實(shí)驗(yàn)二蛋白質(zhì)等電點(diǎn)及含量測(cè)定-wenkub.com
2025-05-08 06:47 本頁(yè)面
【正文】 （解決方法：盡快比色） ? 脂肪性物質(zhì)會(huì)影響反應(yīng)。 18 【 思考題 】 ? 影響標(biāo)準(zhǔn)曲線的因素有哪些？ ? 蛋白質(zhì)含量測(cè)定中需要注意什么問(wèn)題？ 19 【 注意事項(xiàng) 】 ? 等電點(diǎn)測(cè)定的實(shí)驗(yàn)要求各種試劑的濃度和加入量必須非常準(zhǔn)確。 于 540nm處比色測(cè)定吸光值 。 試劑 /mL 試管 0 1 2 3 4 5 標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白 蒸餾水 雙縮脲試劑 蛋白質(zhì)含量 mg/mL 15 【 操作步驟 】 —— 雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 ? 上述試劑加完后，充分混勻， 室溫放置 30 min。（繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線） ? 2支 15mL玻璃試管、移液管、吸耳球、移液槍?zhuān)?200uL）、槍頭（ 200uL）、可見(jiàn)光分光光度計(jì)等。 ? 此法的優(yōu)點(diǎn)是較快速，不同的蛋白質(zhì)產(chǎn)生顏色的深淺相近，以及干擾物質(zhì)少。 ? 凡具有兩個(gè)酰胺基或兩個(gè)直接連接的肽鍵，或能過(guò) 1個(gè)中間碳原子相連的肽鍵，這類(lèi)化合物都有雙縮脲反應(yīng)。 8 【 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 】 —— pH值沉淀法測(cè)定蛋白質(zhì)等電點(diǎn) ? 觀察各管中清澈度變化， 記錄結(jié)果 （ 用 +， ++， +++，表示渾濁度）并 解釋現(xiàn)象 。 【 儀器試劑耗材 】
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