分子熒光分析法ppt課件-wenkub.com
2025-05-03 08:16 本頁面
【正文】 。 c. 熒光波長短于激發(fā)光波長。mL1） 68 舉例 — 痕量 3,4苯并芘的測定 : 苯并芘 萃?。ōh(huán)己酮或石油醚） → 濃縮 → 層析 → 以 H2SO4 溶解苯并芘 → 熒光分析 熒光測定： lex = 520 nm lem= 545 nm 69 復(fù)習(xí) ? 分子熒光的發(fā)生過程 ? 激發(fā)光譜和發(fā)射光譜 ? 熒光光譜的特征 ? 分子結(jié)構(gòu)與熒光的關(guān)系 ? 影響熒光強(qiáng)度的因素 ? 熒光定量分析方法。 測試熒光的方向與激發(fā)光入射方向垂直 ， 吸收池是四面透光的 。 54 ?拉曼光 (Raman scattering light)： 光子與物質(zhì)分子發(fā)生非彈性碰撞時，不僅改變光子運(yùn)動方向，而且發(fā)生能量交換，這種散射光稱為拉曼光。 熒光素鈉的乙醇溶液 , T0℃ 時 ,每降低10℃ , φ增加 3%, 80 ℃ 時 φ=100% . 51 溶劑的極性：電子激發(fā)態(tài)比基態(tài)的極性大 ， 溶劑的極性增強(qiáng) ， 熒光強(qiáng)度增大 ， 熒光波長紅移 。 ⑶ pH的影響：對于弱酸或弱堿性熒光物質(zhì) ， 溶液的 pH值改變 ， 影響其解離平衡 ， 使熒光強(qiáng)度發(fā)生變化 。 ?第三類取代基對電子共軛體系作用較小，對熒光的影響不明顯。 ① 1二甲胺基萘 7磺酸鹽 ② 1二甲胺基萘 8磺酸鹽 ? f＝ ? f＝ S O 3 N aNH 3 CC H 3S O 3 N a NH 3 CC H 347 ?取代基作用 ?第一類取代基是給電子基團(tuán)，能增加分子的電子共軛程度，使熒光效率提高，熒光波長長移。 44 ?長共軛結(jié)構(gòu)示例 femex ( n m ) /( n m ) / λλ ?比較：苯 205/278/ 萘 286/321/ 蒽 356/404/ C H 2 O C O C H 3維生素 A λex＝ 327nm； λem＝ 510nm 45 ?剛性和共平面結(jié)構(gòu)示例 ?形成絡(luò)合物后，如果分子的剛性和共平面性增強(qiáng)，可使熒光增強(qiáng)。 ⑴ 長共軛結(jié)構(gòu) ：分子中必須具有大的共軛 π鍵結(jié)構(gòu)。 32 （二）有機(jī)化合物分子結(jié)構(gòu)與熒光的關(guān)系 ? → ?* 躍遷 芳香族化合物、五元雜環(huán)上取代苯基 . 共軛體系越大 ,越易產(chǎn)生熒光 ,熒光效率也增大 . ─(CH=CH)3─ φ= ─(CH=CH)2─ φ= 33 2. 剛性結(jié)構(gòu)和共平面效應(yīng) 酚酞 (無熒光 ) 8－羥基喹啉 (弱熒光 ) 紅色熒光 C O O O C O O C O C O O O N O N O Mg N O 熒光黃 34 聯(lián)二苯 φ= 芴 φ= 3,4苯并芘 ( 強(qiáng)熒光物質(zhì) ) C H 2 35 O 3 SN ( C H 3 ) 2N ( C H3 ) 2S O 3Ff＝ Ff＝ 扭轉(zhuǎn)離開了平面構(gòu)型 ， 影響了 p?共軛作用 36 順式二苯乙烯 無熒光 反式二苯乙烯 強(qiáng)熒光 CHCHCHCH37 3. 取代基的作用 給電子基增強(qiáng)熒光 ： － OH,－ OR,－ NH2,－ NHR,－ NR2,－ C≡N 吸電子基減弱熒光： － COOH,－ C=O,－ NO2,－ N＝ N,－ Cl,－ Br,－ I 與 ?體系作用小的取代基影響不明顯 ： － SO3R,－ NH3＋ ,－ SH,－ F,－ R。 圖 113 蒽的激發(fā)光譜和熒光光譜 28 ?激發(fā)光譜和發(fā)射光譜具有三個特點(diǎn)： ⑴ 斯托克斯位移，波長：熒光 ＞ 激發(fā)光； ⑵熒光發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)光波長無關(guān)； ⑶熒光光譜和激發(fā)光譜大致成鏡像關(guān)系。 15 吸收 熒光 磷光 激發(fā)單重態(tài) 激發(fā)三重態(tài) 內(nèi)轉(zhuǎn)換 振動馳豫 系間跨躍 振動馳豫 外轉(zhuǎn)換 基態(tài) 熒光壽命 : 10－ 9～ 10－ 7 s 磷光壽命 : 10－ 4～ 10 s 圖 112 熒光和磷光產(chǎn)生示意圖 16 結(jié)論： ? 熒光是來自最低激發(fā)單重態(tài)的輻射躍遷過程所伴隨的發(fā)光現(xiàn)象
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