【正文】 全血50ul，沖入注有3ml的生理鹽水中，2000轉(zhuǎn)/分 離心3分鐘，吸干凈上清液，留沉淀的紅細(xì)胞，混勻使紅細(xì)胞溶解，加入95％，3500轉(zhuǎn)/分 離心8分鐘取上清液即為紅細(xì)胞SOD提抽液。取10ul紅細(xì)胞SOD提抽液用硫代巴比妥酸比色法測(cè)定，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。 紅細(xì)胞GSHPx測(cè)定【】制備紅細(xì)胞GSHPx測(cè)定液25 ：取肝素抗凝血50ul，生理鹽水洗滌3次，棄上清液留沉淀的紅細(xì)胞，再漩渦混勻器上混勻1分鐘使紅細(xì)胞充分溶血，即為紅細(xì)胞GSHPx測(cè)定液。，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。 紅細(xì)胞Na+K+ATP酶和Ca2+Mg2+ATP酶測(cè)定定磷法，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，結(jié)果用均數(shù)177。標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間樣本均數(shù)差異顯著性用t檢驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)，P、SOD、GSHPx活性的比較（見(jiàn)表1）表1顯示：力竭組小鼠紅細(xì)胞MDA含量顯著高于安靜組（)，但與安靜組比較，力竭運(yùn)動(dòng)組出現(xiàn)了下降的趨勢(shì)，而藥物組與力竭組相比有升高的趨勢(shì)。表1 力竭游泳后各組小鼠MDA含量、SOD、GSHPx活性的比較組別nMDASODGSHPx（nmol/gHb）（U/gHb）(U／gHb)安靜組177。177。177。 力竭組177。＊177。＊177。 藥物組177。 △177。 △177。 ＊p△ p 不同組別小鼠紅細(xì)胞Na+K+ATP酶和Ca2+Mg2+ATP酶活性的比較（見(jiàn)表2）表2顯示力竭組小鼠紅細(xì)胞Na+K+ATP酶和Ca2+Mg2+ATP酶活性顯著低于安靜組（p表2 力竭游泳后各組小鼠Na+K+ATP酶和Ca2+Mg2+ATP酶活性的比較組別nNa+K+ATPCa2+Mg2+ATP（umolPi/gHb/h）（umolPi/gHb/h）安靜組177。177。 力竭組177。＊177。＊ 藥物組177。△177?！鳎?p△p 力竭組和藥物組游泳至力竭時(shí)間的比較177。，177。（p討論 幾丁聚糖對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)小鼠紅細(xì)胞自由基代謝的影響幾丁聚糖（Chitosan）又稱脫乙酰甲殼素、殼聚糖，它是一種維持、保護(hù)甲殼動(dòng)物和【】微生物軀體的天然氨基多糖。幾丁聚糖的基本結(jié)構(gòu)單位是葡萄糖胺。研究報(bào)道5幾丁聚糖具有清除自由基、中和體內(nèi)酸性代謝產(chǎn)物、提高機(jī)體免疫力等多種生理活性。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，一次力竭游泳后，與安靜組相比，力竭組小鼠紅細(xì)胞MDA含量顯著升高，而SOD活性明顯下降，GSHPx活性有下降趨勢(shì)；而補(bǔ)充幾丁聚糖的服藥組紅細(xì)胞MDA含量明顯低于力竭組，同時(shí)藥物組紅細(xì)胞SOD活性明顯高于力竭組、GSHPx活性有升高趨勢(shì)，這提示4周補(bǔ)充幾丁聚糖可以減輕力竭運(yùn)動(dòng)過(guò)程中自由基對(duì)紅細(xì)胞的過(guò)氧化損害，提高小鼠體內(nèi)抗氧化酶活性，尤其是抗氧化酶系中的SOD活性。本文推測(cè)幾丁聚糖抗氧化作用可能與幾丁聚糖的特殊結(jié)構(gòu)和特殊生物活性有關(guān)：幾丁聚糖分子結(jié)構(gòu)具有活性基團(tuán)氨基，該基團(tuán)可以直接與自由基發(fā)生反應(yīng)，消除體內(nèi)自由基，幾丁聚糖還具有較強(qiáng)的細(xì)胞親和性及陽(yáng)離子性，可以與紅細(xì)胞相互作用，在紅細(xì)胞膜表面形成一層糖屏障，保護(hù)膜結(jié)構(gòu)的完整性，防止紅細(xì)胞受到自由基的損傷；另外，有研究也表明，持續(xù)服用幾丁聚糖也可以激活機(jī)體內(nèi)的抗氧化酶活，性[67 ]。所以，幾丁聚糖可能通過(guò)以上幾種途徑減輕力竭運(yùn)動(dòng)過(guò)程中自由基對(duì)紅細(xì)胞的過(guò)氧化損害，使藥物組的紅細(xì)胞MDA含量下降，同時(shí)使紅細(xì)胞抗氧化酶活性維持在較高水平。＋＋ 幾丁聚糖對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)小鼠紅細(xì)胞NaK+ATP酶和Ca2+Mg2ATP酶活性的影響＋＋紅細(xì)胞NaK+ATP酶Ca2+Mg2ATP酶是存在與紅細(xì)胞膜上的兩種重要功能性蛋白酶，它們?cè)谘鯕膺\(yùn)輸、能量轉(zhuǎn)換、信息傳遞以及維持細(xì)胞內(nèi)外離子平衡方面具有重要的作用。這兩種酶活力的變化可以在一定程度上反映紅細(xì)胞的功能狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，力竭運(yùn)動(dòng)后，＋＋＋力竭組紅細(xì)胞 NaK+ATP酶和Ca2+Mg2ATP活性顯著下降，而藥物組紅細(xì)胞NaK+ATP＋＋酶和Ca2+Mg2ATP活性顯著高于力竭組。