實(shí)驗(yàn)三離子和藥物對(duì)離體蟾蜍心臟活動(dòng)的影響doc(參考版)
2025-07-21 02:03本頁(yè)面
【正文】 [思考題]1．，用其灌流離體蛙心為何引起蛙心收縮減弱？2．觀察強(qiáng)心甙作用時(shí)，心臟營(yíng)養(yǎng)液為何換低鈣任氏液？根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，強(qiáng)心甙過量中毒時(shí)表現(xiàn)的心律失常是什么？臨床上使用什么藥物治療？（吳惜貞 王勇）。（3）每加入一種藥物前均應(yīng)記錄一段任氏液灌流的心跳曲線，做到各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)均有前后對(duì)照。[注意事項(xiàng)]（1）在剪開左側(cè)主動(dòng)脈之前，應(yīng)先用蛙心插管的細(xì)端尖置動(dòng)脈球處與動(dòng)脈平行選擇適宜的切口處，這樣可避免剪口過高或過低。（2）當(dāng)心收縮力明顯減弱時(shí)，104毒毛花甙 ，觀察記錄心跳曲線。⑵加入1—2滴阿托品2—3分鐘后加入乙酰膽堿1~2滴，記錄心跳曲線幅度、心率及心跳節(jié)律，出現(xiàn)效應(yīng)后用任氏液洗滌幾次，至曲線基本恢復(fù)。⑶加入1—2滴普萘洛爾2—3分鐘后，加入去甲腎上腺素1~2滴, 記錄心跳曲線幅度、心率及心跳節(jié)律，出現(xiàn)效應(yīng)后用任氏液洗滌幾次，至曲線基本恢復(fù)。2．觀察擬腎上腺素藥的作用及α和β受體作用分析⑴加入1—2滴去甲腎上腺素 記錄心跳曲線幅度、心率及心跳節(jié)律，出現(xiàn)效應(yīng)后用任氏液洗滌幾次，至曲線基本恢復(fù)。⑵加入1—、心率及心跳節(jié)律，出現(xiàn)效應(yīng)后用任氏液洗滌幾次，至曲線基本恢復(fù)。[觀察項(xiàng)目]１．觀察細(xì)胞外液離子濃度對(duì)蛙心收縮的影響⑴吸出插管內(nèi)任氏液。圖52 蛙心灌流裝置二、接實(shí)驗(yàn)裝置１． 將蛙心插管固定于鐵支柱，用蛙心夾夾住心室尖端并連接于機(jī)械換能器的懸臂。蛙心套管 蛙心 接BL410 張力換能器 ２．在主動(dòng)脈干下面穿一條線，打一松結(jié)備用，在穿線上方，左主動(dòng)脈根部前壁剪一小斜口，將盛有少量任氏液的蛙心插管從斜口插入主動(dòng)脈，并沿主動(dòng)脈向右下方插入動(dòng)脈球，然后改向左后方插入心室，當(dāng)插管已進(jìn)入心室時(shí)，可見插管內(nèi)液面隨心搏上下移動(dòng)，即用滴管吸去插管內(nèi)血液，并用任氏液洗滌，然后扎緊松結(jié)，將主動(dòng)脈扎緊并固定于插管上。[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物] 蟾蜍或蛙[實(shí)驗(yàn)器材和藥品] BL—410機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，25克機(jī)械—電換能器，鐵支柱，試管夾，蛙類手術(shù)器械，蛙板，蛙心夾，蛙心插管，滴管，小燒杯，任氏液，%NaCl，2%CaCl，1%KCl，%乙酰膽堿，%去甲腎上腺素，1mg/ml酚妥拉明，1mg/ml普萘洛爾，1mg/ml阿托品，毒毛花甙K 104，1%CaCl，低鈣任氏液（即3份缺鈣任氏液和一份含鈣任氏液的混合液）。動(dòng)物的離體心臟，用理化特性類似于血漿的代體液灌流時(shí)，仍能保持相當(dāng)長(zhǎng)時(shí)間的節(jié)律性舒縮活動(dòng)，改變灌流液的理化特性，心臟的節(jié)律性舒縮活動(dòng)也隨之改變，外源性給予去甲腎上腺素或乙酰膽堿可產(chǎn)生類似心交感神經(jīng)或迷走神經(jīng)興奮時(shí)對(duì)心臟的作用，同時(shí)，避開神經(jīng)遞質(zhì)的影響，也可以觀察強(qiáng)心甙類藥物對(duì)心肌細(xì)胞的直接作用。2． 氯化鋇誘發(fā)的家兔心律失常模型一般可持續(xù)15 min 以上。[結(jié)果整理] 剪輯打印并粘貼有代表性的心電圖段落，標(biāo)好給藥情況及心律失常持續(xù)時(shí)間，初步評(píng)價(jià)利多卡因?qū)β然^所致心律失常的對(duì)抗作用。也可將另一只家兔作為對(duì)照。2．當(dāng)出現(xiàn)心律失常時(shí)立即緩慢靜注利多卡因5 mg / kg ( 0．5 %1 ml / kg )，做好給藥標(biāo)記，筆錄給藥時(shí)間。1．靜脈注射氯化鋇4 mg / kg（0．41 ml / kg ），做好給藥標(biāo)記，記錄心律變化，注意是否出現(xiàn)早搏或室性心動(dòng)過速。仰位固定于手術(shù)臺(tái)上，將全導(dǎo)聯(lián)心電電纜插頭插入計(jì)算機(jī)主機(jī)的相應(yīng)插座，其針形電極分別插入兔四肢前側(cè)皮下：右前肢紅色，左前肢黃色，左后肢綠色，右后肢蘭色。