【正文】 由多糖類化合物構(gòu)成，小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，當(dāng)一個含有各種分子的樣品溶液緩慢流經(jīng)時，各分子在色譜柱內(nèi)進(jìn)行兩種不同的運動，即垂直向下的運動和無規(guī)則的擴(kuò)散運動，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過的路程較短，移動速度較快；相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道，通過的路程較長，移動速度較慢。因此，樣品中相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出，相對分子質(zhì)量中等的分子后流出，相對分子質(zhì)量最小的分子最后流出，這種現(xiàn)象又叫分子篩現(xiàn)象。此外，凝膠本身具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，相對分子質(zhì)量大的分子通過這種網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上的空襲時阻力大，而相對分子質(zhì)量小的分子通過時阻力小，因此不同分子量的蛋白質(zhì)分子可以獲得分離。2．與其他真核細(xì)胞相比，紅細(xì)胞的特點及這一特點對進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離的意義哺乳動物及人的成熟的紅細(xì)胞是雙面凹圓餅狀，沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器。其含有的血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應(yīng)該收集脫液。這使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作。3．電泳的作用及其原理電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子，如氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核苷酸、核酸等都具有可解離基團(tuán)，它們在某個特定的pH下會帶上正電或負(fù)電；在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極方向移動。電泳技術(shù)就是在電場的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。、均勻嗎？答：凝膠實際上是一些微小的多孔球體，小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道。相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，只能分布在顆粒之間，通過的路程較短，移動速度較快；相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)的通道，通過的路程較長，移動速度較慢。因此，樣品中相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出，相對分子質(zhì)量中等的分子后流出，相對分子質(zhì)量最小的分子最后流出，從而使各種相對分子質(zhì)量不同的分子得以分離。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻，就會在色譜柱內(nèi)形成無效的空隙，使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過，攪亂洗脫液的流動次序，影響分離的效果。菊花組織培養(yǎng)要點1　植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)當(dāng)植物細(xì)胞脫離了原來所在植物體的器官或組織而處于離體狀態(tài)時，在一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件的作用下，就可能表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完整的植株（即細(xì)胞全能性）。要點2　植物組織培養(yǎng)的基本過程（1）基本過程離體的植物組織、器官或細(xì)胞組織培養(yǎng)脫分化愈傷組織組織培養(yǎng)再分化試管苗人為使用植物激素控制（2）基本概念細(xì)胞分化：植物的個體發(fā)育過程中，細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上都會出現(xiàn)穩(wěn)定性的差異，形成這些差異的過程叫做細(xì)胞分化。愈傷組織：離體的植物組織或細(xì)胞，培養(yǎng)一段時間后，會通過細(xì)胞有絲分裂，形成愈傷組織。愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。脫分化（去分化）：由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化，或者叫做去分化。再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個過程叫做再分化。（3）植物體細(xì)胞發(fā)育成完整植株（表現(xiàn)出全能性）的條件。脫離原來所在植物體（離體）、營養(yǎng)供給、激素控制、無菌條件、適宜的溫度、PH和光照等。要點3　影響植物組織培養(yǎng)的因素（1）材料因素的影響不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大，容易進(jìn)行無性繁殖的植物也容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。同一種植物材料，材料的年齡、保存時間的長短也有影響。幼齡、保存時間短的植物材料容易培養(yǎng)成功。菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)芽。（2）營養(yǎng)因素的影響需要配置適宜的培養(yǎng)基，常用的一種培養(yǎng)基是 MS培養(yǎng)基，其主要成分包括：大量元素，如N、P、K、Ca、Mg、S；微量元素，如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；有機(jī)物，如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素，以及蔗糖等。（3）激素的影響在配置好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素。植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，都會影響實驗結(jié)果。①按照不同的順序使用這兩類激素，會得到不同的實驗結(jié)果。使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素細(xì)胞既分裂又分化同時使用分化率提高②當(dāng)同時使用這兩類激素時，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。生長素用量比細(xì)胞分裂素用量植物細(xì)胞的發(fā)育方向比值高時有利于根的分化、抑制芽的形成比值低時有利于芽的分化、抑制根的形成比值適中時促進(jìn)愈傷組織的生長（4）pH、溫度、光照等條件的影響不同的植物對各種條件的要求往往不同。進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，溫度控制在18～22℃，并且每日用日光燈照射12h。要點4　植物組織培養(yǎng)技術(shù)的優(yōu)點植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖，保持遺傳性狀的一致；可以實現(xiàn)花卉的連續(xù)生產(chǎn)，不受開花季節(jié)的限制。課題2 月季的花藥培養(yǎng)【導(dǎo)學(xué)誘思】1． 被子植物的花粉發(fā)育被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 、 和 等階段?；ǚ凼怯苫ǚ勰讣?xì)胞經(jīng)過 而形成的，因此花粉是 。2． 產(chǎn)生花粉植物的兩種途徑花藥中的花粉花藥中的花粉 叢芽叢芽 誘導(dǎo)生根移栽脫分化脫分化 通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：①②思考：（1）花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑的差別主要取決于什么？（2）什么是體細(xì)胞胚？（3）單倍體性細(xì)胞產(chǎn)生的花粉胚，也可發(fā)育成為單倍體植株，這和植物的體細(xì)胞克隆有區(qū)別嗎？3． 影響花藥培養(yǎng)的因素誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低，受多種因素影響，其中 與 是主要的影響因素； 也是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素；另外親本植株的生長條件、 以及 等對誘導(dǎo)成功率都有一定影響。思考：（1）為什么選擇合適的花粉發(fā)育期是誘導(dǎo)花藥培養(yǎng)成功率的重要因素？（2）為什么花藥的培養(yǎng)要選擇完全未開放的花蕾？4． 實驗操作（1） 材料的選取 選擇花藥時，一般要通過 來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時期的方法有 和 。（2）材料的消毒 ：%的氯化汞溶液,實驗完畢應(yīng)如何處理?（3）接種和培養(yǎng)：剝離花藥時，應(yīng)注意哪些問題？花藥培養(yǎng)過程中應(yīng)注意哪些問題？【疑難點撥】1．為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難？花瓣松動后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來困難。2．植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)有何區(qū)別？相同之處：培養(yǎng)基的配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。不同之處：花藥培養(yǎng)的選材非常重要，需事先摸索時期適宜的花蕾；花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時更換培養(yǎng)基；花北培養(yǎng)對培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。這些都使花藥的培養(yǎng)難度加大。