【正文】 四氨基酸（Gly）5第三氨基酸S. aureus (G+)Ⅲ第四氨基酸(肽尾)12第三氨基酸 (G+)Ⅳ第四氨基酸DLys第三氨基酸(G+)*什么叫溶菌酶?它的作用方式如何?溶菌酶:是一種廣泛存在于卵清、的淚液和鼻涕、部分細(xì)菌和噬菌體內(nèi)的一種酶，它能有效地水解細(xì)菌的肽聚糖，其水解位點是N—乙酰胞壁酸的1碳和N—乙酰葡糖胺的4碳間的β1，4糖苷鍵。*細(xì)菌肽聚糖中，把各“肽尾”交聯(lián)起來的“肽橋”有哪幾種類型?試列表并舉例說明之。它的肽聚糖含量占細(xì)胞壁的10%弱，一般由l2層網(wǎng)狀分子構(gòu)成，在細(xì)胞壁上的厚度僅為23nm。這一肽橋的氨基端與前一肽聚糖單體肽尾中的第4氨基酸——D丙氨酸的羧基相連接，而它的羧基端則與后一肽聚糖單體肽“尾”中的第3個氨基酸——堿性氨基酸L—賴氨酸的氨基相連接，從而使前后兩個肽聚糖單體交聯(lián)起來。每一肽聚糖單體有三個組成部分：① 雙糖單位，即由一個N—乙酰葡糖胺與一個N—乙酰胞壁酸分子通過β1，4—糖苷鍵連接而成；② 短肽“尾”，即由四個氨基酸連起來的短肽連接在N—乙酰胞壁酸分子上。它的肽聚糖層厚約2080nm，由40層左右網(wǎng)狀分子所組成。肽聚糖分子是由肽和聚糖組成。如在形成原生質(zhì)體或球狀體前已有噬菌體侵入，則該噬菌體仍能正常增殖和裂解，同樣，如在形成原生質(zhì)體前正在形成芽孢，則該芽孢也仍能正常形成。狹義地說，L型細(xì)菌應(yīng)專指那些在實驗室中詛過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株。用下表表示革蘭氏陽性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁構(gòu)造的差別G+：肽聚糖、壁酸磷壁酸、膜磷壁酸、周質(zhì)空間、細(xì)胞膜G—：外壁層：脂多糖(LPS)、磷脂，外壁蛋白、脂蛋白、基質(zhì)蛋白、或孔蛋白、O特異側(cè)鏈；內(nèi)壁層：肽聚糖；周質(zhì)空間；細(xì)胞膜 G+細(xì)菌與G—細(xì)菌細(xì)胞壁成分比較成 分占細(xì)胞壁干重的%革蘭氏陽性細(xì)菌革蘭氏陰性細(xì)菌肽聚糖磷壁酸類脂質(zhì)蛋白質(zhì)含量很高(3095)含量較高(50)一般無(2)0含量很低(520)0含量較高(20)含量較高*什么是原生質(zhì)體、球狀體、L型細(xì)菌?試比較它們的異同?①原生質(zhì)體(protoplast)：指在人工條件下用溶菌酶除盡原有細(xì)胞壁或用青霉素抑制細(xì)胞壁的合成后，所留下的僅由細(xì)胞膜包裹著的脆弱細(xì)胞，一般由革蘭氏陽性菌形成；②球狀體或原生質(zhì)球(sphaeroplast)：指還殘留部分細(xì)胞壁的原生質(zhì)體，一般由革蘭氏陰性細(xì)菌所形成；③L型細(xì)菌：1935年時，在英國李斯德預(yù)防醫(yī)學(xué)研究所中發(fā)現(xiàn)，一種由自發(fā)突變而形成的細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌，它的細(xì)胞膨大，對滲透壓十分敏感，在固體培養(yǎng)基表面形成“油煎蛋”似的小菌落。茅孢有極強(qiáng)的抗熱、抗輻射、抗化學(xué)藥物和抗靜水壓等的能力。4）芽孢：某些細(xì)菌在其生長發(fā)育后期，可在細(xì)胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形的抗逆性休眠體，稱為芽孢。