體細(xì)胞雜交ppt課件(參考版)
2025-01-17 07:25本頁面
【正文】 世界柑橘體細(xì)胞雜種創(chuàng)造概況 Kobayashi S et al. J Japan Soc Hort Sci, 1995, 64: 283289 柑橘體細(xì)胞雜種的應(yīng)用 ? 與二倍體有性雜交，培育三倍體； ? 進(jìn)行二倍體柚癟籽果實(shí)生產(chǎn)； ? 直接作為二倍體、四倍體鮮食品種； ? 砧木育種； ? 基礎(chǔ)理論研究的理想材料 以異源四倍體為父本培育三倍體的優(yōu)點(diǎn) ? 親本來源廣泛，目前全世界 200余例； ? 花粉育性比同源四倍體高； ? 通過倍性雜交獲得的三倍體為三親雜種，遺傳基礎(chǔ)更為廣泛，有利于篩選優(yōu)質(zhì)、多抗柑橘類型。 4．體細(xì)胞雜種的核質(zhì)遺傳 1）核遺傳：雙親之和，少數(shù)有重組和丟失 2） 線粒體遺傳：往往有重組，柑橘上例外，僅來自愈傷組織親本 3）葉綠體遺傳：隨機(jī)分離，也有共存現(xiàn)象 四、體細(xì)胞雜交技術(shù)的應(yīng)用 獲得新物種 獲得新種質(zhì)和新品種 轉(zhuǎn)移細(xì)胞質(zhì)基因控制性狀 體細(xì)胞雜交技術(shù)展望 體細(xì)胞雜交技術(shù)的應(yīng)用 ? 克服生殖障礙，創(chuàng)造新種質(zhì)； ? 轉(zhuǎn)移有益性狀，改良作物品質(zhì)； ? 轉(zhuǎn)移部分染色體，創(chuàng)造非對(duì)稱雜種； ? 轉(zhuǎn)移胞質(zhì)基因組，創(chuàng)造胞質(zhì)雜種； ? 作為育種中間材料（ bridge material），進(jìn)一步用于作物改良?；蜣D(zhuǎn)移通常在后代中某些性狀得以表達(dá)，有時(shí)由于基因的重組也可能產(chǎn)生雙親均沒有的新性狀。 減數(shù)分裂時(shí)染色體配對(duì)異常：環(huán)形、染色體橋等。 關(guān)于融合參數(shù)：交流電壓 交變電場(chǎng)的振幅頻率 交變電場(chǎng)的處理時(shí)間 直流高頻電壓 脈沖寬度 脈沖次數(shù) 原生質(zhì)體的融合過程 膜的融合 細(xì)胞質(zhì)融合 發(fā)生 膜融合后的數(shù)小時(shí) 核融合 融合可能發(fā)生在細(xì)胞間期，也可能發(fā)生在第一次同步分裂過程中 影響原生質(zhì)體融合的因素 ? 原生質(zhì)體質(zhì)量對(duì)細(xì)胞融合起著至關(guān)重要的作用，高質(zhì)量的原生質(zhì)體是細(xì)胞融合的首要條件 ? 融合方法 ? 融合參數(shù)，包括各種融合液都應(yīng)選擇適當(dāng) 三、雜種細(xì)胞的發(fā)育動(dòng)態(tài) 及體細(xì)胞雜種鑒定 雜種細(xì)胞的發(fā)育動(dòng)態(tài) 雜種細(xì)胞選擇系統(tǒng) 與體細(xì)胞雜種植株鑒定 體細(xì)胞雜種的特點(diǎn) 體細(xì)胞雜種后代的遺傳 雜種細(xì)胞的發(fā)育動(dòng)態(tài) ? 核融合 ? 核重組 ? 細(xì)胞器重組 ? 部分核物質(zhì)或細(xì)胞器丟失 ? 核分裂的非同步性 雜種細(xì)胞選擇系統(tǒng)與雜種植株鑒定 1．雜種細(xì)胞的選擇系統(tǒng) ? 外觀選擇：質(zhì)體、細(xì)胞體積等 ? 互補(bǔ)選擇：抗生素、營養(yǎng)缺陷型等 ? 熒光標(biāo)記選擇：親本標(biāo)記不同熒光 2．體細(xì)胞雜種鑒定 ? 形態(tài)鑒定：根據(jù)雙親的形態(tài)學(xué)性狀觀察進(jìn)行鑒定。 融合液： CaCl2 2H2O 8~10mmol KH2PO4 甘露醇或山梨醇 ~ pH 誘導(dǎo)液：融合液＋ PEG 20～ 45％ 稀釋液： A液（ g/100ml） B液 (g/100ml) 葡萄糖 甘氨酸 CaCl2 2H2O NaOH P1
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