淡水魚蛋白肽行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿-資料下載頁
2025-08-24 11:28本頁面
【正文】 三氟醋酸：分析純?！?水：超純級或二次蒸餾水?！?相對分子質(zhì)量校正曲線所用標(biāo)準(zhǔn)品： 細(xì)胞色素C（cytochrome C,MW12384） 抑酞酶（aprotinin,MW6512） 桿菌酶（bacitracin,MW1423） 乙氨酸－乙氨酸－酪氨酸－精氨酸（MW451） 乙氨酸－乙氨酸－乙氨酸（MW189） 儀器和設(shè)備 高效液相色譜儀：配有紫外檢測器和含有GPC數(shù)據(jù)處理軟件的色譜工作站?！?流動相真空抽濾脫氣裝置?！?超聲波振蕩器?！?分析天平：。 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性實驗 色譜柱：TSKgel G2000 SWXL 300mm(GEL LOT 502R)或性能與此相近的同類型其他適用于測定肽的分子量分布的凝膠柱 流動相：乙腈：水：三氟乙酸，體積比為40:60: 檢測波長：UV220nm 流速： 柱溫：30℃ 進樣體積：10μL 為使色譜系統(tǒng)符合檢測要求，規(guī)定在上述色譜條件下，凝膠色譜柱的柱效即理論塔板數(shù)（N）按三肽標(biāo)準(zhǔn)品（乙氨酸－乙氨酸－乙氨酸）峰計算不低于5000，低聚肽的分配系數(shù)（Kd）應(yīng)在0～1之間?！?相對分子質(zhì)量校正曲線制作%～%（W/V）的上述不同相對分子質(zhì)量的肽標(biāo)準(zhǔn)品溶液，～，得到系列標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖。以相對分子質(zhì)量的對數(shù)（lgMW）對保留時間作圖或作線性回歸得到相對分子質(zhì)量校正曲線及其方程。 樣品制備，用流動相定容至刻度，超聲振蕩10min，使樣品充分溶解混勻，～，其濾液用于測定?！?相對分子質(zhì)量的計算，然后使用GPC數(shù)據(jù)處理軟件，根據(jù)相對分子質(zhì)量校正曲線方程對樣品的色譜圖及其數(shù)據(jù)進行計算處理，即可得到樣品中蛋白肽的相對分子質(zhì)量大小及分布范圍。用峰面積歸一化法計算相對分子質(zhì)量在5000u以下的蛋白質(zhì)水解物相對百分比之和。
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