【正文】 /kｇ，是 2020 年價格的 倍， 上漲速度最快的是 20202020 年增長率達 28％。 因 此，針對三葉青馴化栽培技術(shù)研究、標(biāo)準(zhǔn)化栽培技術(shù)制定和推廣，開展三葉青有效成分的分析、三葉青種源收集、優(yōu)良種質(zhì)篩選及高效栽培研究是非常必要的?？傊?，對三葉青的化學(xué)成分、藥理作用的研究已經(jīng)很多，未來對三葉青的研究發(fā)展趨勢主要是對其塊根形態(tài)發(fā)育以及三葉青的種質(zhì)篩選及高效生態(tài)技術(shù)等方面進行研究。二十世紀(jì) 80年代以來廣大科學(xué)工作者一直從事三葉青塊根（三葉青）的化學(xué)成分、藥理以及生藥鑒定等方面的研究。由于三葉青具有很高的藥用和觀賞價值，藥材市場三葉青需求量很大，而 人工繁殖又很少，人們開始大量采集野生三葉青，導(dǎo)致野生三葉青資源銳減。臨床上令人振奮的是 魏克民等用三葉青、黃芪、人參皂苷配制而成的金芪片治療惡性腫瘤 120 例，完全緩解 52 例，部分緩解 42 例、穩(wěn)定 18 例、進展 8 例，緩解及部分緩解共 94 例， 總有效率 78． 33％； 姜初明和龔黎燕采 用清熱解毒為主，健脾行氣活血為輔的中肝合劑，含三葉青配合西藥治療Ⅲ期原發(fā)性肝癌，提高了Ⅲ期原發(fā)性肝癌患者生活質(zhì)量，延長了其生存時間。據(jù) 1998年報道三葉青的乙酸乙酯溶部分主要成分為 6’ 0－苯甲?；}卜甙 (6’ － O－ benzoyldau－costerol) 具有一定的腫瘤抑制和抗病毒作用；丁鋼強等 2020 年研究發(fā)現(xiàn)，三葉青提取物中乙酸乙酯溶部分對人肝癌細胞HepG2 活性具有較強的抑制作用正丁醇部分也有一定的作用，有力支持和驗證了以上研究結(jié)果。楊雄志采用小鼠尾靜脈注射 BCG 和 LPS 方法成功造出免疫性肝損傷模型，該模型小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶和 LDH (乳酸 脫氫酶 )顯著升高，肝勻漿 MDA 的含量也顯著升高，但 SOD 水平明顯降低；對照病理模型組，楊雄志發(fā)現(xiàn)不同劑量的三葉青提取液給藥組小鼠血清 AST ALTLDH 的水平降低 肝損傷不同程度減輕，研究結(jié)果表明，三葉青提取液對 BCG 和 LPS誘導(dǎo)的小鼠免疫性肝損傷具有良好的防護作用。伍昭龍等同時開展了三葉青水煎液對 CCl4 致大鼠急性肝損傷的保護作用研究，研究結(jié)果表明，該中藥 除能降低肝損傷大鼠血清 ALT、 AST 及 MDA 水平外，還能降低 ALP (堿性磷酸酶 ) 水平； 而 SOD水平明顯升高。此外，對探討藥用觀賞植物的人工馴化栽培、盆栽培養(yǎng)和快速繁殖均有一定的創(chuàng)新價值，故研究三葉青的生態(tài)栽培和 快速繁殖等方面技術(shù)研究有重大的經(jīng)濟和科研價值。 本項目的研究旨在為擴大野生三葉青的資源，加速三葉青栽培和開發(fā)提供新技術(shù)；本研究還為開展該物種遺傳育種和保護 生物學(xué)等方面的研究提供了良好的試驗基礎(chǔ)，具有廣泛的應(yīng)用前景；利用快繁技術(shù)繁殖三葉青，可以 提高土地利用率開辟了新的途經(jīng)，對農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整和貧困山區(qū)的經(jīng)濟發(fā)展 具 有重要的現(xiàn)實意義和長遠的歷史意義 ；還可以保持自然界生物多樣性向人們提供豐富的三葉青種質(zhì)資源，解決三葉青藥材來源匱乏的問題，滿足人民用藥需要，可實現(xiàn)可持續(xù)性發(fā)展。