細菌遺傳課時ppt課件-wenkub.com
2025-04-29 07:37 本頁面
【正文】 （ ） 五、復(fù)習(xí)題 用一野生型菌株提出的 DNA來轉(zhuǎn)化一個不能合成丙氨酸（ ala）、脯氨酸（ pro）和精氨酸（ arg）的突變型菌株，產(chǎn)生不同轉(zhuǎn)化類型的菌落，其數(shù)如下： ala+ pro+ arg+ ： 8400 ala+ pro arg ： 840 ala+ pro arg+ ： 2100 ala+ pro+ arg ： 1400 Ala pro+arg+ ： 420 ala pro+ arg ： 840 Ala pro arg+ ： 840 問（ 1）這些基因間的圖距是多少？ （ 2）這些基因的順序如何？ 紅色面包霉中一染色體的一個臂上有 a、 b、 c三個基因，現(xiàn) a b + + + c得到如下子囊，試判斷基因順序，并計算所有基因間及基因一著絲粒間的距離。 a. 基因 a b. 基因 b c. 基因 c d. 基因 d ，（ ）是合成功能突變體 a. st b. pyr c. lac d. azir （四）是非題（正確題畫 √，錯誤題畫 ） Hfr株的性因子從細菌染色體上環(huán)出，帶有部分細胞染色體基因時形成 F`。據(jù)雙交換值最小的原理，推斷 abc三基因的排序為 ( )。 性導(dǎo)作圖原理就是依據(jù)連鎖基因間距離愈近（并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率）愈高，反之則反，從而進行性導(dǎo)基因作圖。 2. 細菌接合重組有三條途徑：其一、體內(nèi)含有性因子的雄株，在性因子滾環(huán)式復(fù)制的同時轉(zhuǎn)移細菌基因組基因，高頻率的產(chǎn)生基因重組。 同源重組步驟 RecBCD識別 chi 序列，并形成復(fù)合體 → 外切骨架解旋 → 內(nèi)切 chi 位點 → 雙鏈解離 → 正常復(fù)制 六、細菌同源重組及其機理 ⑴ 同源重組蛋白 RecBCD識別 chi引發(fā)重組 細菌同源重組機理 Holliday連接橋識別解離的酶系統(tǒng)。 ⑷接合、性導(dǎo)是環(huán)狀雙鏈與單鏈重組，結(jié)果與轉(zhuǎn)化相似。 特點：二次雙鏈間交換重組 ①首次雙鏈間交換錯誤切割時形成轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體，正常切割時轉(zhuǎn)導(dǎo)流產(chǎn)。 C+ F+ A+ C F A C+FA+114 A+ C+ F+ A C F A+CF+=0 用共導(dǎo)子頻率定距離 (五 )共導(dǎo)子頻率與基因作圖 五、轉(zhuǎn)導(dǎo)重組與作圖 supC trpA pyrF ⑴ 計算連鎖基因共導(dǎo)率 trpA與 supC：①②均有共導(dǎo)，共導(dǎo)率 = (36+114)/603= supC與 pyrF：僅① 中共導(dǎo)， 共導(dǎo)率 = 36/603= 。所以，雙交換最少的共導(dǎo)子可以確定中央基因。 有 2種排列方式： leu azi –thr 或 thr——leu azi 。 與性導(dǎo)原理一樣，連鎖基因間的距離愈近共導(dǎo)或性導(dǎo)率愈高，反之則反。 五、轉(zhuǎn)導(dǎo)重組與作圖 (二 )轉(zhuǎn)導(dǎo)、性導(dǎo)、轉(zhuǎn)化與接觸重組的區(qū)別 (三 )普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) (general transduction) 五、轉(zhuǎn)導(dǎo)重組與作圖 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) ： phage傳遞供體 基因組任一 基因，并在受體表達 轉(zhuǎn)導(dǎo)過程 侵染 供體 → 降解染色體 → 誤裝形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子→ 釋放再侵染 → 部分二倍體 → 轉(zhuǎn)導(dǎo)子命運：①外基因降解稱丟失；②外基因不復(fù)制稱流產(chǎn)；③外基因被整合，供體性狀表達。 以噬菌體為媒介轉(zhuǎn)遞基因并表達稱轉(zhuǎn)導(dǎo)重組 (transduction rebination) LT22(phetrptyrhis) LT2(phe+trp+tyr+his+) 混合 4h后 基本培養(yǎng)基培養(yǎng) 野生型菌斑率高達 105 ，為什么？ ① DavisU形管分開雙親無野生型，不分開有野生型，說明是接合或性導(dǎo)重組。說明親本 LT2中有 P22 ⑷ 親本 LT2中加 P22血清也無 wt。據(jù)并發(fā)轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率進行基因定位，性導(dǎo)作圖方法和步驟在轉(zhuǎn)導(dǎo)作圖中講。 ② 顯隱性研究： F`因子進入 受體后，部分二倍體中隱性基因不表達，離開受體隱性基因能表達 。 F+與 Hfr 能相互轉(zhuǎn)變 F因子與寄主基因組交換、整合形成 Hfr，與菌株染色體成環(huán)剪切和環(huán)出 會形成 F+為可逆過程 四、性導(dǎo)重組 （ sex duction rebination ） 改變受體性別 三者差異：因 F `與 F+均能使 F變成 F+(環(huán)狀 DNA獨立 )，但 Hfr不能 (插入細菌基因組內(nèi) ) 基因高頻轉(zhuǎn)移 三者差異： F`與 Hfr均攜帶細菌基因， 基因隨 F因子高頻轉(zhuǎn)移；F+未攜帶細菌基因， F因子轉(zhuǎn)移快但基因轉(zhuǎn)移率低 受體形成部分二倍體 三者差異： F`與 Hfr因攜帶的細菌基因，能與細菌基因組配對形成部分二倍體， F+卻不能。 Hfr H是 thi→ gal→lac→pro→ton→azi→thr 逆時針方向轉(zhuǎn)移； Hfr1是 azi→ton →pro→ lac→gal→thr 順時針方向轉(zhuǎn)移，兩菌株轉(zhuǎn)移結(jié)果證明。 gene |_______|____|_|_|__|_|______|_____|__|_______| min: 5 10 15 20 25 時間距離 8 11 18 25 cM距離 160 220 360 500 thr leu azi ton lac gal 三、接合重組 (六 )中斷雜交與作圖 基因精確定位 中斷雜交難確定緊密連鎖基因距離 中斷雜交中已知 lac比 ade先進入 F lac+ade+與內(nèi)基因間有 a,b兩種方式插入受體。 三、接合重組 (六 )中斷雜交與作圖 中斷雜交 (interrupted mating)試驗結(jié)果 ① 重組子出現(xiàn)的時間順序為基因排
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