它的結(jié)構(gòu)較鞭毛簡單，功能是使細(xì)菌較牢固連在物體(呼吸道、消化道、泌尿生殖道的粘膜)表面上。2）鞭毛(flegellum)：某些細(xì)菌長在體表的長絲狀、波曲的附屬物，稱為鞭毛至數(shù)十根，具有運動的功能。根據(jù)其厚度的不同，常有不同的名稱，例如微莢膜(microcapsule)、莢膜或粘液層(slimelayer)，有的細(xì)菌例如Zoogloea(動膠菌屬)的菌種會產(chǎn)生有一定形狀的大形粘膠物，稱為菌膠團(tuán)(zoogloea)，它實質(zhì)上是細(xì)菌群體的一個共同莢膜。特殊構(gòu)造：不是一切細(xì)菌都具有的細(xì)胞構(gòu)造，包括莢膜、鞭毛、菌毛和芽孢等。它的大小與噬菌體相仿，約10nm，內(nèi)含1,5二磷酸核酮糖羧化酶，在自養(yǎng)細(xì)菌的C02固定中起著關(guān)鍵的作用。6）內(nèi)含物：細(xì)胞質(zhì)內(nèi)一些形狀較大的顆粒狀構(gòu)造，主要有①貯藏物：一類由不同化學(xué)成分累積而成的不溶性顆粒，主要功能是貯存營養(yǎng)物質(zhì)②磁小體：存在于少數(shù)菌中，大小均勻，數(shù)目不等，形狀為平截八面體、平行六面體或六棱柱體等，成分為Fe3O4，外有一層磷脂、蛋白質(zhì)或糖蛋白膜包裹，無毒，具有導(dǎo)向功能。原核攜帶了細(xì)菌絕大多數(shù)的遺傳信息，是細(xì)菌生長發(fā)育，新陳代謝和遺傳變異的控制中心。4）核質(zhì)體：原核生物所特有的無核膜結(jié)構(gòu)的原始細(xì)胞核，又稱核區(qū)，擬核或核基因組等。3）細(xì)胞質(zhì)(cytoplasm) ：被細(xì)胞膜包圍著的除核質(zhì)體外的一切透明、膠狀、顆粒狀物質(zhì)，可總稱為細(xì)胞質(zhì)。2）細(xì)胞膜：又稱細(xì)胞質(zhì)膜或質(zhì)膜，是緊貼在細(xì)胞壁內(nèi)側(cè)的一層由磷脂和蛋白質(zhì)組成的柔軟、富有彈性的半透性薄。（圖略：書上11頁，第二版）一般構(gòu)造：一般細(xì)菌都具有的細(xì)胞構(gòu)造，包括細(xì)胞壁，細(xì)胞膜，細(xì)胞質(zhì)，核質(zhì)體，間體，內(nèi)含物1）細(xì)胞壁：是位于細(xì)胞最外的一層厚實、堅韌的外被，主要由肽聚糖構(gòu)成。又由于這狀兩大類細(xì)菌在細(xì)胞結(jié)構(gòu)、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥物敏感性等方面形都呈現(xiàn)出明顯的差異，因此任何細(xì)菌只要先通過很簡單的革蘭氏染色，即可提供不少其他重要的生物學(xué)特性方面的信息。革蘭氏染色有著十分重要的理論與實踐意義。反之，革蘭氏陰性細(xì)菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交聯(lián)松散，故遇乙醇后，肽聚糖網(wǎng)孔不易收縮，加上它的類脂含量高，所以當(dāng)乙醇把類脂溶解后，在細(xì)胞壁上就會出現(xiàn)較大的縫隙，這樣，結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物就極易被溶出細(xì)胞壁，因此，通過乙醇脫色后，細(xì)胞又呈無色。通過初染和媒染操作后，在細(xì)菌細(xì)胞的膜或原生質(zhì)體上染上了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的大分子復(fù)合物。