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核酸的結構與功能(4)-文庫吧資料

2025-05-17 21:40本頁面
  

【正文】 H OH 1′ 2′ 3′ 4′ 5′ 核 糖 N N N N H NH2 H H 9 腺嘌呤 ddATP P P P | 八、核酸的生物學功能和實踐意義 核酸是基本遺傳物質,在蛋白質的生物合成上又占有重要位置,因而在個體的生長、生殖、遺傳、變異和轉化等一系列生命現象中起決定性作用。 Southern印跡法 :將電泳分離后的 DNA片段從凝膠轉移到硝酸纖維素膜上,再進行雜交。 原位雜交技術 :直接用探針與菌落或組織細胞中的核酸雜交,未改變核酸所在的位置。 影響復性速度的因素: ( 1)單鏈片段濃度 ( 2)單鏈片段的大小 ( 3)片段內重復序列的多少 ( 4)溶液離子強度的大小 ( 5)溶液溫度的高低 ( T – 25℃ ) (六)分子雜交 :在退火條件下,不同來源的 DNA互補區(qū)形成氫鍵,或 DNA單鏈和 RNA鏈的互補區(qū)形成 DNARNA雜合雙鏈的過程。 ( 4)變性劑如甲酰胺、尿素、甲醛等破壞氫鍵,妨礙堿基堆積,使 Tm下降。 70 75 80 85 90T /℃A /260nmTm Tm 影響 Tm的因素: ( 1) GC的相對含量 ( G+C) % =( Tm — ) ( 2)介質離子強度低, Tm低。 DNA變性是個突變過程,類似結晶的熔解。 0220 240 260 280 300波長 /nm光吸收(三)核酸結構的穩(wěn)定性 ; ; 。 (二)核酸的紫外吸收性質 核酸 的堿基具有共扼雙鍵,因而有紫外吸收性質,吸收峰在 260nm( 蛋白質 的紫外吸收峰在 280nm)。 DNA對堿穩(wěn)定。 , RNA為白色粉末,不溶于有機溶劑。 RNA在 DNA復制、轉錄、翻譯中均有一定的調控作用,與某些物質的運輸與定位有關。 大部分核酶參加 RNA的加工和成熟,也有催化 CN鍵的合成。 asRNA可通過互補序列與特定的 mRNA結合,抑制 mRNA的翻譯,還可抑制 DNA的復制和轉錄。 真核生物 mRNA的前體在核內合成,包括整個基因的內含子和外顯子的轉錄產物,形成分子大小極不均勻的 hnRNA。 (二) rRNA 占細胞 RNA總量的 80%,與蛋白質( 40%)共同組成核糖體。 tRNA分子量為 4S, 1965年 Holley 測定 AlatRNA一級結構,提出三葉草二級結構模型。 五、 RNA的結構與功能 ——RNA分子是含短的不完全的螺旋區(qū)的多核苷酸鏈。 ? 2021年,人類基因組計劃公布了人類基因組草圖,為基因組學研究揭開新的一頁。 ? 1995年,嗜血流感菌( Haemophilus influenzae, )測序完成,是第一個測定的自由生活物種。 ? 1980年,噬菌體 ΦX174。 ? 基因組學的主要工具和方法包括: 生物信息學,遺傳分析,基因表達測量和基因功能鑒定 ? 基因組學出現于 1980年代, 1990年代隨著幾個物種基因組計劃的啟動,基因組學取得長足發(fā)展。例如,對剛診斷為乳腺癌的女性,一個名為“ Oncotype DX‖的基因組測試,能用來評估病人乳腺癌復發(fā)的個體危險率以及化療效果,這有助于醫(yī)生獲得更多的治療信息并進行個性化醫(yī)療。該學科提供基因組信息以及相關數據系統(tǒng)利用,試圖解決生物,醫(yī)學,和工業(yè)領域的重大問題。 例外 :組蛋白基因 (histongene)和干擾素基因 (interferon gene)沒有內含子。 A B C D E G 7 700bp F 外顯子( exons):為多肽編碼的基因片段。 中度重復序列 :在 DNA中可重復幾十次到幾千次。 。 結構基因 調節(jié)基因 基因組 (一) DNA與基因 (二)原核生物基因組的特點 1. DNA大部分為結構基因,每個基因出現頻率低。 染色體包裝 染色體包裝的結構模型 多級螺旋模型 壓縮倍數 7 6 40 5 ( 8400) DNA → 核小體 → 螺線管 → 超螺線管 → 染色單體 2nm 10nm 30(10)nm 400nm 2~10μm 一級包裝 二級包裝 三級包裝 四級包裝 四、 DNA與基因組及基因組學 DNA Transcription RNA ( mRNA、 tRNA、 rRNA) Translation Protein 基因 基因 是 DNA片段的核苷酸序列, DNA分子中最小的功能單位。 (三) DNA的三級結構 雙螺旋 DNA進一步扭曲盤繞則形成其三級結構 ,
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