研究生-組織化學(xué)概論2-wenkub.com
2025-01-16 12:38 本頁(yè)面
【正文】 2023年 2月 上午 3時(shí) 39分 :39February 4, 2023 1業(yè)余生活要有意義，不要越軌。 03:39:3703:39:3703:39Saturday, February 4, 2023 1知人者智，自知者明。 上午 3時(shí) 39分 37秒 上午 3時(shí) 39分 03:39: 楊柳散和風(fēng)，青山澹吾慮。 :39:3703:39:37February 4, 2023 1意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 , February 4, 2023 很多事情努力了未必有結(jié)果，但是不努力卻什么改變也沒(méi)有。 2023年 2月 4日星期六 上午 3時(shí) 39分 37秒 03:39: 1比不了得就不比，得不到的就不要。 03:39:3703:39:3703:392/4/2023 3:39:37 AM 1以我獨(dú)沈久，愧君相見(jiàn)頻。染色各個(gè)步驟中應(yīng)用蒸餾水沖洗，以防止自來(lái)水內(nèi)的鐵離子與組織中的鈣鹽結(jié)合出現(xiàn)鐵的陽(yáng)性反應(yīng)。 （ 2）在組織固定、取材過(guò)程中容器要干凈，盡量避免使用含鐵用具。 （ 7）脫水，透明，中性樹(shù)脂封固。 （ 3）浸染切片 1020min。 一、人為性色素及沉著物：認(rèn)為造成的產(chǎn)物，甲醛色素、汞沉著 二、病理性色素及沉著物： 1，外源性 —— 如硅、碳末、石棉、銀、銅等 … 2，內(nèi)源性 （ 1）血源性色素 —— 如血紅蛋白、含鐵血黃素、膽色素等 （ 2）非血源性色素 —— 如黑色素、脂褐素、腎上腺色素等 ?甲醛色素 ? 暗棕色結(jié)晶，由酸性甲醛與溶血后血紅蛋白中的血紅素結(jié)合而形成的酸性甲醛羥基血紅素沉淀，一般多見(jiàn)于含血多的組織，如淤血、血腫、出血性梗死組織、血管腔及其周圍等 ? 除去方法： (1)切片脫蠟至水 ? (2)入 2%苦味酸無(wú)水乙醇飽和液 1~5H ? (3)自來(lái)水沖洗 10~20min ? (4)蒸餾水洗后， HE染色依原步驟進(jìn)行 含鐵血黃素 (hemosiderin) ? 紅細(xì)胞被巨噬細(xì)胞攝入并由其溶酶體降解，使來(lái)自紅細(xì)胞血紅蛋白的 Fe3+與蛋白質(zhì)結(jié)合成電鏡下可見(jiàn)的鐵蛋白微粒，若干鐵蛋白微粒聚集成光鏡下可見(jiàn)的棕黃色較粗大的折光顆粒，稱為 含鐵血黃素 。 4）區(qū)分骨尤文氏肉瘤與骨網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤 5）顯示與鑒別骨異常增生與骨化性纖維瘤 6）區(qū)分軟骨粘液纖維瘤與粘液肉瘤 7）鑒別腦膜瘤與星行細(xì)胞瘤 腦膜瘤有網(wǎng)狀纖維 （二）用于某些腫瘤的診斷 1）平滑肌肉瘤 瘤細(xì)胞間可見(jiàn)大量平行分布的網(wǎng)狀纖維 2）纖維肉瘤 大量網(wǎng)狀纖維密集包繞細(xì)胞 3）滑膜肉瘤 其梭形細(xì)胞產(chǎn)生網(wǎng)狀纖維少 4）惡性神經(jīng)鞘瘤 網(wǎng)狀纖維與梭形細(xì)胞平行排列，不包繞細(xì)胞兩端 注：大多被免疫組化取代，很少用 （三）用于觀察和研究癌組織的發(fā)生、發(fā)展及其惡性程度 （四）顯示與觀察基底膜的變化 如：原位癌，可見(jiàn)有完整的基底膜，而浸潤(rùn)性癌則可見(jiàn)到被破壞的基底膜。 原理：組織經(jīng)過(guò)氧化劑的氧化使網(wǎng)狀纖維對(duì)銀離子具有選擇性的親和力，并在媒染劑的作用下，氨銀液被組織吸咐與組織中的蛋白結(jié)合，經(jīng)甲醛還原成黑色的金屬銀沉積于組織內(nèi)及表面。這些都是配位化合物 ,簡(jiǎn)稱配合物 (舊稱絡(luò)合物 )。例如 Perdrau氏法 ,Foot氏法 ,Gomori氏法 ,Wilder氏法 ,GordenSweets氏法 ,James氏法 ,NaounenkoFeigin氏法等十多種。