*試述革蘭氏染色的機(jī)制及其重要意義。經(jīng)此染色后，保留最初染上的紫色的細(xì)菌為革蘭氏陽性菌，而被復(fù)染呈紅色的為革蘭氏陰性菌。接著就用95%乙醇進(jìn)行脫色。染色法的種類很多，可概括如下:簡單染色法：正染色、死菌革蘭氏染色法：鑒別染色法、正染色、死菌抗酸性染色法：鑒別染色法、正染色、死菌芽孢染色法：鑒別染色法、正染色、死菌姬母薩染色法：鑒別染色法、正染色、死菌夾膜染色法：負(fù)染色法、死菌美藍(lán)、TTC（氯化三苯基四氮脞）：活菌在上述的各種染色法中，以革蘭氏染色法最為重要*什么是革蘭氏染色法?它的主要步驟是什么?哪一步是關(guān)鍵? ，故名，它是細(xì)菌學(xué)中最重要的染色法。至于它的重量則更是微乎其微，如果一個細(xì)胞的重量為10—12g，*觀察細(xì)菌形態(tài)時為何要用染色法?常用的染色法有幾類?由于細(xì)菌的細(xì)胞極其微小又十分透明，因此用水浸片或懸滴觀察法在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察時，只能看到其大體形態(tài)和運動情況。形象地說，1 “頭”、“尾”相接僅等于3mm長的一顆芝麻。③長有大量細(xì)菌的液體，會呈現(xiàn)混濁、沉淀或飄浮一片片小“白花”氣并伴有大量氣泡冒出等。如用手去撫摸長有細(xì)菌的物體表面時，就有粘、滑的感覺。例如，①凡在溫暖、潮濕和富含有機(jī)物質(zhì)的地方，都有大量的細(xì)菌在活動著。原核微生物和真核微生物間的差別主要如下表3—1 真核生物與原核生物的比較比較項目真核生物原核生物細(xì)胞大小較大,5um較小，5um如有細(xì)胞壁，其主要成分纖維素，幾丁質(zhì)肽聚糖細(xì)胞膜成分通常含甾醇一般無甾醇含呼吸或光合組分無有細(xì)胞質(zhì)線粒體有無間體無有溶酶體有無核糖體80S（細(xì)胞質(zhì)核糖體）70S葉綠體光能自養(yǎng)生物中有無真液泡有些有無貯藏物淀粉starch等聚b羥丁酸等高爾基體有無微管系統(tǒng)有無流動性有無細(xì)胞核核膜有無DNA=deoxyribonucleic acid含量少（~5%）多（~10%）組蛋白有無有絲分裂有無減數(shù)分裂有無核仁有無染色體數(shù)目一般多于1個=1個鞭毛flagellum結(jié)構(gòu)如有，則復(fù)雜（9+2型，有膜如有，則簡單（單絲，無膜）遺傳重組方式有性生殖，準(zhǔn)性生殖轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)導(dǎo)，接合生物固氮能力無有些有專性厭氧生活無常見氧化磷酸化部位線粒體細(xì)胞膜光合作用部位葉綠體細(xì)胞膜化能合成作用無有繁殖方式有性或無性多數(shù)進(jìn)行二等分裂*試舉幾個實例來說明：即使不用顯微鏡，也可證明在我們?nèi)粘Ｉ畹沫h(huán)境中，到處有細(xì)菌活動。 微生物根據(jù)其不同的進(jìn)化水平和性狀上的明顯差別可分為原核微生物、真核微生物和非細(xì)胞微生物三大類群。掌握這些知識不但為進(jìn)一步學(xué)習(xí)微生物其它知識所必需，而且還有助于我們判斷它們一系列的其它相關(guān)的生物學(xué)特性(例如革蘭氏染色反應(yīng)與細(xì)菌一系列其他生物學(xué)特性間的聯(lián)系)，提高菌種的定向篩選效率，及時檢出雜菌，以及掌握發(fā)酵生產(chǎn)進(jìn)程等。但今后發(fā)現(xiàn)的微生物可能主要是生理類型獨特、進(jìn)化地位較低的種類*研究微生物的形態(tài)構(gòu)造有何重要性?