xl測序簡介ppt課件(參考版)
2025-05-15 13:46本頁面
【正文】 l i g a t i o n i n t oλ T r i p I e x 2 a r m sTM51S M A R T M e t h o dGGGP o l y A + R N AP o l y A M o d i f i e d o l i g o ( d T )P r i m e rF i r s t s t r a n d s y n t h e s i sc o u p l e d w i t h ( d C )t a i l i n g b y R TGGGp o l y AT e m p l a t e s w i t c h i n ga n d e x t e n s i o n b y R TG G GCCCp o l y AA m p l i f y c D N A b y L D P C RH i g h q u a l i t y d s c D N Ac D N A l i b r a r yc o n s t r u c t i o n V i r t u a lN o r t h e r n b o l t s5131C D N A l i b r a r yI n T r i p I E x 2λ5151CCCThank you ! 。 ?EST可以作為構(gòu)建分子標(biāo)記連鎖圖譜所用的探針 普通cDNA文庫構(gòu)建基本流程 雙鏈 cDNA末端的磷酸化及酶切 提取 total RNA 分離 mRNA 合成一鏈 cDNA 合成二鏈 cDNA 雙鏈 cDNA末端補(bǔ)平 加接頭 膠回收 cDNA 連接 電轉(zhuǎn)化 鑒定庫容及插入子大小 文庫送檢 1d 1d 1d 1d 2d 4d 建立 cDNA文庫的特殊方法 1. Okayama–Berg法 2. Okayama–Berg改進(jìn)法 3. SMART(Switch Mechanism At the 5’ end of RNA Templates)方法 4．聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法（ PCR法） ? SMART技術(shù)： ? Switch Mechanism At the 5’end of RNA Templates ? 模板跳轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移機(jī)制 ? 利用逆轉(zhuǎn)錄酶的末端轉(zhuǎn)移酶活性，經(jīng)巧妙設(shè)計(jì)而成為有力武器。如 YAC(酵母人工染色體）， BAC(細(xì)菌人工染色體）， PAC(
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