基因重組與基因工程課件-wenkub.com
2025-01-05 18:07 本頁(yè)面
【正文】 ? 原理：以目的 DNA為模板，快速合成大量的 DNA，用于檢測(cè)、制備、研究。 基因工程的表達(dá)體系的發(fā)展 載體 宿主第一代 質(zhì)粒、噬菌體 細(xì)菌第二代 穿梭質(zhì)粒 酵母第三代 動(dòng)植物病毒、昆蟲(chóng)載體組織培養(yǎng)細(xì)胞第四代 DNA 直接導(dǎo)入 生殖細(xì)胞 DNA重組體的篩選與鑒定 ? 根據(jù)重組載體的表型進(jìn)行篩選： 如質(zhì)粒的抗藥性、營(yíng)養(yǎng)素的依賴型 ? DNA限制酶切圖譜分析： 提取經(jīng)粗選后的宿主 DNA，用限制性內(nèi)切酶切割后與原來(lái)載體比較。 ? DNA連接酶 ：可用于連接堿基互補(bǔ)的二段核酸鏈。 從 mRNA合成 cDNA 限制性內(nèi)切酶的應(yīng)用 ? 限制性內(nèi)切酶可辨認(rèn) 4~6個(gè)核苷酸：回文結(jié)構(gòu) ? 回文結(jié)構(gòu) ： palindrome DNA雙鏈具有方向相反順序一致的結(jié)構(gòu)。 ? 一個(gè)切口：插入型載體。 ? 質(zhì)粒的性質(zhì)： 易于從一個(gè)細(xì)菌轉(zhuǎn)移入另一個(gè)細(xì)菌。但必須利用宿主的酶系統(tǒng)，才能有進(jìn)一步的基因表達(dá)能力。 ? 賦予重組 DNA以新的生命力。 ? 這些游動(dòng)的基因稱為 轉(zhuǎn)位子 (transposon)。后者稱 轉(zhuǎn)導(dǎo) 。 ? 溶原菌： 整合了噬菌體基因組的細(xì)菌。 細(xì)菌的轉(zhuǎn)化 轉(zhuǎn)化 ? 病毒癌基因感染宿主細(xì)胞后，可整合到宿主染色體上，從而使宿主細(xì)胞癌變。 轉(zhuǎn)染： 噬菌體感染宿主菌后，核酸進(jìn)入菌體內(nèi)的過(guò)程。 ? 裂解： ? 噬菌體感染大腸桿菌的第二步 ? DNA利用菌體的酶系統(tǒng)，復(fù)制自身及外殼蛋白，組裝成大量新 ? 噬菌體，并將細(xì)菌漲破。 ? 帶有宿主 DNA的噬菌體稱 轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體 。 轉(zhuǎn)位 第二節(jié)、基因工程 ?
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