【導(dǎo)讀】提高棉花纖維品質(zhì)是棉花育種工作者集中關(guān)注的問題。海島棉在纖維強度、長度。具有重要的理論和應(yīng)用價值。棉花纖維品質(zhì)性狀大多屬于數(shù)量性狀，受多基因控制，最終的表現(xiàn)型是基因型和環(huán)境共同作用的結(jié)果，受環(huán)境條件影響很大。品質(zhì)的方法之一。定位，為棉纖維品質(zhì)分子標(biāo)記輔助育種提供理論依據(jù)。課題組擁有已構(gòu)建好的作圖群體，供本實驗順利進行的SSR引物。高速冷凍離心機，PCR儀，電泳儀等能確保本試驗有序進行。構(gòu)建BC1F2群體遺傳連鎖圖譜，獲得多個與纖維品質(zhì)性狀相關(guān)的QTL。BC1F2群體在分析時，分子標(biāo)記位點可能出現(xiàn)偏分離。6月-7月：確定方案;20xx年7月-20xx年1月：收集實驗資料，進行試驗研究；4月-5月：結(jié)果的處理與分析；驗設(shè)計合理，技術(shù)路線可行，預(yù)期結(jié)果明確，進度安排合理，同意按計劃執(zhí)行。其是棉花高質(zhì)DNA的快速提取。Ulloa等[9-10]陸地棉品種，進行品種間雜交所創(chuàng)制的F2群體，應(yīng)用RFLP技術(shù)構(gòu)建

　　

【正文】 04NA U696 6a A NA U212 NA U212 NA U713 7a A NA U101 DP L0 49 DP L0 63 NA U229 C h r . 05NA U112 NB RI A 11 NA U112 NA U210 8a A NA U210 8b A NA U104 NA U495 NA U495 NA U104 3b A MG HE S NA U104 3a A NA U403 NA U403 NA U403 CE R011 NA U348 DO W 01 NA U620 DO W 01 DP L0 11 CIR250 A NA U524 NA U524 FM15C h r . 07NA U221 NA U221 J E S P R208 A NA U239 NA U109 NA U109 NA U107 NA U610 1a A NA U610 1c A NA U701 9a A NA U701 9b A 9 NA U701 9e A DP L0 54 DP L0 54 FS11NA U701 9c A NA U701 9d A C h r . 09NA U546 NA U337 7b A NA U300 NA U506 4A1 NA NA U546 NA U546 NA U546 NA U362 1e A NA U362 1a A NA U362 1b A FS12FM16C h r . 11NA U225 1a A S T V 03 DO W 04 DO W 04 DO W 04 B NL38 16 B NL38 16 aA1 B NL38 16 C h r . 12NA U358 NA U713 0a A NA U713 0b A NA U346 8a A NA U346 8b A CE R000 NA U120 1a A NA U120 1b A C h r . 13 圖 2 遺傳連鎖圖譜與纖維品質(zhì)相關(guān) QTL 的分布 Linkage map and QTL location of fiber quality in cotton 注： FL:上半部分平均長度 。 FU: 整齊度指數(shù) 。 FM: 馬克隆值 。 FS: 纖維強度 FE: 纖維伸長率 . Note: FL: Fiber length。 FU: Fiber uniformity。 FM: Fiber micronaire。 FS: Fiber strength。 FE: Fiber elongation. 纖維品質(zhì)相關(guān)性狀的 QTL 分析 利用已構(gòu)建的遺傳連鎖圖譜對 BC1F2 纖維品質(zhì)相關(guān)性狀進行 QTL 定位分析，共檢測到 13 個 QTL 位點，分別位于 、 、 、 、 、 和 （圖 表 3）。其中纖維長度相關(guān) QTL 1 個，解釋表型變異率 %；整齊度相關(guān) QTL 2 個，分別解釋表型變異率 %和 %；馬克隆值相關(guān) QTL 6 個，可解釋表型變異范圍 %~%；比強度相關(guān) QTL 3 個，解釋表型變異的NA U382 0D NA U546 NA NA U126 S T V 11 NA U231 2D NA U298 NA U391 3D NA U647 4a NA U647 4b NA U107 NA U998 aD NA U998 c NA U107 NA U704 DO W 10 DO W 03 FU11CE R010 CE R010 T MJ 9D C h r . 14S T V 02 T MM NA U672 NA U523 NA U523 NA U695 NA U675 2D NA U695 NA U646 C h r . 16NA U486 1D J E S P R204 NA U487 1D NA U344 7D C h r . 18NA U213 NA U646 3D NA U650 0D NA U656 2a NA U656 2b NA U617 9D NA U644 9D NA U128 0D DO W 03 DO W 03 NA U353 1D NA U501 3D C h r . 20NA U504 6d DO W 02 DO W 02 DO W 02 S T V 11 NA U394 2c NA U394 2a NA U504 6h NA U230 2b NA U230 2a NA U363 3D S T V 19 NA U394 2b FU12FS13FE11NA U696 6b NA U212 0b NA U212 0a C h r . 