dna復(fù)制-dna-replica-文庫(kù)吧資料
2025-01-18 08:01本頁(yè)面
【正文】 合。 新復(fù)制、半甲基化的 oriC可被 SeqA蛋白識(shí)別，SeqA與半甲基化的 GATC緊密結(jié)合。在 DNA復(fù)制之前，染色體 DNA上的每一 GATC序列，包括 oriC區(qū)域中的 GATC，都被甲基化。 終止區(qū)這樣的安排可確保兩個(gè)從相反方向進(jìn)入 ter區(qū)的復(fù)制叉總能相遇 ， 當(dāng)一個(gè)復(fù)制叉遇到另一個(gè)復(fù)制叉時(shí) ， DNA復(fù)制就完成了 。 當(dāng)序列特異性 DNA結(jié)合蛋白 Tus與終止位點(diǎn)結(jié)合后 ，只阻斷一個(gè)方向上的復(fù)制叉的前進(jìn) ， 而對(duì)向另一個(gè)方向前進(jìn)的 復(fù)制叉不起作用 。 Ter序列按照特定的方向排列在染色體上 （ 圖 ） ， 制造了一個(gè) “ 陷阱 ” 。 大腸桿菌的復(fù)制終止區(qū)域位于環(huán)狀染色體上與復(fù)制起點(diǎn)相對(duì)的一側(cè) 。當(dāng) RNA引物被切除后，由 DNA連接酶催化磷酸二酯鍵的形成，從而把岡崎片斷連接起來(lái)形成連續(xù)的不含 RNA序列的后隨鏈?！?39。岡崎片段的 RNA引物長(zhǎng)約 5個(gè)核苷酸，而它的 DNA部分長(zhǎng)約 1 000～ 2 000 bp。 新組裝的滑動(dòng)夾與核心酶結(jié)合 ， 起始下一個(gè)岡崎片段的合成 。 當(dāng)負(fù)責(zé)后隨鏈合成的核心酶完成一個(gè)岡崎片段的合成后 ， 即從滑動(dòng)夾和 DNA上脫落下來(lái) 。DNA聚合酶 III全酶通過(guò) τ 亞基和解旋酶相互作用 ，兩個(gè) τ 亞基分別與一個(gè)核心酶結(jié)合 ， 其中一個(gè)核心酶復(fù)制前導(dǎo)鏈 ， 另一個(gè)核心酶復(fù)制后隨鏈 ?！?339。 先導(dǎo)鏈被連續(xù)合成 ， 而后隨鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)合成的 。最后，兩個(gè)拷貝的 τ 亞基使核心聚合酶形成二聚體。 γ 復(fù)合體又稱夾子裝載因子（ clamp loader），催化滑動(dòng)夾打開(kāi)，并將其結(jié)合在引物－模板上。 一旦 β 亞基二聚體與 DNA緊密結(jié)合 ， 它的作用就像一個(gè) “ 滑動(dòng)夾子 ” (sliding clamp)攜帶著核心聚合酶沿著 DNA鏈自由滑動(dòng) 。 DNA聚合酶 III具有兩個(gè)拷貝的核心酶 。→ 539?！?339。 其中 α 、 ε和 θ 亞基構(gòu)成核心酶 ?！?39?！?39?！?39。因此，這種酶活性在 DNA損傷的修復(fù)中可能起重要作用，對(duì)完成的 DNA片段去除 5’端的 RNA引物也是必須的?！?39。 （ 2） DNA聚合酶的 3’ →5 ’ 外切核酸酶 （ exonuclease) 這種酶活性的主要功能是從 3’ → 5’ 方向識(shí)別并切除 DNA生長(zhǎng)鏈末端與模板 DNA不配對(duì)的核苷酸 ，這種功能稱為校對(duì)功能 （ proofreading） ， 這是保證其聚合作用的正確性不可缺少的 ， 因此對(duì)于維持DNA復(fù)制的真實(shí)性 （ replicational fidelity） 至關(guān)重要 ?！?339。OH與 dNTP的 539。→339。大小片段具有不同的酶活性。酶分子中含有一個(gè) Zn2＋ ，是聚合酶活性必需的。另外 3種 DNA聚合酶主要參與 DNA修復(fù)和跨損傷合成。 DNA聚合酶 III是大腸桿菌 DNA復(fù)制中鏈延伸反應(yīng)的主要聚合酶。新生鏈的合成由 DNA聚合酶催化完成。 DnaB蛋白是解旋酶（ Helicase），其作用是解開(kāi) DNA雙鏈 接著單鏈結(jié)合蛋白（ singlestranded binding protein, SSB）與解旋酶解開(kāi)的單鏈結(jié)合，其作用是防止單鏈降解，阻止單鏈退火。 一般認(rèn)為螺旋解開(kāi)是由于 DNA雙螺旋在 DnaA蛋白復(fù)合體上纏繞后產(chǎn)生的扭轉(zhuǎn)張力的結(jié)果 。 這種結(jié)合只能發(fā)生在負(fù)超螺旋 DNA分子上 ，而負(fù)超螺旋是大腸桿菌染色體的正常存在狀態(tài) 。 9 bp基序共有 4個(gè)拷貝 ， 分散于整個(gè) OriC的范圍內(nèi) ， 它是 DnaA蛋白的結(jié)合位點(diǎn) 。兩條鏈的合成都需要先合成 RNA引物，但都是連續(xù)合成的。線粒體 DNA的復(fù)制是非對(duì)稱的，每一個(gè) DNA分子有兩個(gè)相距很遠(yuǎn)的復(fù)制起始區(qū)， OH和 OL。 D環(huán)復(fù)制 葉綠體和線粒體 DNA采用的是 D環(huán)復(fù)制。在進(jìn)行滾環(huán)復(fù)制時(shí)，首先在雙鏈環(huán)狀 DNA分子一條
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1