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正文內(nèi)容

有機(jī)體`染色體和基因-文庫吧資料

2025-01-25 01:46本頁面
  

【正文】 5‘…..G AATTC……3’ 3’…..C TTAAG…….5’ 限制性內(nèi)切酶 ---最基本的工具酶, 在 DNA測序、片段分離、克隆 DNA的環(huán)節(jié)都要用到 二、噬菌體( phage ) Φ X174噬菌體 很小的 DNA為單鏈環(huán)狀,有 5386個(gè)核苷酸( Frederick Sanger 于 1977分析測定,為此榮獲第二次諾貝爾獎 ) Φ X174噬菌體基因排列更加體現(xiàn) 經(jīng)濟(jì)原則 b、 DNA分子絕大部分用來編 碼蛋白質(zhì),不翻譯部分只占 4% (基因之間的間隔區(qū) 控制基因表達(dá)的序列) a、 11個(gè)蛋白質(zhì)基因,只轉(zhuǎn)錄成 三個(gè) mRNA 重迭基因有以下幾種情況: * 一個(gè)基因完全在另一個(gè)基因內(nèi)部 如: B和 A* E和 D 其讀碼結(jié)構(gòu)互不相同 c、 最顯著的特點(diǎn)是有重疊基因 ( overlapping genes 或 嵌套基因 nested genes) ATG//AATGCC //ATAACG//TAA A* B ATGCCNNNATAA * 部分重疊 K和 C * 兩個(gè)基因共用少數(shù)堿基對 如: A*和 C D和 J ATGA C Start codon TAATG A* Stop codon D Stop codon J Start codon λ 噬菌體 雙鏈 DNA 長度 48502bp(48Kb) * 其 DNA分子有三種存在形式 a、兩個(gè)粘性末端分 離的線性分子 COS位點(diǎn) (cohesiveend site) c、 閉合環(huán)狀分子 (粘性末端 互補(bǔ), DNA連接酶連接) b、帶有切刻的環(huán)狀分子(開環(huán)的 粘性末端互補(bǔ)后未連接的) * 其基因均是按功能相近的聚集成簇的(兩個(gè)正調(diào)節(jié)基因 N 和 Q除外) * 存在形式 在寄主體內(nèi)有 溶源生長周期 (原噬菌體)和 溶菌生長周期 兩種生活途徑 第三節(jié) 真核生物的染色體 一、概述: * 真核 DNA+組蛋白 核小體 * 核小體折疊壓積 染色質(zhì)( chromatin) (其它的蛋白質(zhì)和 RNA) * 大部分細(xì)胞生活周期里以染色質(zhì)的形式存在(彌散狀) M期--染色體形式 * 染色質(zhì)有兩種型 a、常染色質(zhì):密度較低,能被表達(dá) b、異染色質(zhì):密度較高,不被表達(dá)(著絲粒、端粒) Cell cycle Interphase 間期 : G1 + S + G2 M phase (mitosis 有絲分裂 ): 二、組蛋白( Histone) 與 DNA結(jié)合的一類堿性蛋白質(zhì) * 染色體的主要蛋白質(zhì)組分 * 富含 Lys、 Arg等堿性氨基酸, 11KD ~ 23KD * 核心組蛋白有 H2A、 H2B、 H3和 H4,另一種為 H1 * 與 DNA緊密結(jié)合 * 保守性強(qiáng),但 H1的保守性較弱 H2B H2A H3 H4 a2 a3 a1 a2 a3 a1 a2 a3 a1 a2 a3 a1 L1 L2 aN * 組蛋白八聚體( Histone octamer ) H2A與 H2B、 H3與 H4的親和力強(qiáng), 通過 C端的疏水氨基酸結(jié)合 兩個(gè) H H4先形成四聚體 結(jié)合兩個(gè) H2A和 H2B的異二聚體 組蛋白八聚體 二、核小體( Nuclearsome) * 染色體結(jié)構(gòu)的第一個(gè)層次,構(gòu)成染色質(zhì)的 基本結(jié)構(gòu)單位 * 足量的微球菌核酸酶處理染色質(zhì)可得到 # 146bpDNA + 組蛋白 八聚體 → 核小體的 核 心顆粒 直徑約 10nm 核小體的組成 組蛋白八聚體 146bp的 核心 DNA 146bp的核心 DNA在組蛋白八聚體上盤繞 Mononucleosomes typically have ~200 bp DNA. Endtrimming reduces the length of DNA first to ~165 bp, and then generates core particles with 146 bp. # 微球菌酶處理所得核小體 DNA長度的變化 Chromatosome 166 bp, 2 superhelical turn Histone H1 * 組蛋白 H1把核小體 “ 封鎖 ” 起來 其中, 166bp核小體 DAN的堆積比為 10 56nm線性長度 → 連接 DNA 10 to 100 bp 平均 55 bp Nucleosome Histone H1 Nucleosome repeat: Core + linker DNA 200 bp 染色體結(jié)構(gòu)的形成 ( 1) 首先若干個(gè)核小體形成念珠狀結(jié)構(gòu) The 10 nm fiber is a continuous strong of nucleosomes. 每個(gè)核小體單位包括: 200bp左右的 DNA、一個(gè)組蛋白八聚體、一分子 H1 ? 高度有序 ? 左手螺旋 ? 每圈包括六個(gè)核小體 30 nm fiber (直徑 30nm) Solenoid (螺線管) ( 2) 30nm纖絲 的構(gòu)成-- 染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的第二層次 a、組成 Nuclear matrix (核基質(zhì) ), protein pl
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