試舉例說明之。目前比較肯定的微生物種數(shù)大約為10萬種，隨著分離、培養(yǎng)方法的改進(jìn)和研究工作的深入，微生物的新種、新屬、新科甚至新目、新綱屢見不鮮。例如①在海洋深處的某些硫細(xì)菌可在250℃甚至在300℃的高溫條件下正常生長；②大多數(shù)細(xì)菌能耐0196℃(液氮)的任何低溫，甚至在253℃(液態(tài)氫)下仍能保持生命；③一些嗜鹽菌甚至能在一32％的飽和鹽水中正常生活；④許多微生物尤其是產(chǎn)芽孢的細(xì)菌可在干燥條件下保藏幾十年、幾百年甚至上千年；⑤Thiobacillus thiooxidans(氧化硫硫桿菌)是耐酸菌的典型，它的一些菌株能生長在5%10% (，)的H2SO4中；⑥有些耐堿的微生物如Thiobacillus denitrificans(脫氮硫桿菌)；⑦抗輻射能力最強(qiáng)的生物——Micrococcus radiodurans(耐輻射微球菌)則達(dá)到750 000R；此外，在抗靜水壓、耐缺氧、耐毒物等特性在微生物中也是極為常見的。5．舉例說明微生物在其他生物所不易或不能生存條件下的正常存在。在醫(yī)療實踐上， 40年代初剛使用青霉素治療時，即使是嚴(yán)重感染的病人，也只要每天分?jǐn)?shù)次共注射10萬單位的青霉素即可，而現(xiàn)在，成人每天要注射120萬單位左右，新生兒也不少于40萬單位。微生物的個體一般都是單細(xì)胞、簡單多細(xì)胞或非細(xì)胞的，通常都是單倍體，加之它們具有繁殖快、數(shù)量多和與外界環(huán)境直接接觸等原因，即使其變異的頻率十分低，也可在短時間內(nèi)產(chǎn)生大量變異的后代。它們?yōu)槿祟愄峁┝烁鼮樨S富的微生物資源，對工農(nóng)業(yè)、環(huán)境保護(hù)以及科學(xué)研究發(fā)展和進(jìn)步起著很大的促進(jìn)作用。3. 微生物有哪些為一般動植物所沒有的獨特代謝類型?它們有何理論與實踐意義?微生物的生理代謝類型之多，是動、植物所不及的。②適應(yīng)強(qiáng)這個特性給消毒滅菌、食物的保藏等帶來了極大的不利。當(dāng)然，微生物五大共性也給人類帶來了很弊端：例如①對于危害人、畜和植物等的病原微生物或使物品霉腐變質(zhì)的微生物，及如果工業(yè)發(fā)酵中被雜菌污染。③我們可利用易變異這一特性進(jìn)行生物的誘變育種。微生物五大共性給人類帶來了很多益處：例如①吸收多、轉(zhuǎn)化快，這個特性為它們的高速生長繁殖和產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物提供了充分的物質(zhì)基礎(chǔ)，從而使微生物有可能更好地發(fā)揮“活的化工廠”的作用。最基本的一個是：體積小、面積大，由于微生物是如此一個由它可發(fā)展出一系列其他共性，因為一個小體積大面積系統(tǒng)必然有一個巨大的營養(yǎng)物吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的接受面。“生物界之最”?微生物對環(huán)境條件尤其是惡劣的“極端環(huán)境”例如高溫、高酸、高鹽、高輻射、高壓、低溫、高堿、高毒等驚人的適應(yīng)能力，堪稱生物界之最。6）按微生物學(xué)與其他學(xué)科間的交叉情況來分這是一類具有旺盛“雜種優(yōu)勢”的新興邊緣學(xué)科，具有強(qiáng)大的生命力。4）按微生物所在的生態(tài)環(huán)境來分土壤微生物學(xué)，海洋微生物學(xué)，環(huán)境微生物學(xué)，宇宙微生物學(xué)以及水微生物學(xué)等。