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體碩士課程ppt課件-wenkub.com

2025-01-11 08:48 本頁面
   

【正文】 DNA長度不超過野生型 DNA長度 ( ) 的75~ 105% 范圍進行包裝 ? 噬菌體運載體 改造野生型 ? DNA: 突變 /缺失等手段消除過多的酶切位點及非必需區(qū)在非必要區(qū)插入外源 基 因 ( 如 lacZ 基因 ) 改變噬菌斑的顏色 、 濁度等 ,以利篩選 插入型載體: 改造后使 ? DNA分子的中心僅有幾個單一酶位點插入外源 DNA片段,如 ? gt10 可克隆 10kb外源片段 置換型載體: 基因組中間部分約三分之一的基因組可以用外源基因進行替換,從而擴大載體的裝載容量,如 EMBL系列可克隆2 0kb外源片段 . 粘粒 ( Cosmid) 粘粒是用基因工程技術(shù)組建的大腸桿菌質(zhì)粒 具有: a. ? 噬菌體的 Cos 位點 b. 整個 pBR322 的 DNA 順序 c. 可 容 納 35── 45kb 外源 DNA d. 有 抗 性 標(biāo) 記 及 多 種 限 制 性 酶 單 切 點 , 像質(zhì)粒那樣在細胞中復(fù)制 , 以感染方式進入 宿 主 細 避 開 了 大 質(zhì) 粒 轉(zhuǎn) 化 因 難 的 缺 點 M13 噬菌體運載體 M13是一種細線狀的單鏈 DNA噬菌體 , 在分子生物學(xué)研究中主要用于 DNA的堿基順序分析 。 表現(xiàn)型 ──不同的質(zhì)粒有不同的表型特性 。 pUC:500700/cell 質(zhì) 粒 的 理 化 性 質(zhì) 具 有 一 般 核 酸 分 子 的 理 化 性 質(zhì) 質(zhì)粒的生物學(xué)特性 寄生性 ──質(zhì)粒只能在宿主的細胞 內(nèi)復(fù)制 穩(wěn)定性 ──每種質(zhì)粒在寄生蟲細胞中總有 一 定 的 拷 貝 數(shù) 同源性 ──不同質(zhì)粒之間可能存在一定的 同源區(qū) 。( ) 復(fù)制類型──松馳型質(zhì)粒的復(fù)制不受宿主細胞蛋白質(zhì)合成的嚴格控制( ) 表現(xiàn)型──不同的質(zhì)粒有不同的表型特性。4 . 質(zhì)粒的分類( 1 ) 按表型效應(yīng)分: ①和質(zhì)粒有關(guān)的性狀是多方面的 ②質(zhì)粒能控制宿主的遺傳性狀──載體 ③一種細菌可以具有不止一種表型效應(yīng)如: a .大腸桿菌的致育的因子 ( F )b . 大腸桿菌素因子 ( C O l E 1 )c . 抗藥性質(zhì)粒 ( R )d . 分解性質(zhì)粒:假單孢菌中發(fā)現(xiàn),如分解樟腦e . 特殊性質(zhì)質(zhì)粒:致瘤膿桿菌的質(zhì)粒,寄主莖部長瘤狀突起
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