三葉青的群落結(jié)構(gòu)復(fù)雜，伴生植物豐富，近年來野生資源遭受人為破壞十分嚴重，在我省的分布地已經(jīng)很狹窄，資源蘊藏急劇減少，據(jù)統(tǒng)計其藥材總蘊藏量僅有約 ，已遠遠不能滿足市場需求，價格居高不下，近幾年上漲幅度大，且有進一步攀升之趨勢。三葉青主要生長在蔭蔽度較高的山谷、灌叢林間等腐殖質(zhì)較高的地方，在陽光直射的地方偶有生長，但生長不良，其生長環(huán)境要求相對嚴格。 長期 以來三葉青藥材一直依賴野生資源，資源的利用方式是非再生性采挖，一方面導(dǎo)致野生三葉青資源蘊藏量急劇下降，許多傳統(tǒng)產(chǎn)區(qū)無藥可采，如不及時收集和保存，有可能導(dǎo)致滅絕；另一方面不同的產(chǎn)地野生藥材有效成分存在顯著的差異，嚴重影 響三葉青的質(zhì)量。在長江以南地區(qū)，即使在室外越冬，也可完全不用任何防寒措施，室內(nèi)盆栽則可在江北地區(qū)廣泛應(yīng)用。作為盆栽，可做成普通掛盆或中小盆在室內(nèi)擺放，也可培育成特大盆供賓館、辦公大廳裝飾，長期擺放。 另外，三 葉青可塑性強，三葉青是四季常綠的藤本植物，葉片細小、繁密、光亮，可根據(jù)環(huán)境和觀賞要求進行多樣化栽培和造型。以清熱解毒為主、健脾行氣活血為輔的中肝合劑（含三葉青），配合西藥治療Ⅲ期原發(fā)性肝癌，可提高患者生活質(zhì)量，延長生存期。用三葉青研制出的一種創(chuàng)新中藥，有抑制和清除乙肝病毒，調(diào)整機體免疫、保護肝細胞、阻斷肝纖維化等作用。以三葉青為主要成分的金絲地甲膠囊，可明顯抑制 LEWIS肺腫瘤細胞、 SMMC7721肝腫瘤細胞、 HT60人淋巴母細胞性白血病細胞、 SCG7901 胃腫瘤細胞及 HCT116結(jié)腸腫瘤細胞生 長。劉東（ 1999）從其地上部分的石油醚萃取物中分離到 4 個化合物：蒲公英萜酮、蒲公英萜醇、β 谷甾醇和麥角甾醇。毛一亮（ 2020）分離到 4個化合物，鑒定為：β 谷甾 醇、山柰酚、槲皮素和山柰酚 3O新橙皮糖苷。霍昕（ 2020）在三葉青塊根乙醚提取物中共分離出 21 個化合物，檢測出 18 個組分，其中含量較高的是亞油酸、棕櫚酸、油酸、二苯胺、 亞麻酸甲酯和硬脂酸。三葉青為葡萄科崖爬藤屬植物，其塊 根稱為蛇附子，又稱三葉扁藤、金絲吊葫蘆等，以塊根或全草入藥，為民間常用的中草藥，具有抗病毒、抗炎、鎮(zhèn)痛與解熱、保肝等作用，且毒副作用小、是西藥無法代替的“植物抗生素”，臨床上已廣泛用于抗癌、抗腫瘤及抗艾滋病毒等疾病。研究藥用瀕危植物的栽培技術(shù)能正確處理自然資源利用 和經(jīng)濟發(fā)展之間的關(guān)系 ，是實現(xiàn)可持續(xù)性發(fā)展的重要途徑。 我省 明確提出了建設(shè) “ 綠色浙江 ” 的戰(zhàn)略目標(biāo)， 這是 全面推進我省現(xiàn)代化建 設(shè)和經(jīng)濟、社會、環(huán)境可持續(xù)發(fā)展的戰(zhàn)略選擇。