[高等教育]慢病毒包裝操作說明-資料下載頁
2025-03-23 13:23本頁面
【正文】 3. 根據(jù)靶細(xì)胞的培養(yǎng)液的量調(diào)節(jié)病毒和聚凝胺的添加量。在轉(zhuǎn)導(dǎo)中可用足量的聚凝胺（）來獲得需要的最終濃度4. 用細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋病毒株，獲得需要的MOI。如要不知道病毒效價(jià)，可連續(xù)稀釋病毒株或包裝懸液，使得用于轉(zhuǎn)導(dǎo)的病毒總量不會(huì)超過病毒包裝時(shí)培養(yǎng)液的1/3。5. 在靶細(xì)胞中加入病毒懸液，轉(zhuǎn)導(dǎo)824h。離心的培養(yǎng)液可以增加感染效率。6. 移除丟棄存留病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)培養(yǎng)液，換成新鮮的生長(zhǎng)培養(yǎng)液。注意：移棄的培養(yǎng)液包含可感染的慢病毒。7. 繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞2448h，在靶細(xì)胞中積累基因產(chǎn)物。8. 收集細(xì)胞進(jìn)行分析，或者用合適的抗生素再進(jìn)行篩選。注意：為了檢測(cè)轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，可以選取少量細(xì)胞用抗生素處理。剩余的細(xì)胞可進(jìn)行后續(xù)的分析。細(xì)胞進(jìn)可能用完，但不要轉(zhuǎn)導(dǎo)后少于24h內(nèi)進(jìn)行分析。
黨政相關(guān)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1