疫比濁檢驗(yàn)技術(shù)原理與進(jìn)展(參考版)
2025-05-03 02:46本頁面
【正文】 傳統(tǒng)特定蛋白分析儀存在的問題 特定蛋白分析儀簡介 ? 速率信號的獲取性能 ? 抗原過剩的監(jiān)測性能 ? 膠乳粒子增強(qiáng)技術(shù) 技術(shù)改進(jìn) 閾值 預(yù)反應(yīng)階段 5ul樣本 抗原過剩區(qū) 閾值 2分鐘 抗原不過量 抗原過量 反 應(yīng) 階 段 45ul樣本 小結(jié) ?免疫比濁分析技術(shù)是傳統(tǒng)免疫沉淀技術(shù)與比濁分析技術(shù)的結(jié)合 ?免疫比濁分析技術(shù)主要有透射免疫比濁分析和散射免疫比濁分析兩種 ?速率測定和膠乳粒子增敏是免疫比濁分析的發(fā)展方向 ?全自動生化分析儀和特定蛋白分析儀是免疫比濁分析的兩個重要應(yīng)用載體，均可實(shí)現(xiàn)全自動化分析 END 。（４）樣品處理不當(dāng)，如發(fā)生溶血。（２）試劑中填加的增濁劑濃度過高。 ? 偽濁度 的干擾。 ? 容易受待測標(biāo)本，如血漿 本身濁度 的影響。 特定蛋白分析儀簡介 ? 當(dāng)抗原（待測物質(zhì)）含量過高時，可能出現(xiàn) 前帶現(xiàn)象 ，也就是鉤狀效應(yīng)。 以物理吸附（多抗）或化學(xué)交聯(lián)（單抗）方式與抗體連接； 基于單抗膠乳免疫散射速率比濁技術(shù)的定量分析是發(fā)展方向 。當(dāng)兩個膠乳顆粒凝聚時，則使透射光減少，這種減少的程度與膠乳凝集成正比，當(dāng)然也與抗原量成正比。 — 速率法的優(yōu)點(diǎn)：是快速、不需要減去樣本和試劑本底讀數(shù)，校正結(jié)果也較穩(wěn)定。 — 速率峰值一般在 25秒時出現(xiàn)。將各單位時間內(nèi)形成復(fù)合物的速率及測定的散射信號連接在一起，即是動態(tài)的速率比濁分析。是測定抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的動態(tài)過程。 ? 透射比濁是依據(jù)透射光減弱的原理來定量的，因此只能測定抗原－抗體反應(yīng)的第二階段，檢測仍需抗原－抗體溫育反應(yīng)時間，檢測時間較長。 ? 直線光路，靈敏度有先天缺陷。要求抗原－抗體復(fù)合物分子應(yīng)足夠大、足夠多，分子太小則入射光直接通過。 單色器 透 射 比 濁 計 散射比濁和透射比濁的區(qū)別示意圖 透射免疫比濁法 （ transmission turbidimetry 原理 抗原與抗體在一定緩沖液中形成IC，當(dāng)光線透過反應(yīng)溶液時，由于溶液內(nèi) IC粒子對光線的反射和吸收，引起透射光減少， IC越多透射光越少，可用吸光度表示。 ～ 96176。 角， 即在直射角度上測定光透射強(qiáng)度。利用現(xiàn)代光學(xué)測量儀器對濁度進(jìn)行測定從而檢測抗原含量 。 免疫沉淀 液體內(nèi)沉淀反應(yīng) 凝膠內(nèi)沉淀反應(yīng) 免疫電泳技術(shù) 免疫濁度技術(shù) 絮狀沉淀試驗(yàn) 環(huán)狀沉淀試驗(yàn) 單向擴(kuò)散試驗(yàn) 雙向擴(kuò)散試驗(yàn) 試管法 平板法 免疫電泳 對流免疫電泳 火箭免疫電泳 免疫固定電泳 透射免疫比濁 turbidimetermeasure 散射免疫比濁 nephelomitermeasure 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 各管抗原倍比稀釋 加入抗血清 各管抗體量不變 振搖 混勻、 37℃ 孵育 沉淀量不同 試管內(nèi)絮狀沉淀試驗(yàn) 輕搖 絮 狀 沉 示 意 圖 淀 Ag Ab Ag Ab Ag 凝膠內(nèi)沉淀 —— 試管法 單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 凝膠內(nèi)沉淀試驗(yàn) ——平板法 標(biāo)準(zhǔn)品抗原濃度測定 不同病人抗原濃度測定 原理 將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中，使待測抗原在凝膠中自由擴(kuò)散，與相應(yīng)抗
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