選123分解纖維素的微生物的分離-文庫吧資料
2025-01-12 15:51本頁面
【正文】 即為分解纖維素的菌落） → 純化培養(yǎng) 。 (水溶性羧甲基 纖維素鈉 ) 涂布 到 鑒別 纖維素分解菌 的 培養(yǎng)基 上 (1)制備 鑒別培養(yǎng)基 : 碳源 碳源、氮源、生長因子 無機鹽 凝固劑 碳源、生長因子 涂布 到 鑒別 纖維素分解菌 的 培養(yǎng)基 上 CMC－ Na（ 纖維素鈉 )—— 主要碳源 。 按照 課題 1的稀釋操作方法，將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進行等比 稀釋 101～ 107倍。 (2)制備 選擇培養(yǎng)基 ： (能分解纖維素的微生物可以 大量繁殖 ) 為什么？ 微生物大量繁殖 在 選擇培養(yǎng) 的條件下，可以使那些能夠適應(yīng) 這種營養(yǎng)條件的微生物得到 迅速繁殖 ，而那些 不適應(yīng) 這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被 抑制 ，因此可以起到 “ 濃縮 ” 的作用。 液體培養(yǎng)基 選擇 培養(yǎng)基 對照實驗 ① 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 ② 碳源： 纖維素粉 → 葡萄糖 (3)操作： 將土樣加入裝有 30ml選擇培養(yǎng)基 的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定 溫度 下 震蕩培養(yǎng) 1～ 2天，直至培養(yǎng)液 變渾濁 。主要作用是提供氮源 和 生長因子 。 氨基酸種類齊全 。主要作用是補充 氮源 和提供 生長因子 ?？捎?牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 與之對照；或者將纖維素粉 改為 葡萄糖 。 C、你能否設(shè)計一個對照實驗 ，說明選擇培養(yǎng)基的作用。 土壤取樣： 選擇培養(yǎng) 增加纖維素分解菌的濃度 ，以確保能夠從樣品中分離所需要的微生物。 如果找不到合適的環(huán)境，可以將 濾紙 埋在土壤中，將濾紙埋在土壤中有 什么作用 ？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋在土壤中 多深 ？ 將 濾紙 埋在土壤中，能使纖維素分解菌相對集中，實際上是 人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境 。 (2)原因 : 二、實 驗 設(shè) 計 取樣的 環(huán)境 是怎樣的，作出這種選擇的 理由 是什么？ 纖維素分解菌大多分布在 富含纖維素 的環(huán)境中。 這兩種方法各有哪些 優(yōu)點 不 丌足 ？ NaCl溶液 作用 ： 漂洗作用 —— 洗去 與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅 ， 以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。 操作簡便， 不存在菌落混雜問題 產(chǎn)生模糊透明圈。 方法 1： 方法 2： 操作： 染色法 優(yōu)點 缺點 方法 1 (后置染色法 ） 方法 2 (前置染色法 ） 顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用 操作繁瑣。 在 倒平板 時就加入 剛果紅 。等培養(yǎng)基上 長出菌落 后，產(chǎn)生 纖維素酶的菌落 周圍將會出現(xiàn)明顯的 透明圈。 方法 1： 操作： 在 倒平板 時就加入 剛果紅 。 方法 1： 操作： NaCl溶液 作用 ： 漂洗作用 —— 洗去 與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅 ， 以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。 不同菌落的 透明圈大小不同可以說明什么問題？ （二）纖維素分解菌的 篩選 四種纖維素分解菌在剛果紅培養(yǎng)基上形成的透明圈 透明圈的應(yīng)用： 篩選 具有某種特定功能（如分泌某種酶） 的微生物（ 目的菌 ） . 在 長出菌落 的 培養(yǎng)基 上，覆蓋質(zhì)量濃度為 1mg/mL的 剛果紅 （簡稱 CR）溶液， 10～ 15min后，倒去CR溶液 ，加入物質(zhì)的量濃度為1mol/L的 NaCl溶液 ， 15min后倒掉 NaCl溶液，此時，產(chǎn)生 纖維素酶的菌落 周圍將出現(xiàn) 透明圈 。 剛果紅 能與 纖維素 形成
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