人感染豬鏈球菌病樣品采集運(yùn)送與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方案(參考版)
2024-10-16 12:28本頁(yè)面
【正文】 98年用 MAS300微生物自動(dòng)生化分析儀，曾將 2型豬鏈球菌誤判為血鏈球菌 ? 用 API 20 strep生化系統(tǒng)能很好地對(duì)分離株進(jìn)行菌種鑒定 ?PCR也是有效和快速的檢測(cè)方法 謝謝！ 。取 5微升擴(kuò)增產(chǎn)物在 ℅ 的瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳。 上游引物： cagtatttaccgcatggtagatat 下游引物： gtaagataccgtcaagtgagaa 檢測(cè)豬鏈球菌莢膜多糖基因（ cps2A） 上游引物： gttgagtccttatacacctgtt 下游引物： cagaaaattcatattgtccacc 檢測(cè)溶菌酶釋放相關(guān)蛋白編碼基因片段（ mrp） 上游引物： ggtatacctt gctggtaccg ttc 下游引物： agtctctaca gctgtagctg g PCR反應(yīng)的條件： 94℃ 預(yù)變性 5分鐘 。據(jù)報(bào)道 ,加拿大和澳大利亞有商品化血清分型試劑。使用一次性隔離服、 乳膠手套 、防護(hù)口罩 ? 采取預(yù)防措施，防止針頭等 銳器刺傷 ? 如發(fā)生傷口意外暴露，應(yīng)及時(shí)清洗和消毒，并預(yù)防性服藥 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) ?豬鏈球菌檢驗(yàn)程序 ?推片鏡檢 ?分離鑒定 ?檢測(cè)要點(diǎn) 豬鏈球菌檢驗(yàn)程序 病人檢樣（腦脊液、血液等） 增菌培養(yǎng) （腦心肉湯 /牛血清葡萄糖 肉湯 /血培養(yǎng)瓶） 革蘭氏染色 觸酶試驗(yàn) 推片鏡檢 豬鏈球菌檢驗(yàn)程序 (續(xù) ) 羊血瓊脂平板 （ 37℃ ， 5%CO2， 24h） α 溶血 (偶而也有弱 β 溶血 ) PCR檢測(cè) 血清學(xué)檢測(cè) 生化鑒定 推片鏡檢 ? 抗凝血或腦脊液可推片革蘭氏染色鏡檢 ? 陽(yáng)性標(biāo)本可見(jiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)吞噬顆粒，偶爾可見(jiàn)革蘭陽(yáng)性球菌 感染鼠尾血推片 感染兔心臟血推片 分離鑒定 ? 血平板直接接種 – 新鮮羊血瓊脂平板 /含 8%新生牛血清的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板 – 血或腦脊液等標(biāo)本 ? 直接接種 – 組織標(biāo)本 ? 可直接涂抹平板或剪碎用無(wú)菌生理鹽水洗滌，洗液接種平板 ? 置 37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱或者燭缸中培養(yǎng) 24小時(shí) 分離鑒定 ? 增菌培養(yǎng) – 待檢標(biāo)本置約 10倍體積腦心肉湯 /含 8%新生牛血清葡萄糖肉湯（附配方 ） /商品
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