【正文】 supF基因變異時(shí)，不能表達(dá)正常的阻遏蛋白，即使遇到停止密碼子 UAG,蛋白質(zhì)合成仍能繼續(xù)，并使 UAG作為一個(gè)密碼子編碼酪氨酸（Tyrosine）。endA基因的變異將使插入的外源 DNA更加穩(wěn)定，提取的質(zhì)粒純度更高。HsdR基因的變異導(dǎo)致菌株細(xì)胞內(nèi)的 I型限制酶 EcoK或 EcoB活性缺失，這對(duì)于外來(lái)基因的導(dǎo)入及質(zhì)粒轉(zhuǎn)化是有利的。ung基因的變異導(dǎo)致上述功能缺失，有利用點(diǎn)突變。mutT基因的變異使細(xì)胞中8OXOdGTP濃度增高，A→C的突變幾率增大，有利于利用點(diǎn)突變進(jìn)行基因改造。點(diǎn)突變相關(guān)的基因型 mutS（Mutator）功能：mutS基因表達(dá)的蛋白具有識(shí)別DNA上錯(cuò)配序列的功能，并能修復(fù)其錯(cuò)配序列（GC→AT），防止基因突變。mrr欠損株（基因型）可用于含有N6mA和C5mC的DNA的轉(zhuǎn)化。一般情況下，只有這兩種蛋白同時(shí)存在時(shí)才表現(xiàn)出活性，mcrC具有識(shí)別和調(diào)節(jié)功能，它能特異性的結(jié)合到外源 DNA上被甲基化的胞嘧啶（C）的特異序列 G5mC上，然后由 mcrB蛋白切斷（mcrB蛋白是特異性切斷外來(lái) DNA中 G5mC序列的限制性核酸內(nèi)切酶），防御外來(lái) DNA的侵入。dcm基因的導(dǎo)致胞嘧啶甲基化酶活性缺失，使外源DNA上的C不被甲基化，易于獲得非甲基化質(zhì)粒。recC基因的變異導(dǎo)致DNA重組功能缺失，保證外源DNA的穩(wěn)定性。recB（Rebination）功能：recB基因表達(dá) ATP依賴型 DNase和核酸外切酶V的一個(gè)亞基，對(duì)recA的DNA重組酶起輔助和促進(jìn)作用。蛋白質(zhì)的名稱與對(duì)應(yīng)的基因或等位基因相同，但不用斜體，且首字母大寫，如，UvrA、UvrB。例如：某些抗藥性的獲得或喪失，用如下方式表示： Streptomycin抗性→Str +或 Str r，Ampicillin敏感性→ Amp。例如：/F39。對(duì)于攜帶附加體的菌株的完整基因型描述應(yīng)包括附加體的狀態(tài)（游離或整合）。如果不知道幾個(gè)等位基因中哪一 /幾個(gè)發(fā)生了功能性突變，則用連字符“”代替大寫字母，如 trp31。不同的基因座，其中任何一個(gè)突變所產(chǎn)生的表型變化可能相同，其表示方法是在 3個(gè)小寫斜體字母后加上一個(gè)斜體大寫字母來(lái)表示區(qū)別。具有不同基因型的菌株表現(xiàn)出不同的特性。而要解除這種限制修飾作用通常有兩種方法：（1）選用上述酶的同功酶，如Sau3AI，DNA識(shí)別切割位點(diǎn)與MboI相同；但不受甲基化影響；（2）利用甲基化酶缺失的受體細(xì)胞進(jìn)行DNA的制備， JM110和鏈霉菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者細(xì)胞內(nèi)本就沒有甲基化酶，從這些細(xì)胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割?；蛐停篎，mcrAΔ(mrrhsd RMSmcrBC)，φ80，lacZΔM15，△lacⅩ74，recA1，araΔ139Δ(araleu)7697，galU，galK，rps，(Strr)endA1，nupG6：HB101菌株該菌株遺傳性能穩(wěn)定，使用方便，適用于各種基因重組實(shí)驗(yàn)基因型：supE44，hsdS20（rBmB－），recA13，ara－14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl5，mtl1，leuB6，thi1M110或 SCS110 大多數(shù)大腸桿菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一個(gè)胞嘧啶 C5位置上引入甲基?；蛐停篎，ompT，hsdS（rBBmB－），gal，dcm（DE3）3：BL21(DE3)pLysS菌株該菌株含有質(zhì)粒pLysS，因此具有氯霉素抗性?？