3 % 戊巴比妥鈉、0．4 % 氯化鋇、0．5 %利多可因、生理鹽水。利多卡因能輕度抑制Na+ 內(nèi)流并促進(jìn)K+ 外流，故對(duì)氯化鋇所致心律失常模型有治療作用。表512 機(jī)率單位表反應(yīng)率01234567890—102030405060708090表513 0%或100%反應(yīng)率的機(jī)率單位近似值組內(nèi)動(dòng)物數(shù)n機(jī)率單位值0%100%45678910121518202425304050[思考題] 設(shè)有同類藥A和B，其治療效應(yīng)和致死效應(yīng)的量效曲線相互平行且首尾無(wú)重疊，已知A藥的LD50為50mg/kg；ED50為5mg/kg；B藥LD50為40mg/kg，ED50為2mg/kg，問哪藥安全性大？ （吳惜貞）實(shí)驗(yàn)四 兔心律失常及利多卡因的抗心律失常作用[目的和原理] 以心電圖變化為指標(biāo)，觀察利多卡因?qū)β然^誘發(fā)兔心律失常的治療作用。利用Excel函數(shù)fx菜單下統(tǒng)計(jì)correl或BL—410系統(tǒng)，數(shù)據(jù)處理菜單下的直線回歸計(jì)算。已知以對(duì)數(shù)劑量為橫坐標(biāo)，死亡率為縱坐標(biāo)，可以繪制出S型量效曲線，那么，如果縱坐標(biāo)死亡率換成機(jī)率單位，量效曲線就變成直線了。查機(jī)率單位表：從實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到的死亡數(shù)算出死亡率（%），根據(jù)死亡率查表，得到每個(gè)劑量組的機(jī)率單位填入表1。給藥：按下表給5只小白鼠分別注射5個(gè)不同劑量的普魯卡因。[實(shí)驗(yàn)方法]取小白鼠60只，隨機(jī)分為12組，每組5只（由教師指導(dǎo)完成）。LD50是指引起半數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡的藥物劑量，其數(shù)值越小，毒性越大；ED50是指引起半數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生陽(yáng)性效應(yīng)的藥物劑量，其數(shù)值越小，效應(yīng)越強(qiáng)，通常將LD50與ED50的比值（LD50/ED50）稱為治療指數(shù)（therapeutic index，TI），用以表示藥物的安全性，TI大的藥物相對(duì)較TI小的藥物安全，但并不完全可靠，尤其在兩藥的有效劑量和致死劑量?jī)蓷l量效曲線之間有重疊時(shí)更不可靠，因此，還應(yīng)看1%致死量（LD1）與99%有效量（ED99）的比值或5%致死量（LD5）與95%有效量（ED95）之間的距離來(lái)衡量藥物的安全性。（3）以Ach logD為橫坐標(biāo)，以 %為縱坐標(biāo)，繪制給Atropine（Atr）前后兩條Ach量效曲線。 =（相應(yīng)的 ） 247。 求pA2公式：pA2=pAx+log（x－1）式中：pAx為浴槽中拮抗劑Atropine克分子濃度的負(fù)對(duì)數(shù)，本實(shí)驗(yàn)用106 Atropine ，等于稀釋了100倍，因此浴槽中Atropine濃度為108M ，因此，pAx=8x= KD＇/KD KD為給Atropine前的KDKD＇為給Atropine后的KD利用BL—410系統(tǒng)，可以很快算出pA2作圖 本實(shí)驗(yàn)量效曲線作圖縱坐標(biāo)采用 %， 是預(yù)期達(dá)到的、希望達(dá)到的效應(yīng)，其與實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)有一定的距離，但繪制出來(lái)的量效曲線能較好地反映各劑量濃度的效應(yīng)，提供較準(zhǔn)確的KD；實(shí)測(cè)的效應(yīng)因受到很多因素的影響（如實(shí)驗(yàn)技術(shù)、條件等），不能很好地反映各藥濃度的預(yù)期效應(yīng)，因此采用 %作圖。求KD、Emax和pD2值 為了正確求得各參數(shù)，必須將量效曲線直線化，再利用直線回歸計(jì)算法計(jì)算。（2） 腸肌溫浴完畢，再以同法制作在阻斷劑存在下的Ach量效曲線，具體操作同上，實(shí)驗(yàn)結(jié)束，按停止鍵。（2） 用臺(tái)氏液沖洗腸肌三次（10分鐘內(nèi)完成）至腸收縮曲線基本恢復(fù)。表59 Ach的給藥劑量給藥順序藥液的克分子濃度（M）藥液的毫升數(shù)（ml）累積劑量（uM）DLog D14107（109M）－9
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