細(xì)胞工程第4章(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)工程4-wenkub.com
2025-02-05 04:06 本頁(yè)面
【正文】 基因的轉(zhuǎn)移可通過(guò)物理或化學(xué)的方 法，也可通過(guò)各種病毒或非病毒載體的介導(dǎo)， 還可通過(guò)改造細(xì)胞（造血干細(xì)胞、成纖維細(xì) 胞、骨髓肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞）進(jìn)行 細(xì)胞治療。 4． 6． 2 基本原理 A、代謝網(wǎng)絡(luò)理論 ? 細(xì)胞代謝網(wǎng)絡(luò)由上萬(wàn)種酶催化的系列反應(yīng)系 統(tǒng)、膜傳遞系統(tǒng)、信號(hào)傳遞系統(tǒng)組成，并且既受 精密調(diào)節(jié)，又互相協(xié)調(diào)； ? 代謝網(wǎng)絡(luò)分泌處的代謝產(chǎn)物稱(chēng)為節(jié)點(diǎn)。 B、主要內(nèi)容： 生產(chǎn)工藝的放大、生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性和重復(fù)性。 C、初步研究： 首先必須較快建立一個(gè)基本（不要求是最優(yōu)）的細(xì) 胞培養(yǎng)工藝。根據(jù) 可變程度節(jié)點(diǎn)可分：柔性節(jié)點(diǎn)、剛性節(jié)點(diǎn)和半柔 性節(jié)點(diǎn)； ? 柔性和半柔性節(jié)點(diǎn)是代謝工程設(shè)計(jì)的主要對(duì) 象，節(jié)點(diǎn)剛性程度在改選前要進(jìn)行分析判斷； 生物合成相關(guān)代謝調(diào)節(jié)和調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)理論 ? 代謝工程 代謝流及節(jié)點(diǎn)分析 理論涉及 碳源、呼吸系統(tǒng)和氧化還原重新設(shè)計(jì) 主要內(nèi)容 中心代謝產(chǎn)物作用機(jī)制及相關(guān)代謝分析 B、代謝流及中間產(chǎn)物分析 —— 靜態(tài)分析 C、代謝控制分析 —— 動(dòng)態(tài)分析 4． 6． 3 代謝調(diào)節(jié)的基本類(lèi)型及其機(jī)制 A、 代謝調(diào)節(jié)的基本類(lèi)型 直線(xiàn)式代謝的反饋控制 協(xié)作式多價(jià)反饋控制 合作反饋控制 累積反饋控制 順序反饋控制 同工酶控制 B、 酶合成及酶活性的調(diào)節(jié)機(jī)制 末端代謝產(chǎn)物阻遏 酶的阻遏 酶合成的分解代謝物阻遏 和酶的誘導(dǎo) 酶的誘導(dǎo)與合成 變構(gòu) 酶活性的調(diào)節(jié) 同工 多功能酶 4． 6． 4 代謝工程的研究方法 A、 設(shè)計(jì)思路改變代謝流 擴(kuò)展代謝途徑和構(gòu)建新的代謝途徑 常規(guī)方法 —— 分子生物 、 生化 、 物化 代謝通量分析 （ MFA） — 靜態(tài) B、 研究 代謝控制分析 （ MCA）
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