silac定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介-wenkub.com
2025-05-06 17:10 本頁面
【正文】 結(jié)果 將會(huì)已 EXCEL表格呈現(xiàn)。 輝駿生物： 免費(fèi)服務(wù)熱線： 4006991663 ：蛋白質(zhì)分離與質(zhì)譜分析 ? （ 1）：提取“輕”型”，“中”型，“重”型細(xì)胞蛋白質(zhì)，等量混合， SDSPAGE分離，染色。 輝駿生物： 免費(fèi)服務(wù)熱線： 4006991663 ：細(xì)胞標(biāo)記與測(cè)試 標(biāo)記： 一般細(xì)胞經(jīng)過添加同位素的培養(yǎng)基傳代培養(yǎng) 56代后，一天或 2天傳代一次，細(xì)胞中蛋白質(zhì)的 Lys和 Arg將被同位素氨基酸取代。 （ 3）：穩(wěn)定同位素標(biāo)記的 Lys和 Arg。 標(biāo)記：在缺乏 Lys和 Arg的培養(yǎng)基中添加 Lys和 Arg的同位素 Lys(D4或 13C6 15N4)、Arg(13C6,或 13C6 15N4)等培養(yǎng)細(xì)胞，使蛋白質(zhì)被標(biāo)記成“中型”或“重型”； 細(xì)胞處理，如藥物處理； 細(xì)胞裂解、提取蛋白質(zhì)； 等量混合對(duì)照與處理組蛋白質(zhì)、 SDSPAGE電泳、染色； 割取蛋白質(zhì)條帶，胰蛋白酶消化，質(zhì)譜分析。 ： SILAC定量蛋白質(zhì)組學(xué)原理 ： SILAC定量蛋白質(zhì)組學(xué)原理 技術(shù)優(yōu)勢(shì) —— 目前比較蛋白質(zhì)組學(xué)最先進(jìn)方法 （ 1）高效性： SILAC是體內(nèi)標(biāo)記技術(shù)，標(biāo)記效率可高達(dá) 100%； （ 2）定量精確： 線性范圍廣，降低由于樣品制備不同而造成的實(shí)驗(yàn)內(nèi)差異； （ 3）高通量、靈敏度高： 可同時(shí)鑒定并定量數(shù)百至數(shù)千
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