梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷張國(guó)強(qiáng)-文庫(kù)吧資料
2025-05-18 00:51本頁(yè)面
【正文】 覆以蓋玻片。 FTAABS－ 方法 ? a. 將血清標(biāo)本于 56℃ 滅活 30 min，備用； b. 吸收劑加入 5 mL無(wú)菌蒸餾水，用作血清的稀釋； c. 血清標(biāo)本和吸收劑按 1:5～ 1:20稀釋，混勻后置有蓋濕盒內(nèi)于 35～ 37℃ 孵育 30 min； d. 將系列稀釋的血清分別加到抗原片上（每孔不少于 30μL ），放入有蓋濕盒內(nèi)，置 35～ 37℃ 孵育 30 min； e. 用 ，用磁力攪拌器低速以 ，每 5 min更換 PBS液 1次，共 3次。 c. 熒光抗體，用熒光素標(biāo)記羊或鼠抗人免疫球蛋白。 b. 吸收劑（ 5 ml冷凍干燥品），由體外培養(yǎng)的 Reiter株螺旋體制備而成。在熒光顯微鏡下，螺旋體顯示蘋(píng)果綠色的熒光，即為陽(yáng)性反應(yīng)。 f. 按定量試驗(yàn)法加入 D液和 C液，將反應(yīng)板置微量板振蕩器上振蕩 30秒鐘，置濕盒內(nèi)， 15～ 25℃ 孵育 2小時(shí)觀察結(jié)果。 d. 自第 4孔～第 10孔各加 25 mL B液。 b. 試管內(nèi)加入 50 μL 血清標(biāo)本并充分混勻，置 15～25℃ 20 min 或更長(zhǎng)時(shí)間。 d. 有些血清標(biāo)本在血清低稀釋度時(shí)可出現(xiàn)前帶現(xiàn)象，此時(shí)可作定量試驗(yàn)； e. 如未致敏顆粒出現(xiàn)凝集反應(yīng)，應(yīng)將血清進(jìn)行吸收處理后再進(jìn)行試驗(yàn)，或改用其他試驗(yàn)方法。 c. 試劑盒不可置于 0℃ 以下，防止凍結(jié)。 TPPA結(jié)果 TPPA/TPHA試驗(yàn)－ 注意事項(xiàng) ? a. 微量反應(yīng)板要清潔干凈，孔內(nèi)無(wú)異物。定量試驗(yàn)則應(yīng)報(bào)告發(fā)生陽(yáng)性反應(yīng)的血清最高稀釋度，為血清滴度。 ? 感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)呈陽(yáng)性，則患者終身陽(yáng)性。 5轉(zhuǎn) /min 100177。 5次 /min 180177。 1滴 /mL 60177。 1滴 /mL 45177。 ? 旋轉(zhuǎn)速度、時(shí)間要準(zhǔn)確，結(jié)果觀察要及時(shí)。 ? 對(duì)于急性生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)，應(yīng)做TPPA/TPHA等試驗(yàn)進(jìn)行排除 ? 前帶現(xiàn)象 ? 指非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)中，有時(shí)血清中存在高濃度的抗體時(shí)出現(xiàn)的弱陽(yáng)性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上又象二期梅毒，此時(shí)將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)，出現(xiàn)了陽(yáng)性的結(jié)果，該現(xiàn)象稱為前帶現(xiàn)象 ? 耐血清性（血清固定） ? 指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不轉(zhuǎn)陰。 ? 唯 TRUST試驗(yàn)的抗原中加入甲苯胺紅顆粒代替活性炭顆粒指示物，使陽(yáng)性結(jié)果出現(xiàn)紅色絮狀現(xiàn)象，陰性結(jié)果見(jiàn)紅色顆粒集于中央或均勻分散。如遇到非梅毒血清，因體液中的白蛋白多于球蛋白，而白蛋白對(duì)膠體顆粒有保護(hù)作用，形成親水性薄膜，即使同樣搖動(dòng)、碰撞，由于抗原顆粒周圍沒(méi)有粘附免疫球蛋白的作用，不能形成較大顆粒，無(wú)肉眼可見(jiàn)的凝集和沉淀，因此為陰性反應(yīng)。當(dāng)抗原與抗體（反應(yīng)素）混合發(fā)生反應(yīng)時(shí)，后者即粘附膠體微粒的周圍，形成疏水性薄膜。反應(yīng)素與心磷脂形成抗原抗體反應(yīng)，卵磷脂可加強(qiáng)心磷脂的抗原性，膽固醇可增強(qiáng)抗原的敏感性。 ? 所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗原基本成分都是一樣 。 ? 未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。 ? 如未見(jiàn)到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性，取材部位不正確、螺旋體數(shù)量不足、患者已接受抗生素治療、損害接近自然消退和實(shí)驗(yàn)室工作人員缺乏經(jīng)驗(yàn)等均會(huì)影響結(jié)果的判斷。 病原學(xué)檢查－ 臨床意義 ? 病原學(xué)方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可確診梅毒，且具有快速、簡(jiǎn)便、直接的特點(diǎn)。臨床意義與暗視野顯微鏡檢測(cè)相同。 ? 梅毒螺旋體具有親銀性，鍍銀染色后顯微鏡下可見(jiàn)到染成棕色的梅毒螺旋體。用 1mL無(wú)菌注射器配 12號(hào)針頭，吸取無(wú)菌等滲鹽水 mL～ ，以無(wú)菌操作穿刺淋巴結(jié)并注入鹽水，再吸入注射器內(nèi)，反復(fù) 2～ 3次后，取少量淋巴液于載玻片上。用薄刮片或接種環(huán)刮取滲出液，直接置于載玻片上，或直接用載玻片沾取滲出液。 病原學(xué)檢查－ 試驗(yàn)方法 ? 病原學(xué)檢查的主要方法有暗視顯微鏡檢查、鍍銀染色法和直接熒光法。 確診病例：應(yīng)同時(shí)符合疑似病例的要求和 3中的任一項(xiàng)?；純簷z出 19S－IgM抗體。 血清抗體滴度持續(xù)上升。 胎傳梅毒（先天梅毒） 實(shí)驗(yàn)室檢查： 1 暗視野顯微鏡檢查：在早期胎傳梅毒兒的皮膚黏膜損害或胎盤(pán)中可查到梅毒螺旋體。 ? 診斷標(biāo)準(zhǔn) 疑似病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和 1項(xiàng)。 2 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽(yáng)性。 隱性梅毒（潛伏梅毒） 實(shí)驗(yàn)室檢查： 1 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：對(duì)于無(wú)既往梅毒史者，非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)陽(yáng)性（滴度一般在 1： 8以上）。 ? 診斷標(biāo)準(zhǔn) 疑似病例：流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)中的任一項(xiàng)和 1項(xiàng)。腦脊液 VDRL試驗(yàn)（存在假陰性）或 FTAABS試驗(yàn)（存在假陽(yáng)性）陽(yáng)性。 2 梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽(yáng)性。 確診病例：應(yīng)同時(shí)符合梅毒流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)和
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