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線蟲的分類鑒定(參考版)

2024-08-26 20:40本頁面
  

【正文】 在上述系統(tǒng)中,植物寄生線蟲或植物根際線蟲主要是 墊刃亞目、滑刃亞目、長針科和毛刺科線蟲 ,其他亞目或科中的線蟲,只有極少數(shù)與植物有關,而大多數(shù)是自由生活線蟲或昆蟲寄生線蟲,所以,目前植物線蟲總的可以概括為這 4大類。 36 三、 植物線蟲的分類地位和分類系統(tǒng)概述 線蟲是一類兩側對稱原體腔無脊椎動物,其歸屬于動物界中的一個門 — 線蟲門,根據(jù)側尾腺的有無劃分為 2個綱: 側尾腺綱 和 無側尾腺綱 。作為檢測工具用的已知 RNA或 DNA序列片段稱為雜交探針 (probe)。這時加入異源的 DNA或 RNA(單鏈 )并在一定離子強度和溫度下保溫(復性 ),若異源 DNA或 RNA之間的某些區(qū)域有互補的堿基序列,則在復性時可形成雜交的核酸分子。 ? 它是利用核酸分子的堿基互補原則而發(fā)展起來的。 31 植物線蟲的其他鑒定方法 RAPDPCR鑒定根結線蟲 32 應用實例 33 ( 5) SSRPCR技術 ? 由于真核生物中富含 CA重復序列, SSR- PCR就是針對高度密集的 CA微衛(wèi)星體簡單重復序列,設計與之互補的重復 CA堿基作引物擴增其重復片段,從而揭示其多態(tài)性。 23 PCR電泳圖 24 應用實例: 25 rDNAITS鑒定根結線蟲 ( 2) rDNAITS鑒定根結線蟲 26 rDNAITS 測序后同源性聚類分析的系統(tǒng)進化樹 27 ( 3) PCRRFLP方法 ? 聚合酶鏈式反應 限制性片段長度多態(tài)性( PCRRFLP)法的原理是:采用聚合酶鏈式反應( PCR)擴增目的 DNA片段,然后將待檢測的DNA片段用限制性內切酶酶切,限制性內切酶識別并切割特異的序列,然后將酶切后的產物進行電泳,再由限制酶圖譜分析此段序列的特異切位點,由片段的多樣性來比對不同來源基因序列的差異性。 ⑥ 觀察瓊脂糖凝膠中 DNA最常用的方法是利用熒光染料溴化乙錠進行染色,它含有一個可以嵌入 DNA堆積堿基之間的一個三環(huán)平面基團。 ④ 重復循環(huán)變性 退火 延伸三過程, 2~ 3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。 20 ( 1)多聚酶鏈式反應( PCR) ? PCR技術基本原理:類似于 DNA的天然復制過程, 其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。 16 植物線蟲的其他鑒定方法 ?( 雌蟲的同功酶圖譜) 17 植物線蟲的其他鑒定方法 ? 方法: 鑒別寄主反應: 煙草、棉花、辣椒、 西瓜、
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