[醫(yī)藥衛(wèi)生]霍亂弧菌實驗室檢驗技術-文庫吧資料
2024-10-24 23:11本頁面
【正文】 技能技能： 考核最低要求9cm平板劃線分離，至少要保障有 50個以上單個菌落為及格，但菌落過于密集仍為技能不良的表現(xiàn)。可疑菌落較多時，應挑選 5個以上的菌落逐個進行玻片凝集檢查，必要時，取原劃線菌落邊緣透明部分再做玻片凝集，均為陰性時方可報告未檢出 01群及 0139群霍亂弧菌。玻片凝集用血清的效價一般應為1∶ 40～ 1∶ 50。必要時進行 二次增菌 2021/11/10 疑似菌落初步鑒定： ?每個堿性瓊脂、 TCBS瓊脂平板上各挑取5個以上 (少于 5個的全部挑取 )疑似菌落接種于營養(yǎng)瓊脂平板 /營養(yǎng)瓊脂斜面或克氏雙糖置 37℃ 1824h純培養(yǎng) (即每份樣品至少從 2個分離平板上獲得約 10株可疑菌落菌株 )，取斜面純培養(yǎng)物進行血清鑒定、并涂片進行革蘭氏染色及氧化酶試驗等?；魜y弧菌在 TCBS上因分解蔗糖呈黃色菌落 ,此是 WHO推薦使用培養(yǎng)基。 2021/11/10 霍亂病原分離 培養(yǎng) ?直接分離培養(yǎng) 急性期病人水樣大便標本在增菌培養(yǎng)的同時可取其粘液絮片或用棉拭子直接接種在選擇性培養(yǎng)基上。 ? 整體或局部采集 ：在實驗室應以無菌操作將其解剖，取鰓部和腸內容物 25克剪碎后，置滅菌均質杯或均質袋中，加入 225mL倍體積的堿性蛋白胨水增菌；但小貝殼類動物，則用錘子將外殼擊碎，整體放入三角瓶中增菌；甲殼類動物除含肉質部分外，其余部分 (包括鰓、腸、足、表層外殼等 )整體放入三角瓶進行增菌處理。 2021/11/10 ? 食品及水產品樣本 ： ? 涂抹采集： 使用無菌棉簽涂抹 5只以上水水生動物表面、腮部及泄殖腔，直接接種到 20ml堿性蛋白胨水作為增菌液處理。再加入1%亞碲酸鉀 ～ ml和 1000單位 / ml青霉素1 ml。取450ml水樣，用 1M 氫氧化鈉調整至 pH ，ml。非疫情狀態(tài)下的監(jiān)測時間一般在清晨，此時水體未受人群活動等因素影響。標本與保存液比例約為 1∶ 5。帶菌者糞便都應接種堿性蛋白胨水培養(yǎng)基，放 37℃ 增菌6～ 8h后，從菌膜下表層取一接種環(huán)培養(yǎng)物，劃線接種于堿性瓊脂、 TCBS瓊脂培養(yǎng)基。 2021/11/10 三、霍亂弧菌常規(guī)檢驗 ?樣本采集、送檢和保存 ?霍亂的病原學檢查 ?病原分離技術要點 2021/11/10 樣本采集、送檢和保存 ? 糞便： 標本的采集以病人糞便為主，水樣便采取 1～ 3mL，成形便采取指甲大小的糞量，亦可用直腸棉拭或采便管由肛門插入直腸內 3～5cm處采取?？赡艽嬖诟鼜碗s的突變機制。 2021/11/10 總之， O139群霍亂弧菌和 O1群弧菌二者生物型既有區(qū)別又有聯(lián)系。 ?鑒別兩者 ， 必須通過 血清學診斷 來區(qū)分 。 印度出現(xiàn) 20例病人中有 17例發(fā)熱 、白細胞增多 。 O139群霍亂弧菌有莢膜而O1群霍亂弧菌無莢膜 。 通過對 O139群霍亂弧菌的LPS進行化學分析和血清學分析后發(fā)現(xiàn) O139群霍亂弧菌缺少 O1群霍亂弧菌 LPS中的特異性成分 。 表明本菌的抗原性與 O1群和其它非 O1群霍亂弧菌有明顯區(qū)別 。 通過研究證明 ， O139群霍亂弧菌可能是 O1群EItor 生物型的變異株 。乃定為 0139霍亂弧菌，并認定為真正的霍亂弧菌。 2021/11/10 – 非 01群霍亂弧菌：本群弧菌鞭毛抗原與 01群相同，而菌體（ 0）抗原則不同，不被 01群霍亂弧菌多價血清所凝集，依 O抗原之異，本群可分為 137個血清型。 – 01群霍亂弧菌：包括古典生物型霍亂弧菌（ vibrio cholerde）和埃爾托生物型（ vibrio cholerde ELTor biotype）。 H抗原為霍亂弧菌屬所共有； O抗原有群特異性和型
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