捎糜谒{(lán)白斑篩選鑒別重組菌株。BL21（DE3）pLysS含有pLysS質(zhì)粒，他攜帶編碼T7溶菌酶基因。 JM109 ElectroCell在含有100 μg/ml的Ampicillin L瓊脂平板培養(yǎng)基上不產(chǎn)生菌落。因?yàn)榫哂蠪39。TaKaRa使用獨(dú)自開發(fā)的菌體培養(yǎng)法， ElectroCell JM109。用途：分子克隆、質(zhì)粒提取和蛋白質(zhì)表達(dá)。recA1和 endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。此質(zhì)粒還有表達(dá)T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶能夠降低目的基 因的背景表達(dá)水平，但不干擾IPTG誘導(dǎo)的表達(dá)。該菌適合于非毒性蛋白的表達(dá)。用途：分子克隆和質(zhì)粒提取。而且甲基化只發(fā)生在特定序列，以XbaI為例，只有在位點(diǎn)序列旁出現(xiàn)GA或TC，該XbaI位才會(huì)被甲基化?；蛐停篎，ompT hsdS（rBBmB－），gal，dcm（DE3，pLysS，Camr4：JM109菌株該菌株在使用pUC系列質(zhì)粒載體進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)化或用M13 phage載體進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，由于載體DNA產(chǎn)生的LacZa多肽和JM09編碼的LacZΔM15進(jìn)行α－互補(bǔ)，從而顯示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鑒別重組體菌株基因型：recA1，endA1，gyrA96，thi－1，hsdR17，supE44，relA1，Δ（lac－proAB）/F’[traD36，proAB+，lacIq，lacZΔM15]5：TOP10菌株該菌株適用于高效的DNA克隆和質(zhì)粒擴(kuò)增，能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定遺傳。該菌適合表達(dá)非毒性蛋白。 DH5a在使用pUC系列質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化時(shí)，可與載體編碼的β－半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α－互補(bǔ)。由上可知，改進(jìn)的快速細(xì)菌檢驗(yàn)方法在檢驗(yàn)步驟方面表現(xiàn)為 重點(diǎn)前移。 堅(jiān)持和加強(qiáng)標(biāo)本的直接顯微鏡鏡檢檢查。 加強(qiáng)檢驗(yàn)人員技術(shù)培訓(xùn)。 實(shí)驗(yàn)室工作人員缺乏技術(shù)培訓(xùn)，知識(shí)更新滯后，致使藥敏方法選擇錯(cuò)誤，藥敏紙片選擇不妥出現(xiàn)藥敏與臨床藥效不符。 培養(yǎng)基選擇單一，致病菌檢出率低。 方法學(xué)問(wèn)題。由于分類細(xì)菌學(xué)和臨床細(xì)菌學(xué)研究方法和目的有一定的差異。這種快速檢驗(yàn)方法的改進(jìn)，不需特殊設(shè)備。隨著現(xiàn)代感染類型變化、疾病譜的變化、醫(yī)療行為的變化(免疫抑制劑的使用、侵入性操作的普及)、細(xì)菌耐藥性的變遷，毒力較弱的條件致病菌在醫(yī)院內(nèi)感染所占的比重越來(lái)越大。③藥敏鑒定法的應(yīng)用，隨著對(duì)細(xì)菌耐藥機(jī)理研究的不斷深入。菌種鑒定項(xiàng)目的選擇，程序安排，方法的改進(jìn)，是大有潛力可挖。對(duì)雜菌多的標(biāo)本要應(yīng)用選擇性平板培養(yǎng)基，抑制雜菌提高分離陽(yáng)性率。2重視標(biāo)本的直接顯微鏡檢查為選擇合適培養(yǎng)基，正確鉤取菌落，初步判斷是否有病原菌打下基礎(chǔ)。，處理標(biāo)本。