【正文】 取條件，平行 試驗(yàn) 三次， 將 仙鶴草中的總黃酮 的平均 提取 率 與 所得結(jié)果進(jìn)行比較。 正交實(shí)驗(yàn) 在單因素基礎(chǔ)上， 設(shè)計(jì) 正交實(shí)驗(yàn)，并 對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。 溶液酸堿性對(duì) 對(duì)仙鶴草總 黃酮 提取 率 的影響 分別加入 pH 為 、 、 、 、 的 HAcNaAc 緩沖溶液，在 、 選出的適宜纖維素 酶解溫度、酶解時(shí)間下 ，按 的 方法操作，得提取液，按 操作方法顯色后，測(cè)定吸光度的值，平行實(shí)驗(yàn)三次，并求出黃酮提取率。 單因素實(shí)驗(yàn) 酶解溫度對(duì) 仙鶴草 總 黃酮 提取率 的影響 加入 纖維素酶使其濃度為 ，分別 在 40℃ 、 45℃ 、 50℃ 、 55℃ 、 60℃ 下 酶解 ，按 的 方法操作 ，得提取液， 按 操作方法顯色后，測(cè)定出試液的吸光度， 平行實(shí)驗(yàn)三次，根據(jù)回歸 方程， 計(jì)算總黃酮提取率 。 提取液中總黃酮含量的測(cè)定 量取提取液 ，定容于 50mL 容量瓶中，按 操作方法顯色后，在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定出試液的吸光度，根據(jù)回歸方程，測(cè)定出提取液中總黃酮的含量，并計(jì)算出仙鶴草中總黃酮的提取率。以試劑空白作參比，在 440～ 560nm 之間測(cè)定絡(luò)合物吸光度，確定最大吸收峰波長(zhǎng)（此后的吸光度均在此最大波長(zhǎng)下測(cè)定）。 測(cè)定方法依據(jù) 以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液為對(duì)照品測(cè)定 仙鶴草 提取液 中 總 黃酮的 提取率 ，加入亞硝酸鈉溶液、硝酸鋁溶液、氫氧化鈉溶液，在堿性條件下使黃酮與鋁鹽形 成 有色 絡(luò)合物，在可見(jiàn)光區(qū)獲得穩(wěn)定的特征吸收峰。如果溶液顏色顯橙紅色，則說(shuō)明提取液中含有黃酮。如果溶液顏色顯黃色 ，則說(shuō)明提取液中含有黃酮。如果溶液顏色顯楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 3 墨綠色，則說(shuō)明提取液中含有黃酮。如果溶液顏色顯橙黃色，則說(shuō)明提取液中含有黃酮。如果溶液顏色顯亮黃色，則說(shuō)明提取液中含有黃酮。如果溶液顏色顯黃色，則說(shuō)明提取液中含有黃酮。 黃酮的提取 稱取 仙鶴草 粉 ， 置于 150ml的錐形瓶中 ， 加入 一定 pH 值的 HAcNaAc 緩沖溶液，加入一定用量的纖維素酶，搖勻 并蓋上錐形瓶塞 后置于一定溫度下酶解 ， 一段時(shí)間后加入 70%乙醇， 在 50℃ 下恒溫浸提 2h 后 ，過(guò)濾、洗滌，合并濾液， 定容 于 50mL 容量瓶中，得 提取 液。 儀器 722 型光柵分光光度計(jì)（山東高密分析儀器廠） ； HHS2S 恒溫水浴鍋（金壇市大地自動(dòng)化儀器廠） ； CP214C 電子天平（奧豪斯 儀器有限公司制造） ； 搖擺式植物粉碎機(jī)。 楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 2 1 實(shí)驗(yàn)部分 原料、儀器和試劑 原料 仙鶴草 （采自 云南大姚 ）。 據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，方桂珍 [7]、陳優(yōu)生 [8]等人采用醇提法提取過(guò)仙鶴草中的黃酮 類化合物 ，蔣志華 [9]等 采用 超聲波法提取過(guò)仙鶴草中的黃酮 類化合物 ，朱立俏、盛華剛 [10]采用 大孔樹(shù)脂法提取過(guò)仙鶴草中 的黃酮類化合物 ，但是尚未有人采用過(guò) 酶解 醇提 法提取 過(guò) 仙鶴草中 的 總黃酮。另外，仙鶴草中黃酮類成分蘆丁、槲皮素、 山奈酚等具有顯著的抑制乙酰膽堿酯酶、抗炎活性。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，仙鶴草具有明顯的抗腫瘤作用 ， 同時(shí)可以增強(qiáng)免疫功能 [3]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，從植物中提取黃酮類化合物的方法主要有醇提法、堿提法、超聲波振蕩提取法等方法 [2]。 Fxtraction 楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 1 纖維素酶輔助提取仙鶴草中總黃酮的研究 前言 黃酮類化合物 (flavonoids) 又稱黃酮體、黃堿素 ， 是一類具有 2苯基色原酮 (2 Ophenyl Ochromone) 結(jié)構(gòu)、以游離態(tài)或 以 糖苷形式存在的化合物。 Cranes。 在此條件下 ，仙鶴草 中 總 黃酮 提取率 可 達(dá) %。 楚 雄 師 范 學(xué) 院 本 科 生 畢 業(yè) 論 文 題 目： 纖維素酶輔助提取仙鶴草中總黃酮的研究 專 業(yè)： 化學(xué) 姓 名： 劉婭萍 學(xué) 號(hào)： 20202051242 指導(dǎo)教師： 宋建梅 職 稱： 副教授 論文字?jǐn)?shù)： 6653 字 完成日期： 2020 年 5 月 教 務(wù) 處 印 制楚雄師范學(xué)院本科論文（設(shè)計(jì)） 目錄 摘要 ..................................................................................................................................I 關(guān)鍵詞 ..............................................................................................................................I Abstract.......................................................................................................................... II Keywords ....................................................................................................................... II 前言 ................................................................................................................................. 1 1 實(shí)驗(yàn)部分 ...................................................................................................................... 2 原料、儀器和試劑 ...................................................................................................... 2 原料 ......................................................................................................................... 2 試劑 ......................................................................................................................... 2 儀器 ....................................