組織培養(yǎng)育苗技術ppt課件-wenkub.com
2025-01-12 07:45 本頁面
【正文】 但在有的樹種中 （ 如楊樹 ） ， 也可先誘導出根 ， 然后根出芽形成苗木 。 分化芽和根所需的時間 ， 各樹種有差異 ，一般需半個月到一個月 ， 基至更長時間 。接種材料于培養(yǎng)基上不能過分密集 ， 以免雜菌感染時互相影響 。 有的地下部等組織 ， 帶須杈多的還要用小刀削光滑 ， 以利于徹底滅菌 。 硝酸銀在加入氯化鈉后就成不活潑物質 。 2． 幾種常用的消毒劑： 消毒劑既要有良好的作用 ， 又要易被蒸餾水沖洗掉或自行分解的物質 ， 而且不會損傷材料 ， 影響生長 。 5． 外植體的大?。?組織培養(yǎng)所用外植體的大小 ， 大多由植物材料的形狀所決定 ， 小到數毫克 ， 通常在 10～ 100毫克 （ 三 ） 材料的消毒 1． 消毒的目的和作用 ：植物組織培養(yǎng)用的材料大部分取自田間 ， 有的是地上部 ， 而有的是地下部 ， 埋藏于土中 ， 帶有大量的細菌和霉菌 ， 這是無菌組織培養(yǎng)的一大障礙 ， 因為組織培養(yǎng)要求絕對的無菌 ， 否則就無法確立最基本的工作 。 再用消毒過的小刀削一下 ， 留下一些韌皮部 ，就達到形成層處了 。 注意工具用一次要消毒一次 ， 濾紙也要及時更換 ， 防止交叉感染 。 還有一個方法以是將材料放在滅過菌的載玻片或濾紙上 ， 兩手持解剖針 、 小刀 、 鑷子等照上述方法除掉葉原基 。 1． 莖尖的切取 ：芽先端生長點附近的形態(tài) ， 依植物種類其形態(tài)大小各不相同 ， 有的比較大 ， 容易分離；有的則比較小或葉原基著生直到生長點附近或莖隨生長點進入先端漸次凹陷 ， 致使生長點被包埋起來 ， 就不容易分離 。 由于根尖不易滅菌很少采用 。 在培養(yǎng)基滅菌后取出放在桌子上 ， 使其凝固 ， 以后放到培養(yǎng)室中進行三天預培養(yǎng) ，若沒有污染反應 ， 即證明是可靠的 ， 可以使用 ， 但配好的培養(yǎng)基也不要放置時間太長 ， 以免干燥變質 ， 一般至多保存 2周左右 。 分裝時注意不要把培養(yǎng)基沾到管壁上 ， 以免招致雜菌的危害 ， 分裝后立即塞上棉塞或加上蓋子 。 pH值的調整有的在滅菌前進行 ， 也有的在滅菌后進行 。 注意： 瓊脂必須要充分熔化 ， 以免造成濃度不勻；培養(yǎng)基 培養(yǎng)基太軟 ， 無法固定材料 。 加完后可倒入溶化的瓊脂中 。 第五 慢慢熔化瓊脂 由于瓊脂比較難溶解 ， 所以要及早放在水浴鍋上 ， 讓其慢慢熔化 。 第一 將貯藏母液按順序排好 。 2,4— 二氯苯氧乙酸 （ 2,4— D） 用 1N（ N表示當量濃度 ） 的 NaOH溶解后加水定容 。 1． 3 植物生長調節(jié)物質的配制： 配制的濃度一般為 ～ /毫升 。 1 母液的配制和保存 （ 二 ） 1． 2 母液的配制和保存 ：經常使用的培養(yǎng)基 ， 可先將各種藥品配成 10倍或 100倍的母液 ， 貼好標簽 ， 放入冰箱保存 ， 用時再按比例稀釋 。 為了保證培養(yǎng)基成分能夠長期保持不變 ， 一些標準成分應有適當數量的貯備 。 5． N6培養(yǎng)基：在我國廣泛采用 N6培養(yǎng)基進行禾谷類作物的花藥培養(yǎng) 。 下面介紹幾種培養(yǎng)基的應用情況： 1． MS培養(yǎng)基：林木組織培養(yǎng)中應用最為廣泛的 MS培養(yǎng)基 。 5． 瓊脂； 瓊脂是常用的凝固劑 ， 加入瓊脂后可使液體培養(yǎng)基成為固體培養(yǎng)基 。 氨基酸對培養(yǎng)體的生長 、分化起重要作用 ， 但單獨添加時 ， 往往起阻礙作用 ， 只有幾種混合時才有好的作用 。 培養(yǎng)基的成分 （ 三 ） 有機化合物 （ 3） （ 4） 肌醇：使用濃度一般為 100mg/l。 培養(yǎng)基的成分 （ 三 ） 有機化合物 （ 2） （ 3） 植物生長調節(jié)物質：在植物組織培養(yǎng)中 ， 應用較多的有生長素類 ， 如吲哚乙酸 （ IAA） 、 吲哚丁酸（ IBA） 、 萘乙酸 （ NAA） 、 2,4— 二氯苯氧乙酸 （ 2,4— D）等 ， 還有細胞分裂素 ， 如激動素 （ KIN） 、 芐基嘌呤（ BA） 、 玉米素 （ ZT） 、 2— 異戊烯腺嘌呤 （ ZiP） 等 ，此外 ， 還有赤霉素 （ GA3） 、 脫落酸 （ ABA） 、 乙烯利（ CEDP） 等 。 培養(yǎng)基的成分 （ 三 ） 有機化合物 （ 1） 3． 有機化合物 （ 1） 碳水化合物：糖是組織培養(yǎng)中不可缺少的碳源 ， 也是能量物質 ， 而且也有維持一定滲透壓 （ 一般在 ～ 4大氣壓范圍之內 ） 的作用 。 缺乏這些元素會產生缺素癥 ， 影響酶的活性 、方向和新陳代謝 。 大多數培養(yǎng)基既含硝態(tài)氮 ， 又含銨態(tài)氮 。 （ 二 ） 培養(yǎng)基的種類 長期以來 ， 根據組織培養(yǎng)的不同目的和選用的不同材料 ， 科學工作者們設計了不同種類的培養(yǎng)基 。 (一 )煉苗 (二 )苗的取出 (三 )移栽 (四 )移栽苗的管理 組 織 培 養(yǎng) 技 術 一 實驗設備及培養(yǎng)條件 無菌條件 ， 在嚴格的無菌條件下培養(yǎng)植物材料 。 2 自發(fā)生長或馴化：在繼代培養(yǎng)中無需再加入生長物質即可維持其生長。 在進行液體培養(yǎng)時 ， 通過振蕩的方法進行通氣 （ 4） 濕潤器或干燥器 。研究表明由原始細胞團形成胚狀體的細胞分裂方式與和合子胚形成過程中幾乎相同 4 胚狀體形成植株 組織培養(yǎng)中的器官形成方式 根芽與莖芽 1) 芽產生后 ， 于形成芽的基部張根而形成小植株； 2) 一種是先產根 ， 在根上長出芽來； 3) 在愈傷組織的不同部位分別形成芽和根 ， 然后兩者結合形成一株植物 。 細胞分裂的取向 、分裂的速度和細胞生長的方向對分化都有重要影響
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