我們?nèi)粘ＫQ的網(wǎng)狀纖維染色 ,主要是顯示淋巴網(wǎng)狀組織的網(wǎng)狀纖維 ,因?yàn)檫@些組織網(wǎng)狀纖維的增多或減少 ,崩解成斷裂 ,都有助于病理組織上的診斷。 分布 網(wǎng)狀纖維的分布很廣泛，常以兩種形式存在。 特點(diǎn) 網(wǎng)狀纖維纖細(xì)，直徑 ,沒(méi)有彈性，而有韌性，能抵抗胃液的消化和弱酸的腐蝕。它穿行于網(wǎng)狀細(xì)胞體和突起分支，并互相交織成網(wǎng)，因而被稱為網(wǎng)狀纖維，又因這種纖維對(duì)銀的浸染著色特別顯著。 盛放此溶液的容器需塞緊蓋嚴(yán)，防止揮發(fā)導(dǎo)致染色時(shí)沉淀。 二、固定 10%甲醛溶液 三、試劑配制 蘇丹 III染液：蘇丹 ， 60%~70%乙醇 100ml。脂肪又分為簡(jiǎn)單甘油三酯和混合甘油三酯。脂質(zhì)往往和組織的蛋白質(zhì)結(jié)合而形成脂蛋白。熔點(diǎn)取決于兩個(gè)因素：一是脂肪酸的鏈長(zhǎng)（增加而升高）；另外就是脂類的飽和程度（增加而升高）。在性質(zhì)上它通常是三個(gè)脂肪酸分子（飽和或不飽和的）與一個(gè)甘油分子相結(jié)合形成的甘油三酯。 ⑥ 把玻璃器皿倒置于有孔架上自然晾干或溫箱中烤干，最后存放櫥內(nèi)備用。 ② 用毛刷沾洗衣粉擦干凈。 ? 新購(gòu)玻璃器皿的處理 對(duì)于新購(gòu)買(mǎi)的玻璃器皿應(yīng)先用洗衣粉浸泡洗刷，自來(lái)水沖洗后再用 1—2%鹽酸水溶液浸泡數(shù)小時(shí)后，用自來(lái)水沖洗干凈，必要時(shí)可用少量蒸餾水洗 2次。 （ 4）盡量要陽(yáng)性切片作對(duì)照，便于選擇特染方法，并與 HE切片作對(duì)照。 ? 染色流程 ? (1)二甲苯（ Ⅰ ） 10min ? (2) 二甲苯（ Ⅱ ） 10 min ? (3)100%乙醇（ Ⅰ ） 1min ? (4)100%乙醇（ Ⅱ ） 1min ? (5)80%乙醇 2min ? (6)蒸餾水 12min ? (7)蘇木精液染色 5 min ? (8 ) 流水稍洗去蘇木精液 13 s ? (9) 1%鹽酸乙醇 13 s (11)流水沖洗 10min ? (12) %伊紅液染色 13 min ? (13) 蒸餾水稍洗 12 s ? (14) 80%乙醇稍洗 1min ? (15) 95%乙醇（ Ⅰ ） 1min ? (16) 95%乙醇（ Ⅱ ） 1min ? (17) 無(wú)水乙醇 1min ? (18) 無(wú)水乙醇 1min ? (19) 二甲苯（ Ⅰ ） 1min ? (20) 二甲苯（ Ⅱ ） 1min ? (21) 二甲苯（ Ⅲ ） 1 min ? (22) 中性樹(shù)膠封固 ? 冷凍切片 HE染色步驟： ? （ 1）冰凍切片固定 10～ 30 s ? （ 2）稍水洗 1～ 2 s ? （ 3）蘇木精液染色（ 60℃ ） 3min ? （ 4）流水洗去蘇木精液 5～ 10 s ? （ 5） 1%鹽酸乙醇 1～ 3 s ? （ 6）稍水洗 1～ 2 s ? （ 7）促藍(lán)液返藍(lán) 5～ 10 s ? （ 8）流水沖洗 15～ 30 s ? （ 9） %曙紅液染色 30s ? （ 10）蒸餾水稍洗 1～ 2 s ? （ 11） 80%乙醇 10 s ? （ 12） 95%乙醇 10 s ? （ 13）無(wú)水乙醇 10 s ? （ 14）無(wú)水乙醇 10 s ? （ 15）二甲苯（ Ⅰ ） 10 s ? （ 16）二甲苯（ Ⅱ ） 10 s ? （ 17）中性樹(shù)膠封固。 藍(lán)化： 用明礬蘇木素液深染細(xì)胞核后，通過(guò)鹽酸乙醇的分化，切片從酸性環(huán)境中（此時(shí)，切片呈紅褐色）轉(zhuǎn)移至流水中使之變藍(lán)的過(guò)程。以濾紙過(guò)濾，將濾渣在烘箱中烤干后，以 95%酒精（即工業(yè)酒精，如果不
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