現(xiàn)代生物技術(shù)在中藥行業(yè)中的應(yīng)用-文庫吧資料
2025-04-13 03:45本頁面
【正文】 方面：（1）基于PCR方法的DNA分子標(biāo)記技術(shù)，如RAPD、AFLP等；（2）基于分子雜交的DNA分子標(biāo)記技術(shù)，如RFLP；（3）基于DNA序列分析的分子標(biāo)記技術(shù)，如DNA直接測(cè)序法、PCRRFLP法。因此建立合理中藥材的生產(chǎn)和質(zhì)量評(píng)價(jià)體系將對(duì)中藥現(xiàn)代化尤為重要。中藥材的質(zhì)量控制主要應(yīng)包括兩個(gè)方面的內(nèi)容，一是品種的控制，主要是解決真?zhèn)蔚膯栴}。如金東史等利用酶轉(zhuǎn)化方法將人參中的主要皂苷成分轉(zhuǎn)化成含量只有十萬分之幾的人參皂苷Rh2，并達(dá)到了月產(chǎn)30kg的生產(chǎn)規(guī)模。利用微生物生長代謝來炮制中藥，比一般的物理或化學(xué)炮制手段優(yōu)越，可較大幅度地改變藥性，提高療效，降低毒副作用，為中藥活性成分結(jié)構(gòu)修飾提供新途徑，產(chǎn)生新藥效，擴(kuò)大適應(yīng)癥，保護(hù)中藥活性成分免遭破壞，節(jié)省藥源。在5L發(fā)酵罐中重組畢赤酵母能夠高密度發(fā)酵產(chǎn)生水蛭素, g/L, 為大規(guī)模工業(yè)化鋪平了道路。，人工條件下利用細(xì)胞的快速增殖與次生代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生，為人工資源的生產(chǎn)提供技術(shù)平臺(tái)。希臘毛地黃細(xì)胞在褐藻酸鹽的固定化下培養(yǎng)，可將有毒物質(zhì)毛地黃苷轉(zhuǎn)化為地高辛，利用紫草細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫草寧等。此外，毛狀根和不定根組織培養(yǎng)也很成功，培養(yǎng)的黃芪毛狀根的效價(jià)與藥用黃芪類似，丹參毛狀根的培養(yǎng)物含有7種丹參堿。中科院生化過程工程研究所成功培養(yǎng)了紫杉醇、紫草寧、麻黃堿、雪蓮、藏紅花等10余種藥用植物及代謝產(chǎn)物，還在微型薯、青蒿發(fā)根轉(zhuǎn)化苗反應(yīng)器培養(yǎng)方面獲得了成功。我國許多藥用植物如人參、丹參、甘草、黃連等的細(xì)胞培養(yǎng)都獲得了成功，人參、新疆紫草細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)接近國際先進(jìn)水平，已經(jīng)工業(yè)化和商品化。植物細(xì)胞工程有助于實(shí)現(xiàn)中藥生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化，實(shí)現(xiàn)瀕危珍稀中藥材和具有較高臨床價(jià)值的現(xiàn)代中藥產(chǎn)品的二次開發(fā)?！? 植物細(xì)胞工程實(shí)施藥用植物的細(xì)胞工程，可以利用生物反應(yīng)器對(duì)植物細(xì)胞組織大規(guī)模培養(yǎng)，通過一系列的單元操作和有效的細(xì)胞程序調(diào)控，提高中藥有效成分含量，通過對(duì)有效成分含量的標(biāo)準(zhǔn)化，可提供與天然中藥材具有相同藥理作用的中藥原料產(chǎn)品。吳偉康等應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片觀察小鼠心肌缺血后基因表達(dá)的變化以及四逆湯對(duì)其的影響。王軍等用此探討局灶硬化性腎小球腎炎模型小鼠的細(xì)胞因子表達(dá)譜，以及復(fù)方積雪草對(duì)其細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的表達(dá)調(diào)控作用。同時(shí)可對(duì)中藥中的各種成分進(jìn)行平行篩選，比較各種成分作用后機(jī)體基因表達(dá)的差異，結(jié)合體內(nèi)組織學(xué)和生物化學(xué)的改變，探索中藥的有效成分及存在狀況，尋找有效部位和制備單體。藥物處理后基因表達(dá)的改變對(duì)研究藥物作用機(jī)制有一定的提示作用。提高表達(dá)效率，大規(guī)模生產(chǎn)仍是目前研究的難點(diǎn)。戴均貴等用長春花懸浮培養(yǎng)細(xì)胞實(shí)現(xiàn)了對(duì)天麻素的生物轉(zhuǎn)化。藥用植物基因工程起步較晚，但也有一些可喜成果，方法主要有農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移、種質(zhì)系統(tǒng)的基因轉(zhuǎn)移和外源基因直接導(dǎo)入法。目前主要包括免疫印跡法、放射免疫檢測(cè)、熒光免疫檢測(cè)、免疫酶技術(shù)、免疫聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)等。分子免疫技術(shù)檢測(cè)的原理是應(yīng)用已知特定的抗體(抗原)對(duì)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原(抗體)蛋白進(jìn)行定性或定量的檢測(cè)。如用于測(cè)定茶堿血漿濃度,測(cè)定中藥、中成藥的有效成分含量。PCR直接測(cè)序技術(shù)用于鑒定人參、雞內(nèi)金、鹿鞭等。RAPD簡(jiǎn)便、快速，應(yīng)用最廣，已鑒定了木藍(lán)屬8種生藥、鐵線蓮屬7種生藥和西紅花等?！ ? DNA遺傳標(biāo)記、電泳技術(shù)DNA作為生物群體細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)，具有遺傳穩(wěn)定性，代表了該種群的基本遺傳特征，對(duì)其標(biāo)記，制定出其正品的標(biāo)準(zhǔn)DNA指紋圖譜，為鑒別不同類別中藥提供了方便快捷的方法。Beike等用LCMS法定量測(cè)定了人血、胃內(nèi)容物和組織中的紫杉?jí)A和異紫杉?jí)A。Zauggs等用β環(huán)糊精為手性添加劑，以十二烷基硫酸鈉為表面活性劑的方法分離奎寧、奎尼丁等化合物，鑒別出奎寧、奎尼丁。20世紀(jì)80年代末毛細(xì)管電泳法(Capillary Electrophoresis, CE)快速發(fā)展，分離效果(柱效可達(dá)到107)遠(yuǎn)大于經(jīng)典的色譜法。樣品中的各組分在兩相相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)被多次分配，分配系數(shù)大的組分遷移速度
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