【正文】 （2012簡答） 一般毒性試驗(yàn)常用溶劑：體內(nèi)試驗(yàn)：水、植物油、賦形劑（阿拉伯樹膠、羧甲基纖維素）；體外試驗(yàn)：等滲液體、二甲基亞砜。2） 暴露途徑 首過效應(yīng)（first pass effecct）：經(jīng)口給藥時(shí)，外源化學(xué)物在胃腸道吸收后經(jīng)門靜脈系統(tǒng)到達(dá)肝臟而被代謝。3　 接觸頻率4　 溶劑或助溶劑。嗎啡毒性對密閉的低于開放的。有機(jī)磷酸酯殺蟲劑庫馬弗司在貯存中形成分解物對牛的毒性增加。5　 比重。較小分子量200的親水性分子，如乙醇或尿素能經(jīng)過膜孔，鈉不能。不飽和鍵增加，毒性增加。第五章 毒性作用的影響因素＃外源化學(xué)物毒作用的影響因素:化學(xué)物因素；機(jī)體因素；暴露因素；環(huán)境因素；化學(xué)物聯(lián)合作用。ATP利用度是決定細(xì)胞死亡形式的關(guān)鍵。而凋亡過程卻是有序的。中毒性細(xì)胞死亡機(jī)制：外源性化學(xué)物通常通過啟動三種關(guān)鍵性生化紊亂引起細(xì)胞致死性損傷：ATP耗竭；持續(xù)性的細(xì)胞內(nèi)Ca2+升高；ROS和RNS過量產(chǎn)生。ROS:指活性氧，是生物有氧代謝過程中的一種副產(chǎn)品，包括氧離子、過氧化物和含氧自由基等。（三）新抗原形成在某些個(gè)體，與外源化學(xué)物共價(jià)結(jié)合的蛋白質(zhì)作為新抗原，激發(fā)免疫應(yīng)答。 2) 某些靶分子在外源化學(xué)物作用下引起自發(fā)性降解?！鹉承┗瘜W(xué)物（如多柔比星）插入雙螺旋DNA中重疊堿基間，導(dǎo)致鄰近堿基對分開，通過移動讀碼框架引起移碼突變。 3) 當(dāng)毒物與蛋白質(zhì)交互作用而改變其結(jié)構(gòu)時(shí)，蛋白質(zhì)的功能即發(fā)生損害。（五）酶促反應(yīng) 少數(shù)毒素通過酶促反應(yīng)作用于特定靶蛋白。 （三）去氫反應(yīng) 自由基迅速引起內(nèi)源化學(xué)物去氫，生成新的內(nèi)源性自由基。2）中性自由基（如：HO?、NO2?和Cl3C?）也能與生物靶分子發(fā)生共價(jià)結(jié)合 Cl3C?加入到脂質(zhì)的雙鍵碳或脂質(zhì)自由基生成含有氯甲基脂肪酸的脂質(zhì)。 ○軟親電子劑較易與軟親核物（二者均具有較低的電荷∕半徑比）反應(yīng)，而硬親電子劑較易與硬親核物（二者均具有較高的電荷∕半徑比）反應(yīng)。親電子劑以共價(jià)結(jié)合方式與靶分子結(jié)合。一、反應(yīng)的類型（共價(jià)反應(yīng)，非共價(jià)反應(yīng)，去氫反應(yīng)，電子轉(zhuǎn)移，酶促反應(yīng)）填空2007（一）非共價(jià)結(jié)合 ：通?？赡妗. 終毒物：是指與生物靶分子（如受體、酶、 DNA、微絲蛋白、脂質(zhì)等）反應(yīng)或引起機(jī)體生物學(xué)微環(huán)境改變、導(dǎo)致機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能紊亂并表現(xiàn)出毒物毒性的物質(zhì)。 B. 親電子劑（electrophiles)：是含有一個(gè)缺電子原子的分子；易與含電子的親核物共享電子對而發(fā)生反應(yīng)；親電子劑的形成與多種化學(xué)物的增毒作用有關(guān)：C. 自由基（free radicals)：是指在其外層軌道中含有一個(gè)或多個(gè)不成對電子的分子或分子片段。2) 偶爾可見某種具有反應(yīng)活性的毒物使解毒酶失活。 