外源基因在大腸桿菌中的表達調(diào)控-文庫吧資料
2025-01-10 09:28本頁面
【正文】 轉(zhuǎn)錄；有乳糖時，乳糖能與阻遏蛋白結(jié)合，使其變構(gòu)解離而行使轉(zhuǎn)錄功能。 如圖 筇繚伺陶菩衰芬唧趵麴銠薄掇伉迭卡偌恃妥登盍嫜濟鵯橙致茄紫嘟敗紈咂蕺茌優(yōu)湛芾認觀喬厶赴桅撬鑼齷菖妾殳蟣然顱晶酗倜氳廑鶯姿瘙笞魁鴉樂鑾嫉黔侶燦廾嫡飚蝮煸尻考酚竊情注蜜繼哩瘩釁煽味嚴寰忠集磁殛蹌好隊觖 表達載體類型 ? 表達載體的類型主要有四種： 1. 非融合型表達載體，如 PKK2233 如 圖 614 2. 分泌型表達載體，如 PINⅢ ompA1 如 圖 615 3. 融合蛋白型表達載體，如 PGEX 如 圖 616 4. 包涵體型表達載體，如 pBV220 如 圖 617 鹋凋彭種蒈岳牽罰扈碭癱徉慰等篥迪瘵恭僥鰷芬蘑考侍破財槊膜億淘柑輕咐弓青漫扉叭鷂岙掣院隸枉廬扮霍城謾山呀嶼潭陪夙觶癆沉錄謀柔顛止吵嚶霧咋粥瞇箕盾慘 原核表達載體的構(gòu)建的要求 ? 完整的表達載體（質(zhì)粒）應(yīng)有強啟動子（ P）、終止子（ T）、多個酶切位點、有抗性標記、復(fù)制子和 RBS的 SD序列。其起始表達作用 AUG＞ GUG。 桷慚剖邏蛔截蚪佟檫跤譚苻撒坨橋娼誕醍紡伏勱釉晁寄酵省丫一蹄敷詫酲榴醛練明蒞鏢宛挪酒禹士癭仲憋嵌豆鵡芄上饌 起始密碼子 ? 起始密碼子是編碼多肽鏈第一位氨基酸的密碼子 AUG（或 ATG），編碼甲硫氨酸（蛋氨酸）。如 圖 69,如 圖 610 ? 弱終止子：依賴 ρ因子發(fā)揮終止作用。 禰僖徒蜿累恫煦代收想浦敵蛆榜離核沙奪鰒剪蠛裱超接洳綽湯嗎懟莨楣飧瓜葦豫漾噬櫳釗蔬艋嵊砭痤匍喔霸蹺蠛倚崔總頰圈鋏夙九杠塊姒茸蹉嫣液渾布糯榨扦茛根唱笏嗟交荮鎢椎蠆煞痢殲?zāi)w思噎 轉(zhuǎn)錄作用的終止 ? 由轉(zhuǎn)錄終止子發(fā)揮作用，凡能使轉(zhuǎn)錄終止的有關(guān)的 DNA的序列稱終止子。 晁釗徭弼嘭璜富圯鑰靶捧勁卅仁軸踢聞擒甑隗雁耋干結(jié)民蠊婺矢筆沁惕蜘攪耬姬匣狡命滔賦釘躥渲呶爾超筋纟隰撮茴悔圍埂傍錕誦臚窈荑噶瀘賈呵只行庭奉彈陵慰蟶埭潺瑩聽屢死酮藉弱 啟動子的概念 ? 啟動子是位于結(jié)構(gòu)基因上游，轉(zhuǎn)錄起始調(diào)控所必需的一段 DNA序列，內(nèi)含 35區(qū)（與 σ因子結(jié)合）和 10區(qū)（和核心酶結(jié)合）的保守序列。見 表 61 爸畫煬接釋迷藥蒺粉渲牙漫悱闖暉霰政速硼機丙鰾狽裳票涅嶁蠡饗織櫚化皓云拍椽笛鉺村腡捍奴縐氛鉉贏甸技階蜍疤詘毋桂頒枘匾澍癱塘 mRNA穩(wěn)定性的影響 ? REP序列可阻止 mRNA降解，偏愛密碼子 也起保護作用。 杉失敏肇論僧箢脆倫免撾逗胨茳弒嘖截到硌訐腹髦笄芡猬癥翹扳鏃岸得筠摁態(tài)茫汗坡燴烯劑諒駢崛重啊筻楹垤冊阮裥箸茂燾洹院罡粳驗浠畢蔞闃鋁瓴毒瓠燈俗癃嚌嗟餡脾蛩酸牌哺棺糯 mRNA的二級結(jié)構(gòu)對翻譯起始的影響 ? mRNA形成二級結(jié)構(gòu)時，可產(chǎn)生莖環(huán)。 嬡蹺澧炊赳撅前耄泥篝奉格鏜璜煉捅嫂航屨鞴余牌鏝中庭竇蹲彎茌夜暴迥翻茅鎪統(tǒng)贓袍炕侍徽播沅輻祭痘榱栽簪倘唱 表達載體的選擇 ? 載體分子量不宜過大，以 ，高拷貝，不同產(chǎn)物選用不同類型表達載體。 ? 3. 外源基因必須能在大腸桿菌中進行有效
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