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選修3專題1、4基因工程、生物技術(shù)的安全性和倫理問題-文庫吧資料

2025-01-14 12:53本頁面
  

【正文】 c 分別表示用限制酶和 DNA 連接酶處理 B.切割目的基因與 切割載體時必須用同種限制酶 C. d 只能通過人工合成法獲取 D.構(gòu)建的基因表達(dá)載體只要求含 有目的基因 解析: d 可通過多種方法獲取 (如從基因文庫中獲取等 );基 因表達(dá)載體除含有目的基因外還必須有標(biāo)記基因、啟動子、終 止子等。 C 項:質(zhì)粒含標(biāo)記 基因,而導(dǎo)入農(nóng)桿菌的目的是為了利用其將目的基因?qū)胧荏w 細(xì) 胞內(nèi),與篩選無關(guān)。 第二步 拓展基本概念: 基因包括編碼區(qū)和非編碼區(qū),編碼 區(qū)能指導(dǎo)蛋白質(zhì)形成,非編碼區(qū)不指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成,但其中有調(diào) 控編碼區(qū)的部位,如 RNA 聚合酶結(jié)合位點;原核細(xì)胞的編碼區(qū) 是連續(xù)的,而真核細(xì)胞的編碼區(qū)是不連續(xù)的,包含外顯子和內(nèi)含 子,只有前者能編碼蛋白質(zhì),經(jīng)轉(zhuǎn)錄后形成的成熟 mRNA 不含 內(nèi)含子所轉(zhuǎn)錄的片段。 ② 基因的產(chǎn)物如果是糖蛋白分子,那么該基因在原核生物 細(xì)菌中表達(dá)出來的蛋白質(zhì)就可能不具備天然狀態(tài)下的活性,因 為糖蛋白上的糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體中加上的,而細(xì)菌細(xì) 胞內(nèi)無這些細(xì)胞器。 (3)個體生物學(xué)水平鑒定:如作物抗性的鑒定等。 (2)表達(dá)檢測 ① 轉(zhuǎn)錄檢測:分子雜交法,用標(biāo)記的目的基因作為探針與 mRNA 雜交,檢測 mRNA。 ③ 使用與獲取目的基因相同的限制酶,這樣形成的黏性末 端堿基之間互補(bǔ),便于連接。 ?????DNA 復(fù)制 PCR 技術(shù) 基因克隆 場所 細(xì)胞核 生物體外 細(xì)胞內(nèi) 酶 解旋酶、 DNA 聚合酶 Taq 酶 限制酶、 DNA 連接酶 載體 不需要 不需要 需要 遵循原則 堿基互補(bǔ)配對 堿基互補(bǔ)配對 堿基互補(bǔ)配對 結(jié)果 DNA 分子 DNA 分子片段 DNA 分子片段 DNA 復(fù)制、 PCR 技術(shù)與基因克隆 的比較 2. 基 因表達(dá)載體的構(gòu)建 ——重組質(zhì)粒的構(gòu)建 (1)基因表達(dá)載體的組成 目的基因+標(biāo)記基因+啟動子+終止子 (2)構(gòu)建步驟 (3)構(gòu)建載體主要考慮的因素 ① 具有選擇性標(biāo)記基因:如抗生素基因,以便選擇出真正 的轉(zhuǎn)基因生物。 考點 基因工程的基本操作程序 (2)獲取方法 1. 目 的基因的獲取 (1)目的基因:主要是編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 (人類所需的 )。 第二步 分析選項: 用 BamHⅠ 和 EcoRⅠ 兩種酶同時切割 該 DNA 片段,當(dāng) 2 為 EcoRⅠ , 3 為 BamHⅠ ,切下的單個含 目的基因的 DNA 片段的兩個黏性末端不相同,不能 自身連接 成環(huán); B、 C 項的 3 位點的限制酶一樣,切下的 DNA 片段 的黏性末端相同; D 項在 3 位點處是 PstⅠ 切割位點,題目中沒 有要求用此酶進(jìn)行切割。 如下圖所示 , 已知某 DNA在目的基因的兩端 4四處有 BamHⅠ 或 EcoRⅠ 或 PstⅠ 的酶切位點 。 (2)作用于 ② 部位的酶: DNA 解旋酶。 ② λ噬菌體的衍生物和某些病毒的 DNA。 ③具有某些標(biāo)記基因,以便進(jìn)行篩選。 ??????(2)載體必須具備三個條件 ① 能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存并大量復(fù)制。coli DNA 連接酶 來源:大腸桿菌 作用:連接黏性末端 來源: T4 噬菌體 ② T4DNA 連接酶 作用:既能連接黏性末端,也能連接 平末端,但后者連接效率低 3. 基因的運(yùn)輸工具 ——載體 (1)作用 ①作為運(yùn)載工具,將目的基因送入宿主細(xì)胞中。 2. DNA 連接 酶 (1)作用實質(zhì):恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸 二酯鍵,使兩個 DNA 分子連接成一個 DNA。 ②平末端:平切,在兩條鏈的特定序列的中軸線處切割, 形成一個無黏性末端的平口。 ②專一性:只能識別 DNA 分子中特定的核苷酸序列,且 只能在每一條鏈中特定的部位進(jìn)行切 割。 考點 DNA 重組技術(shù)的基本工具 1. 限制性核酸內(nèi)切酶 (1)來源:多數(shù)來自原核生物。 軍隊和平民 (3)生物武器的危害:對 ____________造成大規(guī)模殺傷后 果。 3. 禁止生物武器 (1)生物武器的種類: 致病菌、病毒、生化毒劑及經(jīng)基因重 組的致病菌等。 (3)基因檢測 某些基因 1)基因身份證:記錄某個人 __________資訊的身份證。 (2)設(shè)計試管嬰兒 基因檢測 _________。 2. 生 物技術(shù)的倫理問題 (1)克隆人
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