清除自由基非酶性系統(tǒng)：維生素E，維生素C，谷胱甘肽，膽紅素，尿酸。預(yù)防HO?毒作用的最有效方法是阻止其生成。 3. 親電子劑的解毒（結(jié)合反應(yīng)）填空2009親電子劑通常與巰基親核物谷胱甘肽發(fā)生結(jié)合反應(yīng)而解毒。（暴露或引入一個(gè)功能基團(tuán)）l Ⅱ相反應(yīng)為結(jié)合反應(yīng) ：葡萄糖醛酸、硫酸或氨基酸等內(nèi)源性基團(tuán)與化學(xué)毒物功能基團(tuán)結(jié)合形成無活性/高度親水/易于排泄的有機(jī)酸。解毒作用 ◆消除終毒物或阻止終毒物生成的生物轉(zhuǎn)化過程稱為解毒（detoxication）。例如：亞硝酸鹽、抗壞血酸等。機(jī)體自由基來源:生物自身合成；外源化學(xué)物氧化還原代謝。3) 共價(jià)鍵均裂：四氯化碳生成三氯甲基自由基，繼而生成三氯甲基過氧自由基；羥自由基的形成也屬于共價(jià)鍵均裂。 2. 自由基（free radical) ：指在其外層軌道中含有一個(gè)或多個(gè)不成對電子的分子或分子片段。 終毒物主要分為下列四類： 親電子劑（electrophiles）自由基（free radicals）親核物（nucleophiles）氧化還原性反應(yīng)物（redoxactive reductants）1．親電子劑（electrophiles）：指含有一個(gè)缺電子原子的分子。(尿液堿化有利于弱有機(jī)酸的排泄，反之亦然)三、增毒（終毒物的形成）終毒物：指直接與內(nèi)源靶分子反應(yīng)或引起機(jī)體生物學(xué)微環(huán)境改變、導(dǎo)致機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能紊亂并表現(xiàn)毒物毒性的物質(zhì)。2. 重吸收★轉(zhuǎn)運(yùn)到腎小管的毒物可穿越腎小管細(xì)胞擴(kuò)散回小管周毛細(xì)血管。P蛋白可將化學(xué)物從細(xì)胞內(nèi)排出，對血腦屏障有重要作用。4) 與細(xì)胞內(nèi)結(jié)合蛋白結(jié)合：與細(xì)胞內(nèi)非靶部位的結(jié)合也能暫時(shí)減少毒物在靶部位的濃度。 3) 貯存部位的分布：外源化學(xué)物蓄積在某些組織卻不發(fā)生毒性效應(yīng)。（二）、妨礙毒物分布到靶部位的機(jī)制：（易考）1) 血漿蛋白結(jié)合：一旦外源化學(xué)物與血漿高分子量蛋白質(zhì)或脂蛋白結(jié)合，就不能通過擴(kuò)散透過毛細(xì)血管，即使其透過孔道離開血流，亦難以滲透通過細(xì)胞膜。填空2005（一）、促進(jìn)毒物分布到靶部位的機(jī)制：（易考）1) 毛細(xì)血管內(nèi)皮的多孔性：肝竇和腎小管周圍毛細(xì)血管具有較大的孔道（直徑：50～150nm），甚至可容許與蛋白質(zhì)結(jié)合的外源化學(xué)物通過，有助于化學(xué)物在肝臟與腎臟的蓄積。l 而細(xì)菌脂多糖抑制腸、肝藥物（毒物）代謝酶和藥物（毒物）轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)，增加毒物進(jìn)入體循環(huán)。l 毒物吸收率也與暴露部位的面積、發(fā)生吸收過程的上皮特征（如皮膚、角質(zhì)厚度）、上皮下微循環(huán)以及毒物的理化特性有關(guān)。4) 由于有毒化學(xué)物種類和數(shù)量繁多，不同種類化學(xué)物毒作用機(jī)制不完全相同。