3）按所研究的微生物的對象來分細(xì)菌學(xué)，真菌學(xué)，病毒學(xué)，噬菌體學(xué)，原生動物學(xué)，藻類學(xué)，支原體學(xué)，自養(yǎng)菌生物學(xué)以及厭氧菌生物學(xué)等。1）按研究微生物的基本生命活動規(guī)律為目的來分總學(xué)科可稱為普通微生物學(xué)(General Microbiology)或微生物生物學(xué)(Biology of Microorganisms)，其分支學(xué)科主要有：微生物形態(tài)學(xué)，微生物分類學(xué)，微生物生理學(xué)，微生物生物化學(xué)，微生物遺傳學(xué)，微生物生態(tài)學(xué)以及分子微生物學(xué)等。?簡述其原理并說明這些技術(shù)的創(chuàng)建對發(fā)展微生物學(xué)所作的貢獻(xiàn)。例如顯微鏡術(shù)和制片染色技術(shù)，無菌操作技術(shù)，消毒滅菌技術(shù)，純種分離和克隆化技術(shù)，合成培養(yǎng)基技術(shù)，選擇性和鑒別性培養(yǎng)技術(shù)，突變型標(biāo)記和篩選技術(shù)，深層液體培養(yǎng)技術(shù)，菌種保藏技術(shù)，原生質(zhì)體制備和融合技術(shù)，以及各種DNA重組技術(shù)等，而且這些技術(shù)已迅速擴(kuò)散到生命科學(xué)各領(lǐng)域的研究中，并幾乎已成為研究一切生命科學(xué)的必要手段，從而為整個生命科學(xué)的發(fā)展，作出了方法學(xué)上的貢獻(xiàn)?！昂笃鹬恪钡膶W(xué)科，是一門實踐性很強(qiáng)的學(xué)科?這是因為微生物學(xué)發(fā)展得非常迅速，對生物學(xué)基礎(chǔ)理論的研究作出了重大貢獻(xiàn)，在當(dāng)代生命科學(xué)的研究中仍然發(fā)揮著無可爭辯的關(guān)鍵作用。在生物工程中，微生物工程是基礎(chǔ)，而且微生物在生物工程其它四大工程中也起著非常重要作用，例如，在遺傳工程即基因工程上，除基因供體可以不是微生物外，基因載體、工具酶、基因受體都要么是微生物或其組分要么來源微生物。所謂生物工程學(xué)，一般認(rèn)為是以生物學(xué)(特別是其中的微生物學(xué)、遺：學(xué)、生物化學(xué)和細(xì)胞學(xué))的理論和技術(shù)為基礎(chǔ)，結(jié)合化工、機(jī)械、電子計算機(jī)等現(xiàn)代工程技術(shù)，充分運用分子生物學(xué)的最新成就，自覺地操縱遺傳物質(zhì)，定向地改造生物或其功能，短期內(nèi)創(chuàng)造出具有超遠(yuǎn)緣性狀的新物種，再通過合適的生物反應(yīng)器對這類“工程菌”或“工程細(xì)胞株”進(jìn)行大規(guī)模的培養(yǎng)，以生產(chǎn)大量有用代謝產(chǎn)物或發(fā)揮它們獨特生理功能的一門新興技術(shù)。(Biotechnology)，試述微生物與生物工程學(xué)的關(guān)系。?為什么能發(fā)揮這種作用?微生物學(xué)對生物學(xué)基礎(chǔ)理論的研究重大貢獻(xiàn)：1. 以微生物作為研究對象解決了生物學(xué)上的許多重大爭論問題2. 微生物學(xué)是分子生物學(xué)的三大來源和三大支柱之一3. 遺傳學(xué)研究對象的微生物化促使經(jīng)典遺傳學(xué)發(fā)展為分子遺傳學(xué)4. 在微生物與基因工程上，除基因供體可以不是微生