)和細(xì)胞凋亡中作用的認(rèn)識 中華麻醉在線,5 郭偉王奇陳云波 細(xì)胞核因子κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑內(nèi)的活化與調(diào)節(jié)機(jī)制研究進(jìn)展實用醫(yī)學(xué)雜志2006年第22卷第ll期6 THOMPSON J E, PHILLIPS R J,ERDJUMENTBROMAGE H, et a1. I kappa Bbeta regulates the persistent response in a biphasic activation of NFkappa B【J】.Cell,1995,80(4):573—582.7 TANAKA M,F(xiàn)UENTES M E,YAMAGUCHIK, et al. Embryonic lethality. 1iverDegeneration,and impaired NFκB activation in IKKbdeficient mice 【J】.Immunity.1999,10(4):421—429.8 DEVIN A,LIN Y,YAMAOKA S,et a1.The alpha and beta subunits of I kappaB kinase(IKK) mediate TRAF2dependent IKK recruitment to tumor necrosis factor(TNF) receptorl in response to TNF【J】.Mol Cell Biol,2001,21(12):3986—3994.9 YAMAMOTO Y,YIN M J,GAYNOR R B.I kappa B kinase alpha (IKK Blpha)regulation of IKK beta kinase activity【J】.M0l Cell Biel,2000。NFκB參與機(jī)體的細(xì)胞分化、免疫反應(yīng)、胚胎發(fā)生、細(xì)胞凋亡及病毒感染等多種重要的生理和病理反應(yīng)因此受到國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。結(jié)語自1986年首次發(fā)現(xiàn)NFκB以來,圍繞它的研究日益深入。GFP報告基因的另一個優(yōu)點(diǎn)是可以在活細(xì)胞條件下檢測以及細(xì)胞內(nèi)定位【26】。該報告基因檢測不需要底物,GFP表達(dá)穩(wěn)定,加熱、變性劑、去垢劑及一般的蛋白酶均不能使它滅活【22】。luc分析具有快速、方便,具有很好的濃度線性范圍(具有7~8個數(shù)量級的線性范圍),而被廣泛應(yīng)用【24】。βgal基因現(xiàn)常用作轉(zhuǎn)染的參照體系。報告基因分析系統(tǒng)(reporter gene assay)的建立,給NFκB的轉(zhuǎn)錄活性評價帶來了極大方便。此試劑盒是一個快速,使用方便且敏感特異的試驗方法。通過使用直接與轉(zhuǎn)錄因子p65,p50,p52,cRel或者Rel B亞基配對的抗體,活化的轉(zhuǎn)錄因子亞基結(jié)合到寡核苷酸而被檢測到。試劑盒內(nèi)