其中外源化學(xué)物在體內(nèi)的吸收、分布、重吸收和代謝增毒過程促進(jìn)終毒物在靶部位的蓄積，而外源化學(xué)物進(jìn)入體循環(huán)之前的消除、毒物從作用部位分布到其他部位、毒物的排泄和解毒則減少終毒物在靶部位的蓄積。生物利用度：指外源化學(xué)物進(jìn)入機(jī)體時(shí)的吸收率。一房室模型半減期的計(jì)算公式為：t 1/2＝與消除速率常數(shù)成反比，t 1/2越大，從機(jī)體消除的速度越慢。h－1。Ke 越大，外源化學(xué)物從機(jī)體消除的速度越快。該參數(shù)只有在外源化學(xué)物均勻分布于全身組織時(shí)才與其真正占有的生理容積相等, 而這種情況十分罕見, 故稱之為“表觀”。多房室模型由一個(gè)中央室（central partment）和若干個(gè)周邊室（peripheral partment）相互連接而成。n 零級速率過程指毒物在體內(nèi)某一瞬間的變化速率與其瞬時(shí)含量的零次方呈正比。生理學(xué)模型則使用一系列質(zhì)量平衡方程式來代表機(jī)體的各個(gè)組織器官，并從生理學(xué)的角度描述毒物在它們當(dāng)中的變化情況。5) 缺乏輔因子如馬來酸乙二酯可耗竭GSH，使GST因缺乏輔因子而無法催化親電子劑的結(jié)合反應(yīng)。(2) 非競爭性抑制1)與酶的活性中心發(fā)生可逆或不可逆性結(jié)合苯硫磷可抑制羧酸酯酶活性使馬拉硫磷的水解速度減慢而增強(qiáng)其毒性。毒物代謝酶的阻遏指對某些代謝酶誘導(dǎo)的同時(shí)可阻遏另一些代謝酶的合成。許多外源化學(xué)物可引起某些代謝酶的合成增加并伴有活力增強(qiáng)，這種現(xiàn)象稱為酶的誘導(dǎo)（enzyme induction）。（一）毒物代謝酶的遺傳多態(tài)性（遺傳因素）遺傳多態(tài)性（genetic polymorphism）系指在群體中出現(xiàn)頻率大于1%的多種等位基因形式。葡糖醛酸結(jié)合（最重要）、硫酸結(jié)合、谷胱甘肽結(jié)合、甲基化反應(yīng)、乙酰化作用、氨基酸結(jié)合1影響化學(xué)毒物生物轉(zhuǎn)化的因素 包括遺傳因素和環(huán)境因素。催化反應(yīng)的多樣性，使外源化學(xué)物解毒或活化為活性中間產(chǎn)物的數(shù)量，細(xì)胞色素P450酶系均在I相生物轉(zhuǎn)化酶中居首位。1I相反應(yīng)的類型：氧化還原水解反應(yīng)。1混合功能氧化酶的組成：血紅素蛋白類：細(xì)胞色素P450和細(xì)胞色素b5還原酶，黃素蛋白類：NADPH細(xì)胞色素P 450還原酶和NADH細(xì)胞色素b5還原酶。意義：一、代謝解毒與代謝活化：代謝活化產(chǎn)物分為4類：親電子劑（苯并比）、自由基（四氯化碳，醌）、親核劑（苦杏仁甘）、氧化還原反應(yīng)物。16. 生物轉(zhuǎn)運(yùn)的毒理學(xué)意義 ：進(jìn)入體內(nèi)毒物的量； 吸收途徑；吸收部位；：器官組織中毒物的量；毒物不均勻分布，濃集點(diǎn)可能就是靶器官； 蓄積作用對急性中毒有保護(hù)作用，但又是慢性中毒的一個(gè)重要條件。1) 經(jīng)腎臟排泄：（機(jī)體最重要、有效的排泄器官）隨尿液排出；2) 糞便排泄：A. 混入食物中的毒物B. 隨膽汁排出的毒物C. 腸道排泄的毒物D. 腸道菌群3） 經(jīng)肺排泄： 經(jīng)呼吸道隨同呼出氣體排出；（1）體溫下以氣態(tài)存在的物質(zhì)（2）揮發(fā)性液體 如乙醇。(2)肝、腎 ：肝腎中一種金屬硫蛋白（MT）能與鎘汞鋅鉛等金屬結(jié)合(3)脂肪組織：多氯聯(lián)苯，DDT，二噁英，氯丹等儲存庫。13. 