本文認(rèn)為，力竭性運(yùn)動(dòng)后紅細(xì)胞NaK+ATP酶＋和Ca2+Mg2ATP酶活性下降可能與自由基攻擊紅細(xì)胞膜導(dǎo)致的氧化損傷有關(guān)。紅細(xì)胞氧化損傷后膜脂肪鏈斷裂交聯(lián)、蛋白質(zhì)交聯(lián)變性、變性珠蛋白沉積于膜上，結(jié)果導(dǎo)致紅細(xì)胞膜＋＋結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，膜流動(dòng)性下降，即NaK+ATP酶和Ca2+Mg2ATP酶所在的脂質(zhì)微環(huán)境發(fā)＋＋生了變化，繼發(fā)性引起N aK+ATP酶和Ca2+Mg2ATP酶的活性下降，而幾丁聚糖可能通＋過(guò)阻止紅細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)維持紅細(xì)胞膜的正常功能，防止力竭運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的紅細(xì)胞Na＋K+ATP酶和Ca2+Mg2ATP酶活性的下降。本研究結(jié)果初步表明，幾丁聚糖具有阻止力竭運(yùn)動(dòng)過(guò)程中自由基對(duì)紅細(xì)胞的過(guò)氧化損傷、維持紅細(xì)胞正常功能的作用。 幾丁聚糖對(duì)小鼠游泳至力竭時(shí)間的影響，差異具有顯著性（p4周補(bǔ)充幾丁聚糖能明顯降低力竭運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的紅細(xì)胞自由基過(guò)氧化損傷、提高紅細(xì)胞抗氧化酶活性、抵抗力竭運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的紅細(xì)胞ATP酶功能下降，并且可以延長(zhǎng)小鼠游泳至力竭時(shí)間，這提示幾丁聚糖在延緩運(yùn)動(dòng)疲勞方面具有一定的作用。參考文獻(xiàn)[1] , , ，etal．Analysis of antioxidant properties of chitosan and its oligomers ． Bulletin of Experimental Biology and Medicine，2006，142（4）：461463[2], , ，etal． Graft polymerization of acrylamide on chitosan: Copolymer structure and properties．Polymer Science Series A，2006，48（9）：918923[3] Jeon TI, Hwang SG, Park NG, effect of chitosan on chronic carachloride induced hepatic injury in rats． Toxicology,2003,187(1):6773 [4]朱珂,馮煒權(quán),武桂新,2002,21(1):3336 [5 ]李旭輝,2004,23(4):509~511.[6]石壘, 熊正英, ,2003,20(4):6263 [7]陳筱春, 文質(zhì)君, 熊靜宇, ,2003,18(3):156157第五篇：畢業(yè)論論文謝辭謝辭本文是在導(dǎo)師xx老師精心指導(dǎo)和大力支持下完成的。徐老師是我畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）的指導(dǎo)老師，徐老師在學(xué)校擔(dān)任要職，公務(wù)冗忙，但對(duì)我們畢業(yè)論文工作的開(kāi)展給予了極大的支持。讓我愧疚的是，個(gè)人能力有限，沒(méi)能為此課題做出太多貢獻(xiàn)，在此深表感謝和歉意。在畢業(yè)實(shí)驗(yàn)期間，徐老師沒(méi)少費(fèi)心思。從論文創(chuàng)作的選題、結(jié)構(gòu)、內(nèi)容、甚至是編排格式上都悉心指導(dǎo)，提出了寶貴意見(jiàn)，讓我在專業(yè)論文創(chuàng)作上又進(jìn)了一步。在此期間，我學(xué)到了許多以往所沒(méi)有學(xué)到的東西，包括思維方式，考慮問(wèn)題的全面性、做人方式等等。徐教授以其嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的治學(xué)態(tài)度、高度的敬業(yè)精神、兢兢業(yè)業(yè)、孜孜以求的工作作風(fēng)和大膽創(chuàng)新的進(jìn)取精神讓我終身受益。同時(shí)，在與徐教授的談話中，我深刻認(rèn)識(shí)到自身知識(shí)儲(chǔ)備的不足及思維拓展能力的欠缺。跟徐教授做實(shí)驗(yàn)期間，讓我學(xué)會(huì)了觀察思考，學(xué)會(huì)了理論聯(lián)系實(shí)際，培養(yǎng)了我嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)習(xí)態(tài)度，培養(yǎng)了堅(jiān)持不懈的耐力，我想這些都將對(duì)即將踏上工作崗位的我們有著深遠(yuǎn)的意義。同時(shí)我還要感謝趙老師、胡老師、江老師、林老師、xx同學(xué)和xx同學(xué)，感謝他們?cè)谖彝瓿僧厴I(yè)論文給予的幫助與支持，使我得以順利完成畢業(yè)論文。