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5生物制藥培訓心得體會[最終版]-資料下載頁

2025-09-02 23:50本頁面
  

【正文】 狀的雜交細胞技術。目前普遍采用聚乙二醇(PEG)誘導融合。 5、提高藥用酶產(chǎn)量的措施 ( p194) ① 選育優(yōu)良的產(chǎn)酶細胞 ② 工藝條件的優(yōu)化控制 ③ 高效生物反應器的設計與應用 ④ 添加誘導物 ⑤ 控制阻遏物的濃度 ⑥ 添加 第 5 頁 共 5 頁 表面活性劑 ⑦ 添加刺激劑 ⑧ 添加產(chǎn)酶促進劑 6、雜交瘤細胞篩選原理( p147) 采用HAT培養(yǎng)基,當HGPRT陰性細胞在HAT 上生長時,有序細胞合成核苷酸的主要途徑被抑制,嘌呤補救途徑缺失,細胞中核酸合成所需要的嘌呤核苷酸缺失,細胞不能生長。而正常細胞中由于補救途徑存在,可以保證細胞生長。因此當B淋巴細胞和HGPRT陰性骨髓瘤細胞在促融劑作用下融合后,在 HAT培養(yǎng)基中淋巴細胞在組織培養(yǎng)中不能生長繁殖,一般在5~7d內(nèi)死亡,骨髓瘤細胞由于不能利用培養(yǎng)基中的二次黃嘌呤導致DNA合成受阻,只有雜交瘤細胞由于吸收了淋巴細胞中的補救途徑,可在阻斷核苷酸合成主要途徑下仍可利用培養(yǎng)基中的二次黃嘌呤和胸腺嘧啶獲得HGPRT和TK的產(chǎn)物以供DNA合成所需,而且從骨髓瘤細胞中獲得了腫瘤細胞在體外不斷生長的特點,最終在HAT培養(yǎng)基中選擇性的存活下來。
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