實驗六抗體效價的elisa測定-wenkub.com
2025-05-08 08:04 本頁面
【正文】 4 按 “ MAIN MENU”鍵回到主菜單，關(guān)閉電源。 (4)待測抗體或抗原與酶標(biāo)抗體應(yīng)具有相同的免疫特異性 ， 否則無法結(jié)合 。 (2)反應(yīng)各步均應(yīng)充分洗滌 ， 以除去殘留物 ， 減少非特異性吸附 。用目測法則以較陰性對照深色的最高稀釋度作為抗體效價。 由黃色變?yōu)槌壬?。 顯色 : 首先按每 10mLOPD應(yīng)用液加入 。 將反應(yīng)板扣放在濾紙上 ， 以除凈液體 。本法兼有靈敏度高和特異性強兩方面的優(yōu)點。 (2)掌握酶聯(lián)免疫吸附測定技術(shù)，抗體的效價測定及酶聯(lián)免疫測定儀的使用。 免疫酶技術(shù) :酶標(biāo) Ab/Ag,酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后 ，作用于厎物后顯色 ， 根據(jù)顏色的有無和深淺 ， 定量測定Ab/Ag。 1974年 Voller等 用聚苯乙烯微量反應(yīng)板作為免疫吸附劑吸附抗體 (抗原 )， 再與相應(yīng)的酶標(biāo)記物結(jié)合 操作更方便 ， 易重復(fù) 靈敏度可高達 ng（ 109g） 至 pg(1012g)， (EnzymeLinked Immunosorbent Assay) 免疫標(biāo)記技術(shù) 應(yīng)用各種液相和固相免疫分析方法，對體液中的半抗原、抗原或抗體進行定性和定量測定 標(biāo)記抗體或抗原 熒光素、放射性同位素、酶、鐵蛋白、膠體金及化學(xué) (或生物 )發(fā)光劑 鏡檢觀察或進行自動化測定 熒光顯微鏡，射線測量儀，酶標(biāo)檢測儀，電子顯微鏡和發(fā)光免疫測定儀等 直接在細胞、亞細胞、超微結(jié)構(gòu)及分子水平上 ,對抗原抗體反應(yīng)進行定性和定位研究 酶 性能穩(wěn)定 、 經(jīng)濟易得 、 底物無色 、 產(chǎn)物顯色 ，便于檢測 常用的酶 :堿性磷酸酯酶 、 辣根過氧化物酶 (horserad peroxidase簡稱 HRP)、 葡萄糖氧化酶 、 半乳糖苷酶等 。 封閉 : 每孔中 加滿 封閉液 （ 約 300ul多 ） ， 加蓋或用封口膜封板 ，置 37℃ 恒溫箱 60min， 傾去孔內(nèi)液體 ， 按上法洗滌 3次 。 每孔加入OPD應(yīng)用液 1OOuL、 反應(yīng)板置室溫暗處 5～ 30min。穩(wěn)定
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