，絕大多數(shù)基層實(shí)驗(yàn)室使用的血平板培養(yǎng)基未用營(yíng)養(yǎng)豐富，利用細(xì)菌生長(zhǎng)兔，羊血配備，而用分漿后的陳舊血球制備，由于人體血液中含有多種不利細(xì)菌生長(zhǎng)的物質(zhì)，如抗生素，抗體，補(bǔ)體及紅細(xì)胞無(wú)氧代謝產(chǎn)生的酸性物質(zhì)使得許多對(duì)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)要求嚴(yán)格的病原菌如肺炎鏈球菌，流感嗜血桿菌檢出率降低【1】以上原因，造成臨床醫(yī)生產(chǎn)生“細(xì)菌培養(yǎng)麻煩費(fèi)時(shí)誤導(dǎo)治療’’的觀念，喜好根據(jù)經(jīng)驗(yàn)使用抗生素，使耐藥菌株不斷出現(xiàn)和流行。，知識(shí)更新滯后，對(duì)現(xiàn)代醫(yī)院感染變化趨勢(shì)不甚了解。，使許多有用的信息被忽視。而細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本具有不同與其一般檢驗(yàn)對(duì)標(biāo)本的要求，對(duì)標(biāo)本采集有嚴(yán)格的要求。由于分類細(xì)菌學(xué)和臨床細(xì)菌學(xué)研究方法和目的有一定差異，這種按部就班的方法，往往使取得的信息陳舊而失去助診意義，已不能適應(yīng)臨床的客觀需要【1】，應(yīng)進(jìn)行改進(jìn)。儀器可精確的檢測(cè)出銅、鋅、鐵、鈣、鎂、鉛等微量元素的含量，具有檢測(cè)速度快，重復(fù)性好，檢測(cè)結(jié)果 準(zhǔn)確的特點(diǎn)。對(duì)各種可能涉及的因素進(jìn)行分析。其它機(jī)會(huì)性感染病原或抗體的檢測(cè)卡氏肺孢子蟲：痰、支氣管分泌物、支氣管灌洗液，或肺活檢制成涂片或切片，姬姆薩或蘇木素－伊紅染色找蟲或滋養(yǎng)體 隱孢子蟲：大便涂片真菌：直接涂片找孢子和菌絲，隱球菌可取CSF涂片墨汁染色弓形蟲、病毒性肝炎、巨細(xì)胞病毒：可行抗體檢測(cè)細(xì)菌：結(jié)核桿菌涂片抗酸染色，其它細(xì)菌可行血培養(yǎng)淋巴瘤或卡波濟(jì)肉瘤：取活檢送病理切片檢查第三篇：實(shí)驗(yàn)室檢查血?dú)鈾z查血?dú)鈾z查包括動(dòng)脈血氧分壓，動(dòng)脈血CO2分壓，血液PH值，碳酸氫根離子等項(xiàng)目。slL2R測(cè)定：在HIV l型感染期間，sIL2R呈非特異性升高，水平與感染進(jìn)展有關(guān)。可檢測(cè)到每1萬(wàn)個(gè)細(xì)胞1個(gè)拷貝HIV前病毒。HIV1型抗原檢測(cè)由于血中p24抗原濃度低且形成了免疫復(fù)合物，p24抗原檢測(cè)陽(yáng)性率不如抗體陽(yáng)性率高。3434第二篇：艾滋病實(shí)驗(yàn)室常用檢查項(xiàng)目比較艾滋病實(shí)驗(yàn)室常用檢查項(xiàng)目比較ELISA ：對(duì)gp41 HIV 1型抗體的檢測(cè)是標(biāo)準(zhǔn)的篩選方法，%，但特異性并不高。11新型隱球菌抗原檢測(cè)（Cryptococcus neoformans antigen detect）臨床意義：定性和半定量檢測(cè)新型隱球菌在血清和腦脊髓液中的莢膜多聚糖抗原。其對(duì)人體感染的陽(yáng)性檢出率為：%；%；%。當(dāng)凝集價(jià)達(dá)到1：224以上時(shí)可結(jié)合病人臨床癥狀確診為傳染性單核細(xì)胞增多癥。UU與新生兒疾病與成人泌尿生殖道系統(tǒng)炎癥疾病有關(guān)，傳播途徑為性接觸和母嬰接觸，因此UU感染列為性傳播疾病常引起非淋菌性尿道炎，慢性前列腺炎和附睪炎，不育不孕，妊娠期感染等。主要檢測(cè)IgG和IgA，高濃度的IgM亦可被檢出。在病程的不同時(shí)期相隔57天，連續(xù)進(jìn)行血清學(xué)檢查，如果血清滴度隨之增高4倍或4倍以上就更有診斷價(jià)值。6超廣譜β內(nèi)酰胺酶的測(cè)定（ESBLS檢測(cè)）:有些大腸和肺克能產(chǎn)生超廣譜β內(nèi)酰胺酶，他不僅能水解第一代和第二代頭孢菌素，還能水解第三代頭孢菌素類抗生素，如頭孢他啶、頭孢噻肟等和單酰胺酶，使其失去抗菌作用，但對(duì)碳青霉烯類無(wú)明顯作用。Optochin敏感試驗(yàn)：Optochin（ethylhydrocupreine，乙基氫化去甲奎寧的商品名）可干擾肺炎鏈球菌葉酸的生物合成，抑制該菌的生長(zhǎng)，故肺炎鏈球