22NA U136 9e NA U136 9c NA U328 NA U136 9a NA U136 9b DP L0 06 DP L0 06 DP L0 06 NA U130 2D NA U409 NA U380 4a NA U380 4b NA U623 5b NA U398 NA U623 5a CE R009 FM11FM12FM13FM14C h r . 24DO W 03 DO W 03 NA U137 DP L0 51 S T V 03 NA U210 4D NA U358 S T V 03 CE R004 C h r . 25CE R013 CE R013 CE R013 CE R013 L G01B NL34 DO W 03 DO W 03 L G02DP L0 24 DP L0 24 L G03J E S P NA U613 L G04 %~%；伸長率相關(guān) QTL 1 個，解釋表型變異率 %。 表 3 檢測到的纖維品質(zhì)性狀 QTL Table 3 The screened QTLs of fiber quality 性狀 Traits QTL 染色體 Chr./LG 標(biāo)記區(qū)間 Interval marker 位置 Position LOD 貢獻率 R2 (%) 纖維長度 FL FL11 NAU2083bNAU2083a 整齊度 FU FU11 NAU1071aNAU1071b FU12 DOW027bDOW027c 馬克隆值 FM FM11 NAU1369eNAU1369c FM12 NAU1369cNAU3287 FM13 NAU3287NAU1369b FM14 DPL0068cDPL0068a FM15 DPL0112NAU5247a FM16 NAU5461dNAU3621e 比強度 FS FS11 NAU2395NAU1092a FS12 NAU3621eNAU3621b FS13 NAU5046dDOW027a 伸長率 FE FE11 STV191NAU3942b 3 討論 親本選擇 親本選擇 是關(guān)于遺傳 連鎖圖譜 構(gòu)建 的難易程度及圖譜的適用范圍 的主要因素之一。基因組 DNA 序列的差異是分子 遺傳連鎖 圖譜構(gòu)建的基礎(chǔ)，因此選擇親緣關(guān)系較遠的品種或材料作為分離群體 構(gòu)建 的親本 ，可以獲得較高的多態(tài)性 。 與上述方法相比，陸地棉種內(nèi)雜交育 種也有重要地位，近年來在遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建的過程中，有學(xué)者利用陸地棉種內(nèi)雜交群體進行。 Reddy 等 [28]比較 152 對JESPR SSR 引物在異源四倍體棉種的多態(tài)性，發(fā)現(xiàn) %的引物在陸地棉與海島棉種間雜交群體親本 TM1 與 Pima379 之間表現(xiàn)出多態(tài)性， %的引物在陸地棉種內(nèi)作圖群體親本 TM1 和 Tamcot SP37 中表現(xiàn)出多態(tài)性， %的引物在陸地棉種內(nèi)作圖群體親 本 HS46 和 MARCABUCAGBUS188 間表現(xiàn)出多態(tài)性。 倪會娟等 [29]利用陸地棉品種中棉所 35 和渝棉 1 號，從 8165 對 SSR 引物中篩選出 335 對多態(tài)性引物，比例為 %。王娟等 [30]利用陸地棉遺傳標(biāo)準(zhǔn)系 TM1 和渝棉 1 號，從 5544 對 SSR引物中篩選得到 178 對多態(tài)性引物，多態(tài)性引物比例為 %。但是陸地棉種內(nèi)多態(tài)性較低，與海島棉和陸地棉雜交群體所構(gòu)建的遺傳連鎖圖譜相比，利用陸地棉所構(gòu) 建的遺傳連鎖圖譜缺點很多。 本研究利用中棉所 8 號 和 Pima9053 為親本構(gòu)建 的BC1F2 海陸雜交群體 ， 以 SSR 引物構(gòu)建 BC1F2 的遺傳連鎖圖譜，從 190 對 具有多態(tài)性的 SSR 引物中篩選 得到 262 個 多態(tài)性 位點 ，最終 定位到遺傳連鎖 圖譜 中 的 多態(tài)性位點為 208 個。 圖譜分布特點 構(gòu)建遺傳連鎖圖譜時，研究者都期望標(biāo)記位點能均勻分布于基因組上。自 1994年 Reinisch 等 [16]首次報道四倍體棉花栽培種的 RFLP 圖譜以來，目前國內(nèi)外研究者已構(gòu)建了相對飽和的棉花種間遺傳連鎖圖譜。最為詳盡的遺傳連鎖圖譜是由 Rong 等[31]利用 STS 標(biāo)記構(gòu)建的，該圖譜包含 2584 個位點， 26 個連鎖群或染色體，全長，標(biāo)記間平均距離 。但即便是這樣一個較高密度的遺傳連鎖圖譜也存在標(biāo)記分布不均勻現(xiàn)象。本研究所構(gòu)建遺傳連鎖圖譜 A 亞組標(biāo)記多于 D 亞組，同樣也具有標(biāo)記分布不均的現(xiàn)象。在 A 亞組 9 條染色體上分布有 110 個標(biāo)記位點，覆蓋 ，標(biāo)記間平均距離 。 D 亞組 7 條染色體上分布有 86 個標(biāo)記位點，覆蓋 ，標(biāo)記間平均距離 。同時標(biāo)記間還存在較大間隙，例如 上最大間隙達 25cM。引起標(biāo)記分布不均的原因是多方面的：第一，研究者篩選到的標(biāo)記可能多數(shù)是由基因組中某一亞組開發(fā)得到的；第二，遺傳連鎖圖譜中標(biāo)記數(shù)量較少也會造成染色體某些區(qū)段標(biāo)記稀疏；第三親本間在染色體某些區(qū)段缺乏多態(tài)性。綜上所述，構(gòu)建遺傳連鎖圖譜過程中 ，選用不同種類標(biāo)記和較多的標(biāo)記數(shù)可避免標(biāo)記在基因組上分布不均勻的現(xiàn)象。 參考文獻： [1] Faerber C． Future demands on cotton fiber quality in the textile industry[R]． Beltwide cotton conferences， 1995. 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