而研究野生植物的馴化和生態(tài)栽培技術(shù)是維護生物多樣性、維持生態(tài)環(huán)境平衡、 挽救瀕于滅絕的植物 、保存野生植物種質(zhì)資源與開發(fā)利用的根本保證。 九、項目負責(zé)人與主要參加人員簡歷 一、項目概況，國內(nèi)外同類研究情況 （一）項目研究的背景及意義 項目研究的重要性 從新世紀(jì)開始，我國進入了全面建設(shè)小康社會加 快推進社會主義現(xiàn)代化建設(shè)的新的發(fā)展階段。 通過本項目建設(shè)，以公司為龍頭，聯(lián)結(jié)廣大農(nóng)戶，通過“公司 +基地 +農(nóng)戶”的模式發(fā)展優(yōu)質(zhì)三葉青產(chǎn)業(yè)，全面利用高新技術(shù)和新品種與人工栽培生產(chǎn)新工藝等，勞動生產(chǎn)效率和資源的有效利用明顯提高，從而進一步提高三葉青產(chǎn)品的附價值。 4．開發(fā)一批適宜賞藥兼用的三葉青生態(tài)栽培產(chǎn)品，滿足市場需要。 2．確定三葉青有效成分總黃酮提取工藝并建立快速檢測技術(shù)。 采用生態(tài)栽培技術(shù)：不使用化學(xué)合成的肥料、農(nóng)藥、生長調(diào)節(jié)劑、添加劑、色素等，也不采用基因工程和離子輻射技術(shù)，而是遵循三葉青的自然生長規(guī)律，培肥、除草、防治病蟲害、采收和初加工，形成三 葉青藥材及其產(chǎn)物安全生產(chǎn)體系。 能周年生產(chǎn)三葉青，向人們提供豐富的三葉青藥材，滿足人民用藥需要，同時也為花卉市場提供插花材料和觀葉的盆花，豐富花卉市場的種類。 二、主要技術(shù)指標(biāo) 掌握和控制三葉青快速繁殖影響因子技術(shù)。經(jīng)過篩選的種質(zhì)進行組織培養(yǎng)擴繁，培育優(yōu)質(zhì)種苗。 2．三葉青種質(zhì)資源收集及組織培 養(yǎng)技術(shù) 在我市范圍內(nèi)開展三葉青種質(zhì)資源的調(diào)査工作，摸清三葉青種質(zhì)資源的分布情況及產(chǎn)業(yè)發(fā)展概況。 一、主要研究內(nèi)容 1．三葉青生態(tài)栽培技術(shù)研究與示范推廣 研究三葉青引種馴化栽培、種源繁殖、肥料使用、病蟲害防治、采收與加工等標(biāo)準(zhǔn)化栽培技術(shù)規(guī)程。同時由于環(huán)境的改變及毫無節(jié)制地狂采濫挖，只挖不種，加上三葉青對生長環(huán)境要求苛刻，致使原本就稀有的野生三葉青日漸稀少，瀕臨滅絕，根本不能滿足醫(yī)藥市場需求，更顯現(xiàn)它不可多得的珍貴。 余杭區(qū) 2020年度農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新項目 項目名稱： 野生三葉青馴化栽培、種質(zhì)篩選及開發(fā)利用 承擔(dān)單位： 杭州鴻越生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司 合作單位： 杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 、浙江大學(xué) 申報日期： 2020年 7月 13日 目 錄 一、 項目 申請表 二、 項目可行性研