生化分析實(shí)驗(yàn)-圓盤電泳-wenkub.com
2025-05-08 16:32 本頁(yè)面
【正文】 剩余的分離膠和濃縮膠的貯 液放到冰箱保存留待下次實(shí)驗(yàn)用。 ? 沒有聚合的丙烯酰胺不要傾倒到水源附近，實(shí)驗(yàn)中全部的膠統(tǒng)一放到指定的容器中，由專門的人收集到一起，統(tǒng)一處理。 ? 凝膠脫色 ： ? 在培養(yǎng)皿（或試管）內(nèi)加入適量脫色液于搖床上進(jìn)行振搖（ 2小時(shí) /次，需 3次）脫色多次直至色帶完全清晰為止。確定電泳結(jié)束時(shí)，不應(yīng)將溴酚蘭跑出凝膠管，以防止標(biāo)準(zhǔn)分子量中的最低分子量蛋白質(zhì)也跑出凝膠管。 裝置凝膠管： 將加好樣品的凝膠管的加樣端（上端），插入上電泳槽孔中，然后將已插滿凝膠管的上電泳槽放入加有電極溶液的下電泳槽內(nèi)。 濃縮膠的制備： （ 1）、輕輕倒掉分離膠玻管上端的液體，并用吸水紙吸去未倒凈的液體（但不能觸及膠面）然后先小心用濃縮膠貯液洗滌凝膠表面 12次，再小心加入該濃縮膠貯液 cm高。 （ 2）、 用 自動(dòng)取液器吸取上述配好的 分離 凝膠貯液沿著小玻管內(nèi)壁小心準(zhǔn)確加入 cm高 。 (TEMED最后在濃縮膠的混合液中加 20 μl ） F： 分別稱取 Acr g； Bis g；加蒸餾水至 10. 0 ml溶解、混勻即可。 脫色液可在電泳的時(shí)候配制 四、 凝膠的配制： （ 1）、分離膠 [%]貯液的配制： A： 稱取 Tris. g；加 mol/L HCL ml；TEMED 100 μ l ；最后加蒸餾水至 10ml； 可。實(shí)驗(yàn)六 聚丙烯酰胺凝膠 圓盤電泳分離蛋白質(zhì) 1. 簡(jiǎn)述聚丙烯
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