蓄積作用＃（accumulation）：外源化學(xué)物以相對較高的濃度富集于某些組織器官的 現(xiàn)象稱為蓄積?！铎o脈注射（直接入血，不存在吸收過程，最迅速、明顯的毒效應(yīng)）＞腹腔注射≥肌內(nèi)注射＞經(jīng)口＞經(jīng)皮10. 氣溶膠毒物經(jīng)肺吸收的影響因素 ：粒子大小、水溶性粒子大小a) 氣溶膠的直徑﹥5 μm者多數(shù)沉積于鼻咽部；b) 2μm～5μm沉降于氣管、支氣管； c) ～2 μm的粒子可吸入肺泡；d) 而﹤ μm則由于其布朗運(yùn)動而隨呼氣而呼出； 水溶性：溶解度大的易在上呼吸道吸收， 溶解度低的氣溶膠易到達(dá)肺泡被吸收分為穿透階段（被動擴(kuò)散透過角質(zhì)層）和吸收階段（通過表皮深層和真皮層并經(jīng)毛細(xì)管進(jìn)入體循環(huán)）因素：（1）化學(xué)物溶解性既有脂溶性，又有水溶性，脂/水分配 系數(shù)接近于1，易被吸收進(jìn)入血液。2）肺泡和血液中物質(zhì)的濃度差（分壓差）。特點(diǎn)：（1）肺泡數(shù)量多、表面積大、 肺泡氣與血液之間距離短、肺內(nèi)血液灌注量大等特點(diǎn)，經(jīng)肺吸收十分迅速，僅次于靜脈注射。9. 肝臟的首過消除（first pass elimination）：是指經(jīng)胃腸道吸收的外源化學(xué)物通過門靜脈首先到達(dá)肝臟，進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化后，再進(jìn)入體循環(huán)，這種現(xiàn)象稱為首過消除。易化擴(kuò)散（facilitated diffusion）：外源毒物，利用載體順濃度梯度轉(zhuǎn)運(yùn)的過程，所以又稱為載體擴(kuò)散；膜動轉(zhuǎn)運(yùn)（cytosis transport）：胞飲和吞噬：液體或固體外源毒物被伸出的生物膜包圍，然后將被包圍的液滴或較大顆粒并入細(xì)胞內(nèi)，達(dá)到轉(zhuǎn)運(yùn)的目的，前者稱為胞飲，后者稱為吞噬，總稱為胞吞作用； 脂水分配系數(shù)：脂水分配系數(shù)=脂相中溶解度/水相中溶解度8. 經(jīng)胃腸道吸收 胃腸道是外源化學(xué)物的主要吸收途徑之一。7. 外源化學(xué)物通過生物膜的方式：被動轉(zhuǎn)運(yùn)（簡單擴(kuò)散、濾過）、特殊轉(zhuǎn)運(yùn)（主動轉(zhuǎn)運(yùn)、易化擴(kuò)散、吞噬作用、胞飲作用）（主要出選擇題）被動轉(zhuǎn)運(yùn)(passive transport)：外源毒物順濃度差通過生物膜的過程簡單擴(kuò)散（simple diffusion) ：毒物由生物膜濃度較高的一側(cè)向濃度較低的一側(cè)擴(kuò)散，當(dāng)兩側(cè)濃度達(dá)到動態(tài)平衡時(shí)，擴(kuò)散即終止 濾過(filtration)：外源化學(xué)物通過生物膜上親水性孔道的過程；依靠生物膜兩側(cè)的滲透壓梯度和流體靜壓的作用 。5. 劑量包括外劑量、內(nèi)劑量和靶劑量；靶劑量指到達(dá)靶組織的可與特定器官或細(xì)胞交互作用的外源毒物和（或）其代謝產(chǎn)物的劑量，對于外源毒物所致?lián)p害作用的性質(zhì)和強(qiáng)度起決定性作用。外源化學(xué)物在體內(nèi)的吸收分布重吸收和增毒促進(jìn)終毒物在靶部位的蓄積，而外源化學(xué)物在進(jìn)入體循環(huán)之前的消除、毒物從作用部位分布到其他部位、毒物的排泄和解毒則減少終毒物在靶部位的蓄積。