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dna的粗提取與鑒定-wenkub.com

2025-07-12 18:25 本頁面
   

【正文】 絲狀物是多個 DNA子聚在一起形成的 答:整個實(shí)驗(yàn)共 “ 兩次蒸餾水 , 三次過濾 , 兩次析出 , 六次攪拌 ” 討論: ①兩次蒸餾水 第一次: 細(xì)胞吸水脹破 第一步 第二次:使 DNA黏稠物析出 第三步 ( 1)此實(shí)驗(yàn)過程中有幾次使用蒸餾水?幾次過濾,幾次析出,幾次攪拌?分別在哪一步? 過濾時使用的紗布層數(shù)與需用濾液或黏稠物有關(guān) , 第二次要用其濾出的黏稠物有關(guān) , 所以要使用多層紗布 , 第一次和第三次均要用其濾液 , 使用的紗布為 1- 2層 . ②三次過濾 第一次: DNA存在于濾液里 第一步 第二次: DNA被留在紗布上 第四步第三次: DNA存在于濾液里 第六步 ③兩次析出 第一次:用 mol/ L 的 NaCI溶液含雜質(zhì)多 第三步 第二次:用冷卻的 95%的酒精 第七步 ④六次攪拌: 第一、二、三、五、七步 其中除第八步外,其余均要朝一個方向攪拌,在第三、五步攪動還要輕緩,玻璃棒不要直插燒杯底部,這樣才能保證得到完整的 DNA ( 2)為什么反復(fù)地溶解與析出 DNA,能夠去除雜質(zhì)? 答: 用高鹽濃度的溶液溶解 DNA,能除去在高鹽 中不能溶解的雜質(zhì); 用低鹽濃度使 DNA析出,能除去溶解在低鹽 溶 液中的雜質(zhì)。用玻璃棒將絲狀物卷起,并用濾紙吸取上面的水分。當(dāng)粘稠物不再增加時停止加入蒸餾水(這時溶液中氯化鈉的物質(zhì)的量濃度相當(dāng)于 mol/ L) ③ 析出含 DNA的粘稠物 討論:加入蒸餾水的目的? 降低 NaCl溶液濃度到使 DNA溶解度最低點(diǎn),使 DNA從 NaCl溶液中析出 . 將溶液中的 DNA與其他雜質(zhì)分離,這一步驟是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。取其濾液。 用吸管除去離心管上部的澄清液,就可以得到雞血細(xì)胞液。注入新鮮的雞血(約 180ml),同時用玻璃棒攪拌,使血液與檸檬酸納溶液充分混合,以免凝血。 ③ DNA遇二苯胺(沸水?。境伤{(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定 DNA的試劑。當(dāng) NaCl的物質(zhì)的量濃度為 mol/ L時 ,DNA的溶解度最低。(從中選取2~ 3種實(shí)驗(yàn)材料) 原則:凡是含有 DNA的生物材料都可以考慮,但選用 DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大 動物細(xì)胞的破碎較易,例如,在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水 ,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可 (二)破碎細(xì)胞,獲取含 DNA的濾液 動物細(xì)胞 答:蒸餾水對于雞血細(xì)胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi),使血細(xì)胞脹裂,再加上
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