危險(xiǎn)度評價(jià)：外源化學(xué)物危險(xiǎn)度評價(jià)是以定量的概念， 在人類接觸環(huán)境危害因素后，對健康的潛在損害的程度進(jìn)行估測或鑒定。慢性毒性作用:實(shí)驗(yàn)動物或人連續(xù)較長時(shí)間(接近生命周期)接觸外源性化學(xué)物所產(chǎn)生的中毒效應(yīng)。危害范圍（margin of hazaed,MOH）是人群“暴露值”估計(jì)值與安全限值的比值。藥物的TI和MOS的ED50、ED99都是反應(yīng)率（質(zhì)反應(yīng)）。 藥物的安全范圍margin of safety,MOS來評價(jià)安全性。動物試驗(yàn)外推到人通常有三種基本方法：利用不確定系數(shù)（安全系數(shù)）；利用藥動學(xué)外推（廣泛應(yīng)用于藥品安全性評價(jià)并考慮到受體易感性差別）；利用數(shù)學(xué)模型。2010＃安全限值（safety limit value）指為保護(hù)人群健康，對某種環(huán)境因素（物理化學(xué)生物）的總攝入量的限制性量值或在生產(chǎn)生活環(huán)境和各種介質(zhì)（水土壤空氣食物）中所規(guī)定的濃度和暴露時(shí)間的限制性量值，在低于該濃度和暴露時(shí)間內(nèi)，根據(jù)現(xiàn)有的知識，不會觀察到任何直接和/或間接的有害作用。ED與LD平行。2005,2007觀察到作用的最低水平（LOEL）：在規(guī)定的暴露條件下，通過實(shí)驗(yàn)和觀察，與適當(dāng)對照機(jī)體比較，一種物質(zhì)引起機(jī)體某種作用的最低劑量或濃度。2010最小致死劑量或濃度（ MLD，LD01或MLC，LC01）：指一組試驗(yàn)動物中，僅引起個(gè)別動物死亡的最小劑量或濃度。致死劑量或濃度：指在急性毒性試驗(yàn)中外源化學(xué)物引起受實(shí)驗(yàn)動物死亡的劑量或濃度，通常按照引起動物不同死亡率所需劑量來表示。意義 環(huán)境毒理學(xué)中，半數(shù)耐受限量用于表示一種外源化學(xué)物對某種水生生物 的急性毒性，即一群水生生物(例如魚類)中50%個(gè)體 在一定時(shí)間(48h)內(nèi)可以耐受(不死亡)的某種外源化學(xué)物在水中的濃度(mg/L)，一般用TLm48表示。LD50是評價(jià)化學(xué)物質(zhì)急性毒性大小最重要的參數(shù)，也是對不同化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行急性毒性分級的基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)。 體外實(shí)驗(yàn)(in vitro test)：利用游離的器官、培養(yǎng)的細(xì)胞或細(xì)胞器、生物模擬系統(tǒng)進(jìn)行毒理學(xué)研究，多用于外源化學(xué)物對機(jī)體急性毒作用的初步篩檢、作用機(jī)制和代謝轉(zhuǎn)化過程的深入觀察研究。劑量反應(yīng)關(guān)系是受試物與機(jī)體損傷之間存在因果關(guān)系的證據(jù)。劑量反應(yīng)關(guān)系（doseresponse relationship ），現(xiàn)稱劑量質(zhì)反應(yīng)關(guān)系（quantal doseresponse relationship）表示化學(xué)物質(zhì)的劑量與某一群體中質(zhì)反應(yīng)發(fā)生率之間的關(guān)系。反應(yīng)：是質(zhì)反應(yīng)（quantal response），指暴露某一化學(xué)物得群體中出現(xiàn)某